刘晔
- 作品数:3 被引量:48H指数:3
- 供职机构:香港中文大学更多>>
- 发文基金:河北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 突变体富集聚合酶链反应检测胰腺癌K-ras基因突变的研究被引量:6
- 2005年
- 张峰刘三光刘晔李冬斌李荣琴谢绍建蔡建辉
- 关键词:胰腺癌K-RAS基因突变
- 基因枪转导突变特异性K-rassiRNA对胰腺癌细胞生长的抑制作用被引量:15
- 2006年
- 目的探讨基因枪转导突变特异性K-ras si RNA对胰腺癌细胞生长的抑制作用。方法根据胰腺癌细胞系突变特征,设计突变特异性K-ras si RNA;应用基因枪将si RNA转导入胰腺癌细胞系,提取总RNA和胞浆蛋白;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法(Westernblot)方法,检测基因枪转导突变特异性K-ras si RNA对突变型K-ras基因表达的干扰作用;行细胞爬片K-ras p21蛋白免疫组织化学染色,探讨si RNA对K-ras p21蛋白表达的抑制作用;采用CCK-8(cell counting kit-8)活细胞计数法,绘制转基因前后细胞生长曲线,观察si RNA的抑瘤效果。结果RT-PCR结果显示,K-ras突变特异性si RNA,能有效抑制K-ras基因表达(P<0.05);Westernblot和免疫组织化学结果表明,K-ras p21蛋白的表达明显降低(P<0.05);细胞生长曲线显示,转导si RNA组较对照组细胞生长明显受抑制(P<0.05)。结论基因枪可以有效地对小片段双链si RNA进行细胞内转导;突变特异性K-ras si RNA,可显著下调胰腺癌细胞系突变型K-ras mRNA及K-ras p21蛋白表达,并能有效抑制肿瘤细胞的增殖。
- 张峰刘晔刘三光谢绍建李冬斌李荣琴蔡建辉
- 关键词:基因枪SIRNA胰腺癌细胞生长
- RNA干预研究及其在肿瘤基因治疗中的应用被引量:29
- 2006年
- 近年来研究表明,一些小的双链RNA(dsRNA)通过特异性结合互补链,可以高效、特异的阻断体内特定基因表达,促使mRNA降解,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,称为RNA干预(RNAi)。它是体内抵御外在感染的一种重要保护机制,可以作为简单、有效的代替基因敲除的遗传工具。RNAi正在彻底改变基因组学领域的研究步伐。
- 张峰刘晔刘三光谢绍建李冬斌李荣琴蔡建辉
- 关键词:肿瘤基因治疗特异性结合基因缺失基因敲除基因组学RNAI