刘光桥
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 沙眼衣原体多形态膜蛋白D基因的克隆与表达及其免疫保护性研究
- 沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis, Ct)有19个血清型,可引起人类多种疾病,Ct感染眼部,引起沙眼和慢性滤泡性结膜炎,导致翳痕和眼盲。WHO统计全球约有5亿人感染沙眼,其中900万人致盲,是引起失...
- 刘光桥
- 关键词：沙眼衣原体原核表达
- 文献传递
- 沙眼衣原体的一种重组主要外膜蛋白及其制备方法与应用
- 本发明公开了沙眼衣原体的一种重组主要外膜蛋白及其编码基因与制备方法。本发明所提供的沙眼衣原体重组主要外膜蛋白，是具有序列表中序列2氨基酸残基序列的蛋白质，或者是将序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失...
- 端青刘光桥朱虹宋立华檀华何君左庭婷
- 文献传递
- 衣原体多形态膜蛋白研究进展被引量：3
- 2007年
- 衣原体全基因组序列分析发现编码多形态膜蛋白(Polymorphic membrane proteins,Pmps)基因家族,Pmps与衣原体的感染和免疫机制相关。本文就衣原体Pmps基因组和氨基酸序列、在细胞中的位置以及结构和功能的研究进展进行了综述。
- 刘光桥朱虹
- 关键词：衣原体
- 呼肠病毒BYD株吸附蛋白σ1的原核表达及其抗原性鉴定
- 2007年
- 将呼肠病毒BYD株S1片段编码的细胞吸附蛋白基因连接至pET-28a(+),构建表达载体pET-28a(+)-S1,转化表达宿主菌E.coli BL21(DE3),分析表达载体能否表达预期大小的重组σ1,并进一步鉴定重组σ1的抗原性。SDS-PAGE实验表明,经IPTG诱导后,表达载体能表达53kD左右蛋白质,与重组σ1的预期大小相符;免疫印迹分析表明重组σ1有较好的抗原性和特异性,可用于呼肠病毒诊断试剂的制备。
- 宋立华何君朱虹刘光桥黄如统貌盼勇端青
- 关键词：呼肠病毒原核表达
- 沙眼衣原体L2型主要外膜蛋白的原核表达及其抗原性分析被引量：1
- 2008年
- 克隆表达沙眼衣原体(Ct)L2血清型的主要外膜蛋白(MOMP)基因,并鉴定重组MOMP(rMOMP)的抗原性,为进一步研究Ct感染的诊断和预防技术奠定基础。应用PCR技术对CtL2型标准株的MOMP基因进行特异性扩增,将扩增产物克隆入表达载体pET-32a(+),成功构建了rMOMP-pET-32a(+)表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)后摇菌进行rMOMP的诱导表达、鉴定和纯化,免疫印迹和ELISA法分析显示rMOMP可与兔源抗CtL2多克隆抗体发生特异性反应,表明rMOMP具有良好的抗原性。
- 刘光桥马力宋立华朱虹端青
- 关键词：沙眼衣原体主要外膜蛋白原核表达
- 沙眼衣原体多形态膜蛋白D基因序列分析及其B细胞抗原表位预测被引量：5
- 2008年
- 分析沙眼衣原体多形态膜蛋白D（PmpD）的基因序列并预测PmpD蛋白的B细胞抗原表位。在GenBank中检索沙眼衣原体不同血清型的PmpD基因序列，进行序列比对分析。以L2血清型PmpD基因序列为材料，采用Karplus-Schulz、Chou-Faaman和Gamier-Robson方案预测蛋白质的二级结构和柔性区；按Jamesonv-wolf方案预测抗原指数，运用Kyte-Doolittle方案预测PmpD氨基酸的亲水性，利用Emini方案预测蛋白质的表面可及性。检索到20个沙眼衣原体不同菌株的PmpD基因序列，分析发现其核苷酸序列非常保守，一致性高达99．14％-100％；对预测结果综合分析，推测最有可能的B细胞表位位于PmpDN端的67-74、132-140、335-340、851-861、972-988及1091-1097。多参数方案综合预测PmpD蛋白的B细胞抗原表位，为进一步实验鉴定PmpD抗原表位及其多表位疫苗设计和研究奠定基础。
- 刘光桥宋立华邱少富端青
- 关键词：沙眼衣原体B细胞表位
- 沙眼衣原体多形态膜蛋白D基因的克隆表达及其免疫血清中和作用研究被引量：2
- 2009年
- 通过DNA重组技术表达沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)多形态膜蛋白D(polymorphic membrane protein D,PmpD),用Ct-PmpD重组蛋白(rCt-PmpD)制备免疫兔血清,观察该免疫血清在鸡胚攻毒试验中的保护作用。采用PCR技术从Ct L2型基因组中扩增PmpD基因,连接pET32a(+)表达载体,转化宿主细胞E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达rCt-PmpD,用Ct L2免疫兔血清Western Blot(WB)检测其抗原性。复性后的rCt-PmpD免疫家兔制备免疫血清,免疫荧光法(IF)检测其免疫原性,并用鸡胚攻毒试验检测其中和活性。rCt-PmpD在工程菌中获得高效表达,以包涵体的形式存在胞浆中,WB结果显示rCt-PmpD能被Ct L2免疫兔血清识别。用rCt-PmpD免疫家兔获得的血清在IF中能与Ct L2反应;中和试验表明,rCt-PmpD免疫血清能有效保护鸡胚免于死亡。成功构建重组表达载体rpET32a-PmpD,表达的rCt-PmpD具有良好的免疫原性,rCt-PmpD免疫血清具有中和活性,为进一步研制亚单位疫苗奠定基础。
- 刘光桥马晓红宋立华左庭婷端青
- 关键词：沙眼衣原体原核表达
