刘元嫄
- 作品数:10 被引量:21H指数:3
- 供职机构:上海交通大学更多>>
- 发文基金:上海市科委科技攻关项目海洋赤潮灾害立体监测技术与应用国家海洋局重点实验室开放基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:环境科学与工程医药卫生生物学化学工程更多>>
- 软骨藻酸胶体金免疫层析检测试纸条的研制被引量:14
- 2011年
- 制备软骨藻酸(DA)胶体金免疫层析快速检测试纸条,建立一种快速检测贝类食品中软骨藻酸含量的检测方法.采用柠檬酸三钠还原氯金酸法制备颗粒直径20 nm的胶体金;电镜鉴定后,确定胶体金标记软骨藻酸单克隆抗体的最佳条件并制备金标抗体;金标抗体喷涂在玻璃纤维垫上制成胶体金结合垫;软骨藻酸与牛血清蛋白(BSA)的偶联物构成的包被抗原(DA-BSA)和羊抗鼠二抗分别包被在硝酸纤维素膜(NC膜)上构成检测线和控制线;组装成胶体金免疫层析试纸条并进行灵敏度测试.结果显示,胶体金试纸条检测灵敏度为20 ng/mL,检测过程可在15 min内完成.该方法灵敏度高、简单快速,无需特殊仪器设备,适用于广大基层单位的现场和批量检测,有着良好的商业开发应用前景.
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- 关键词:软骨藻酸单克隆抗体胶体金免疫层析
- 软骨藻酸间接竞争ELISA检测方法的研究被引量:2
- 2011年
- 为研究满足海产品日常分析的免疫检测法,采用自行制备的软骨藻酸多抗隆抗体,建立间接竞争ELISA检测方法,分别摸索了抗原、一抗、二抗的最佳使用浓度及温育温度与时间,并用该方法测定了贝类样品中的DA含量.结果表明,该方法最低检测限约为18 ng·mL-1,贝类样品测定的加标回收率在47.2%—94.2%之间.RSD在12.3%—17.0%之间.所购买3种的贝类样品中均无DA检出.
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- 关键词:软骨藻酸间接竞争ELISA多克隆抗体
- 软骨藻酸的酶联免疫试剂盒及其检测方法
- 一种生物检测技术领域的检测软骨藻酸的酶联免疫试剂盒。试剂盒包括:包含软骨藻酸特异性抗体、包被了软骨藻酸抗原的酶标板、酶标二抗、软骨藻酸标准溶液、包被缓冲液、封闭液、洗涤液、抗体稀释液、显色剂与终止液;检测方法为:用试剂盒...
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- 文献传递
- 抗软骨藻酸单克隆抗体杂交瘤细胞株的构建被引量:4
- 2010年
- 为了获得稳定、高效分泌抗软骨藻酸(DA)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,采用活泼酯法制备软骨藻酸免疫抗原(DA-KLH)和包被抗原(DA-BSA),以DA-KLH免疫BALB/c小鼠,用细胞融合技术筛选抗软骨藻酸单克隆抗体杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备大量单抗,捕获EL ISA法测定小鼠免疫球蛋白亚型,间接ELISA法测定腹水效价;用G蛋白亲和层析法来纯化腹水。结果显示,成功构建2株能稳定分泌DA单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株2B1和4C2,抗体亚类分别为IgG1和IgG2a,间接EL ISA检测小鼠腹水的抗体效价达1∶64 000,腹水纯化后蛋白浓度为1.27和0.675 mg/mL。研究结果表明,成功制备的抗DA单克隆抗体杂交瘤细胞株稳定、高效,为利用该单抗研制快速检测软骨藻酸的胶体金免疫层析试纸条打下基础。
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- 关键词:软骨藻酸单克隆抗体杂交瘤细胞株
- 市售贝类麻痹性贝毒快速生化检测方法探究
- 2010年
- 为了研究快速检测海产品中低浓度麻痹性贝毒(paralytic shellfish poisoning,PSP)的生化方法,在传统小白鼠法的基础上,使用浓度(以STXeq计)为1和0.2μg/kg的市售双壳贝类PSP提取液对小鼠进行腹腔注射,分别研究暴露15、60、120min后小鼠血液中ACh、AChE、NO和NOS的变化情况.结果发现,低浓度(0.2μg/kg)、短时间(15min)条件下仅ACh含量发生显著变化[与对照组相比p<0.05,含量(以蛋白计)为(141.2±14.8)μg/mg];而NO与NOS却在长时间(120min)暴露后才发生改变[与对照组相比p<0.05,分别为(68.7±3.8)μmol/g及(40.1±4.9)U/mg].在高浓度下,3个时间点的ACh含量也均发生显著变化.结果表明,在低浓度及短时间条件下反映PSP效应的指标仅是ACh,从而可以尝试选择其作为快速检测PSP的生化指标.
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- 关键词:麻痹性贝毒生化指标双壳贝类
- 基于可见光的羟基自由基发生装置及捕集方法
- 一种臭氧杀菌技术领域的基于可见光的羟基自由基发生装置及捕集方法,包括:测试箱体、臭氧发生器、臭氧在线监测仪、光源、培养皿和风扇,其特征在于:臭氧发生器、光源、培养皿和风扇分别固定设置于测试箱体内,光源固定在培养皿的上方,...
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- 文献传递
- 软骨藻酸多克隆抗体的制备
- 2010年
- 为建立软骨藻酸(DA)的免疫检测法,本研究采用活泼酯法将DA与载体蛋白KLH(BSA)偶联形成完全免疫抗原(包被抗原),并通过紫外光谱扫描证明偶联成功与否。用完全免疫抗原DA-KLH对新西兰白兔进行免疫,间接ELISA法测定血清效价。实验结果表明偶联成功,经过19周免疫后血清效价达到1:1600,纯化后获得效价为1:800的多克隆抗体,同时也间接证明了合成的完全抗原具有免疫原性,为以后建立免疫分析法奠定了基础。
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- 关键词:软骨藻酸多克隆抗体
- 软骨藻酸的多克隆抗体制备及间接ELISA方法的建立
- 软骨藻酸是由海洋硅藻中的拟菱形藻属产生的一种海洋生物毒素,被海洋生物(如贝类、蟹等)摄食后能够在其体内富集,人类若误食被污染的海产品,会造成腹泻呕吐、记忆丧失等症状,严重者甚至昏迷死亡,因此又被称作失去记忆性贝毒。软骨藻...
- 刘元嫄
- 关键词:软骨藻酸多克隆抗体间接ELISA方法
- 文献传递
- 早期检测麻痹性贝毒毒性的方法
- 本发明公开了一种生物工程技术领域的早期检测麻痹性贝毒毒性的方法,将现场贝类样品制作成检测液,然后用检测液腹腔注射小鼠,检测小鼠脑中乙酰胆碱含量和一氧化氮合酶活力的变化,由乙酰胆碱含量和一氧化氮合酶活力水平得到麻痹性贝毒含...
- 程金平张鉴达宋玉玲刘元嫄王文华仵彦卿
- 文献传递
- 基于可见光的羟基自由基发生装置及捕集方法
- 一种臭氧杀菌技术领域的基于可见光的羟基自由基发生装置及捕集方法,包括:测试箱体、臭氧发生器、臭氧在线监测仪、光源、培养皿和风扇,其特征在于:臭氧发生器、光源、培养皿和风扇分别固定设置于测试箱体内,光源固定在培养皿的上方,...
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