冯洒然
- 作品数：12 被引量：28H指数：4
- 供职机构：苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“青蓝工程”优秀青年骨干教师培养对象江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- MMP-2和MMP-9介导的脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白的下调在CNSL发病机制中的作用
- 目的和意义 中枢神经系统是白血病髓外浸润的常见部位,发生中枢神经系统白血病(central nervous system leukemia, CNSL)的患者总体生存时间短,预后差,然而目前对CNSL的发病机制却知之甚少...
- 冯洒然
- 关键词：白血病细胞中枢神经系统白血病紧密连接蛋白
- 文献传递
- 中枢神经系统白血病小鼠白血病细胞对血脑屏障的破坏作用被引量：13
- 2011年
- 目的通过建立中枢神经系统白血病（CNSL）小鼠模型及体外血脑屏障模型，观察白血病细胞对血脑屏障的影响，探讨白血病细胞浸润中枢神经系统的发病机制。方法对10只BALB／c裸鼠进行切脾、环磷酰胺腹腔注射、全身亚致死剂量照射等预处理，经尾静脉注射含1．2×10^3个SHI-1细胞的0．2mlPBS，观察小鼠的活动、饮食等一般状态，应用RT—PCR、组织病理切片、骨髓细胞涂片等检测裸鼠脑组织中SHI-1细胞的浸润生长情况，用激光共聚焦显微镜观察紧密连接蛋白ZO-1、纤维蛋白原的表达。将人脑微血管内皮细胞（BMVEC）接种于铺有Matrigel胶的Transwell小室系统中建立体外血脑屏障模型。将HL-60、SHI-1细胞接种于血脑屏障模型的Transwell小室上层，在倒置显微镜下观察BMVEC的形态变化，采用激光共聚焦显微镜观察紧密连接蛋白ZO-1的表达，计算白血病细胞的穿膜率。结果①接种SHI-1细胞后30～35d有50％的小鼠先后发生CNSL，出现肢体瘫痪、失明等症状，骨髓及脑组织有不同程度的白血病细胞浸润；骨髓和脑组织中同时检测到人MLL-AF6融合基因的转录；在被浸润的脑组织中检测到纤维蛋白原的渗出及ZO-1表达降低。②与HL-60和SHI-1细胞共培养后，BMVEC失去紧密相连的致密单层结构，细胞呈分散、单个生长，ZO-1表达明显下调，SHI-1细胞对BMVEC的形态改变较HL-60明显，SHI-1细胞穿透率为（40．33±1．53）％，较HL-60细胞[（11．83±1．44）％]明显增高（P〈0．05）。结论白血病细胞通过破坏血脑屏障而浸润中枢神经系统是CNSL的发病机制之一。
- 冯洒然陈子兴岑建农沈宏杰王元元姚利
- 关键词：HL-60细胞SHI-1细胞血脑屏障细胞浸润中枢神经系统
- 化学修饰与抗OX40L单抗双诱导移植物免疫耐受的实验研究
- ＜正＞目的:从体外和体内两个水平探讨化学修饰物聚乙二醇联合抗OX40L单抗是否诱导异基因移植物产生针对受者的免疫耐受,并观察其对急性移植物抗宿主病（aGVHD）的影响。方法:实验1以不同浓度的甲氧基聚乙二醇（mPEG）修...
- 冯洒然黄一虹
- 文献传递
- 化学修饰与抗OX40L单抗双诱导移植物免疫耐受的实验研究
- 本文从体外和体内两个水平探讨化学修饰物聚乙二醇联合抗OX40L单抗是否诱导异基因移植物产生针对受者的免疫耐受，并观察其对急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响。
- 冯洒然黄一虹
- 关键词：化学修饰免疫耐受急性移植物抗宿主病
- 文献传递
- 幽门螺杆菌感染与血液病被引量：4
- 2008年
- 冯洒然黄一虹
- 关键词：血液病
- MMP-2和MMP-9介导的脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白的下调在CNSL发病机制中的作用
- 目的 探讨白血病细胞分泌的基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9对脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白的破坏在中枢神经系统白血病(CNSL)发病机制中的作用.方法 (1)体外实时定量PCR检测SHI-1、HL-60和U937白...
