冯帆
- 作品数:31 被引量:55H指数:5
- 供职机构:沈阳军区总医院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家自然科学基金首都医学发展科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学环境科学与工程理学更多>>
- LINE-1 ORF-1p过表达对肝癌细胞株SMMC7721增殖和锚定非依赖性生长的影响被引量:5
- 2011年
- 目的研究逆转座子L1编码蛋白ORF-1p的表达对肝癌细胞株SMMC7721细胞增殖的影响。方法利用带Flag标签的L1 ORF1表达载体,转染SMMC7721细胞;采用Western blot法检测反转座子L1 ORF1编码蛋白ORF-1p的表达;采用软琼脂成集落实验和相关报告基因检测ORF-1p表达对肝癌细胞p53、p15和p21活性的影响。结果在SMMC7721细胞中,Flag-ORF-1p表达能够显著促进该细胞的增殖(P<0.05),增强该细胞的锚定非依赖性生长(P<0.05),降低p53、p15和p21报告基因的活性。结论 L1基因编码蛋白ORF-1p能够促进肝癌细胞的生长、浸润以及肿瘤的形成。
- 高旭东陆荫英冯帆王春平王鈜常秀娟杨永平
- 反义核酸药物癌泰得对乳腺癌细胞株的体外杀伤作用被引量:3
- 2010年
- 目的探讨反义核酸药物癌泰得对乳腺癌细胞株的体外杀伤作用。方法1)MTT法测定不同浓度癌泰得对乳腺癌细胞株BT474的抑制率。2)Annexin/PI双染法,流式细胞仪检测细胞凋亡比率。结果MTT法观察到癌泰得对BT474细胞的杀伤作用,流式细胞仪检测到BT474细胞凋亡率达16.82%,以晚期凋亡为主。结论癌泰得对BT474细胞有抑制作用,抑制率与浓度呈线性相关。
- 张帆冯帆任磊谢文秀李自健杨俊兰
- 关键词:反义寡核苷酸乳腺肿瘤
- 基于ERα-EGFP核颗粒形成的荧光成像分析快速识别环境雌激素样物质
- 本文建立了稳定转染ERα-增强型绿色荧光蛋白融合蛋白表达载体的人骨肉瘤U2OS细胞模型和基于ERα-EGFP核颗粒形成的荧光成像分析的EES筛查方法,并采用该方法对本室收集的8个双酚类、烷基酚或苯胺类环境污染物进行快速筛...
- 冯帆王莉莉
- 关键词:环境污染物雌激素
- LINE-1基因编码蛋白ORF-1p在肿瘤研究中的进展被引量:1
- 2013年
- LINE-1基因是人类基因组的重要结构和功能组成部分,在肿瘤细胞的增殖和进展过程中发挥重要作用。LINE-1基因编码两个蛋白质:LINE-1 ORF-1p和ORF-2p,目前对于ORF-2p的研究较多,而LINE-1 ORF-1p具有其自身独特的功能。本文结合我们的工作对LINE-1 ORF-1p的功能和研究进展进行综述。
- 张帆冯帆杨俊兰
- 关键词:分子机制
- 靶向CCP22基因的干扰性RNA、含有该干扰性RNA的药物组合物及其应用
- 本发明涉及靶向CCP22(complement control protein 22,CCP22)的干扰性RNA(interfering RNA)、含有该干扰性RNA的药物组合物及其医药用途。
- 叶棋浓冯帆朱翠严景华韩聚强徐小洁王凌雪
- 祛痹止痛凝胶质量标准研究被引量:2
- 2015年
- 目的:建立祛痹止痛凝胶的质量标准。方法采用 HPLC 法,以 Welchrom C18柱,甲醇-水(体积比为45∶55)为流动相,在274 nm 检测波长处测定徐长卿中丹皮酚的含量,同时对徐长卿、姜黄和冰片进行薄层鉴别。结果与结论丹皮酚在10~320μg/ml 浓度范围内线性关系良好(r =0.9998)。平均加样回收率为97.42%,RSD为1.01%(n =6),薄层色谱斑点清晰,阴性对照无干扰。该方法可有效控制制剂的质量。
- 贾辉王作君冯帆马宏达
- 关键词:丹皮酚高效液相色谱薄层色谱
- 靶向CCP22基因的干扰性RNA、含有该干扰性RNA的药物组合物及其应用