- 冯洒然陈子兴岑建农沈宏杰姚利王元元
- 关键词：基质金属蛋白酶-2紧密连接蛋白中枢神经系统白血病
- 白血病细胞株分泌的基质金属蛋白酶在中枢神经系统白血病发病机制中的作用被引量：4
- 2016年
- 目的 观察白血病细胞分泌的基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9对脑微血管内皮细胞（BMVEC）紧密连接蛋白ZO-1、claudin-5、occludin表达及对血脑屏障（BBB）通透性的影响,探讨MMP-2和MMP-9在中枢神经系统白血病（CNSL）发病机制中的作用.方法 ①实时定量PCR检测SHI-1、HL-60、U937细胞MMP-2、MMP-9基因的转录水平;明胶酶谱法检测细胞培养上清中MMP-2和MMP-9蛋白表达;体外穿膜实验观察各白血病细胞株的侵袭能力.②将原代人BMVEC接种于铺有Matrigel胶和纤维黏连蛋白包被的Transwell小室系统中,建立体外BBB模型.将蛋白酶抑制剂GM6001处理或未处理的SHI-1、HL-60、U937细胞或MMP-2/MMP-9基因沉默的SHI-1细胞接种于BBB模型的Transwell小室上层与BMVEC共培养,倒置相差显微镜观察BMVEC的形态变化,激光共聚焦显微镜观察紧密连接蛋白ZO-1、claudin-5和occludin的表达,计算白血病细胞的穿膜率.结果 ①SHI-1细胞表达较高转录水平的MMP-2和MMP-9及酶活性,且侵袭能力强于HL-60、U937细胞（P＜0.01）.②与HL-60、SHI-1和U937细胞共培养后,融合致密的BMVEC之间出现间隙、细胞呈单个生长,紧密连接蛋白ZO-1、claudin-5和occludin的表达明显下调,各白血病细胞均不同程度地穿过体外BBB进入Transwell小室下层.其中SHI-1细胞对BMVEC的形态改变及3种紧密连接蛋白的下调最为明显,穿膜率最高.GM6001明显抑制白血病细胞分泌MMP-2和MMP-9,使BMVEC的形态有所恢复,同时上调ZO-1、claudin-5和occludin的表达,降低了BBB的通透性.③用siRNA分别沉默MMP-2和MMP-9基因后,SHI-1细胞分泌MMP-2和MMP-9被抑制,SHI-1细胞穿膜率较沉默前分别下降43.64％和57.30％（P＜0.01）,ZO-1、claudin-5和occludin表达上调.结论 白血病细胞株分泌的MMP-2和MMP-9能通过降解BMVEC紧密连接蛋白ZO-1、claudin-5和occludin而破坏BBB.
- 冯洒然陈子兴岑建农沈宏杰王元元姚利
- 关键词：HL-60细胞U937细胞SHI-1细胞基质金属蛋白酶类
- 移植物化学修饰与阻断OX40一OX40L途径预防异基因骨髓移植小鼠移植物抗宿主病的研究被引量：3
- 2009年
- 目的观察甲氧基聚乙二醇-琥珀酰亚胺丙酸酸酯（mPEG-SPA）与抗OX40L单抗预处理移植物对小鼠异基因骨髓移植后急性移植物抗宿主病（aGVHD）的影响及其机制。方法供、受鼠的脾淋巴细胞体外混合培养，加入抗OX40L单抗孵育培养后，再用mPEG—SPA化学修饰，与C57BIM6供鼠骨髓细胞混合后移植给经致死量全身照射的BALB／c受鼠。同时设相应的对照组。观察移植后受鼠aGVHD的临床表现、病理学改变、存活时间及生存率等，检测移植鼠T淋巴细胞亚群，细胞因子的变化及异基因嵌合体。结果①单纯骨髓移植对照组小鼠均出现aGVHD临床表现，17d内全部死于aGVHD，存活时间为（12．1±5．5）d；而mPEG—SPA和抗OX40L单抗单独或联合预处理组小鼠一般状态较好，部分出现aGVHD表现，且较单纯骨髓移植对照组症状轻，皮肤、肝脏、小肠病理表现均较单纯骨髓移植对照组明显减轻，mPEG—SPA和抗OX40L单抗单独或联合预处理组小鼠存活时间分别为（36．2±24．9）、（32．0±24．8）和（44．3±23．2）d，均较单纯骨髓移植对照组明显延长（P〈0．05），其中抗OX40LmPEG—SPA联合预处理组小鼠平均存活时间最长（P〈0．05），mPEG—SPA单独预处理组和抗OX40L单独预处理组生存率分别为50．0％、41．7％，明显高于单纯骨髓移植组，OX40LmPEG—SPA联合预处理组生存率最高，为66．7％。②移植后对照组小鼠血清IFN一吖浓度升高，在＋10～＋15d时达高峰；而mPEG—SPA和抗OX40L单抗单独或联合预处理组降低，＋10d时降至最低，OX40LmPEG—SPA联合预处理组降低最明显（P〈0．01）。移植后对照组IL4、IL一10浓度轻度降低，而mPEG-SPA和抗OX40L单抗单独或联合预处理组均明显升高（P〈0．05），＋10～＋15d达高峰，以联合组升高最明显（P〈0．01）。@mPEG—SPA和抗OX40L单抗单独或联合预处理组＋60d时异基因嵌合率�
- 黄一虹冯洒然杜冰徐开林潘秀英
- 关键词：甲氧基聚乙二醇化学修饰OX40L移植物抗宿主病
- CD11c^(low)CD45RB^(high)调节性树突状细胞的诱导培养及鉴定
- 2012年
- 背景:新近发现CD11clowCD45RBhigh调节性树突状细胞在参与免疫负向调控机制和临床治疗上有潜在的意义。目前对于健康人骨髓来源的调节性树突状细胞的体外诱导培养及鉴定的研究较少。目的:体外培养正常人骨髓来源的具有CD11clowCD45RBhigh表型的调节性树突状细胞,从细胞形态、免疫表型、吞噬功能及刺激T淋巴细胞增殖能力等方面对其进行鉴定。方法:分离正常人骨髓单个核细胞分别在不同的培养体系中进行体外诱导培养,实验分3组:①调节性树突状细胞组,在含粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素10,转化生长因子β1的1640培养基中培养7d后,用脂多糖刺激24h。②未成熟树突状细胞组,用含粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素4的1640培养基培养8d。③成熟树突状细胞组,用含粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素4的1640培养基培养7d后,予脂多糖刺激24h,使其成熟。光镜和扫描电镜观察树突状细胞的形态,流式细胞仪检测其免疫表型以及吞噬能力,CCK-8法检测其刺激异基因淋巴细胞增殖能力。结果与结论:①人骨髓源单个核细胞在联合应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,白细胞介素10,转化生长因子β1培养8d后获得的细胞具有调节性树突状细胞的典型特征和免疫表型,说明该实验建立的培养调节性树突状细胞的方法是切实可行的。②CD11clowCD45RBhigh调节性树突状细胞这种新亚群具有较强的吞噬能力,刺激T淋巴细胞增殖的能力较弱,为调节性树突状细胞诱导免疫耐受的进一步研究奠定实验基础。
- 刘苍春黄一虹冯洒然谷红红曾令宇李德鹏徐开林
- 关键词：树突状细胞调节性骨髓单个核细胞粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子白细胞介素10
- 化学修饰与抗OX40L单抗双诱导移植物免疫耐受的实验研究
- 本文从体外和体内两个水平探讨化学修饰物聚乙二醇联合抗OX40L单抗是否诱导异基因移植物产生针对受者的免疫耐受，并观察其对急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响。
- 冯洒然黄一虹
- 关键词：化学修饰抗宿主病
- 文献传递