- 本发明涉及靶向CCP22(complement control protein 22,CCP22)的干扰性RNA(interfering RNA)、含有该干扰性RNA的药物组合物及其医药用途。
- 叶棋浓冯帆朱翠严景华韩聚强徐小洁王凌雪
- 文献传递
- 反义核酸药物癌泰得与单克隆抗体曲妥珠单抗对乳腺癌细胞株SKBR3的体外杀伤作用
- 2012年
- 目的探讨反义核酸药物(癌泰得)与单克隆抗体靶向药物(曲妥珠单抗,商品名赫赛汀),两者单独或联合应用对HER2过表达乳腺癌细胞株的体外杀伤作用。方法采用间接免疫荧光法观察HER2和hTERT在SKBR3细胞中的分布及药物对两种蛋白亚细胞定位的影响;MTT法测定不同浓度癌泰得与赫赛汀单独或联合应用对SKBR3的抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡比率。结果(1)SKBR3细胞中同时表达HER2和hTERT蛋白,HER2分布于细胞膜表面,hTERT分布于细胞核,加入赫赛汀后,HER2出现了胞质迁移,hTERT定位无明显变化;(2)MTT法观察到赫赛汀与癌泰得单用和联用均对SKBR3细胞有抑制作用,联用时抑制率增加;当0.4μmol/L癌泰得与0.85μg/ml赫赛汀联用时为相加作用;0.4μmol/L癌泰得分别与1.70、3.40、6.88、13.75μg/ml赫赛汀联用时为协同作用;(3)流式细胞仪检测:单独应用赫赛汀,细胞凋亡率为11.26%,单独应用癌泰得,凋亡率为25.75%,两药联用凋亡率为41.41%,以晚期凋亡为主。结论(1)HER2与hTERT在SKBR3中的亚细胞定位不同;(2)单独应用赫赛汀或癌泰得,对SKBR3细胞有抑制作用,抑制率与药物浓度呈线性相关;(3)两药联用具有相加或协同作用,联用可提高SKBR3细胞的凋亡率。
- 张帆杨俊兰游俊浩冯帆任磊谢文秀李自健
- 关键词:单克隆抗体
- 利用小干扰RNA降低新基因CCP22的表达水平
- 2010年
- 目的:构建针对新基因CCP22的小干扰RNA(siRNA),降低CCP22蛋白表达水平。方法:设计一条针对新基因CCP22的siRNA序列,克隆到siRNA表达载体pSilencer-2.1-U6-neo上,测序验证正确后,将此表达载体与重组Flag-CCP22的表达载体pcDNA3.0-FLAG-CCP22共转染HEK293T细胞系,或单独转染CCP22siRNA,用West-ern印迹检验构建的CCP22siRNA的效果。结果:构建了针对新基因CCP22的siRNA,Western印迹结果表明CCP22siRNA序列能有效降低外源和内源CCP22蛋白的表达水平。结论:构建的CCP22siRNA干扰效果好,为进一步研究CCP22的功能奠定了基础。
- 冯帆叶棋浓
- 关键词:小干扰RNA基因表达
- 应用高内涵分析技术识别雄激素受体激动剂被引量:8
- 2014年
- 目的应用高内涵分析(HCA)技术快速识别对雄激素受体(AR)具有激动作用的药物。方法以稳定表达AR-增强绿色荧光蛋白融合蛋白(AR-EGFP)的人骨肉瘤细胞U2OS为模型,采用HCA技术观察本实验室收集的98个上市药物或优选化合物对AR-EGFP细胞核转位和核颗粒形成的影响,筛选对AR具有激活作用的化合物,分析其浓度效应关系;并用前列腺癌细胞PC-3(AR-/-)和LINCaP(AR+/+)的AR荧光素酶报告基因的筛选方法进行验证。结果 HCA筛选发现,在98个受试药物中,乐卡地平、螺内酯、异丙肾上腺素和组胺能浓度依赖地促进AR-EGFP细胞核转位,其EC50分别为0.067±0.008,0.21±0.04,0.87±0.26和(4.53±1.04)μmol·L-1;促进AR-EGFP细胞核颗粒形成,其EC50分别为0.023±0.006,0.82±0.13,3.00±1.68和(4.76±1.57)μmol·L-1;地塞米松≥3μmol·L-1时也表现出促进AR-EGFP细胞核转位和颗粒形成的作用。荧光素酶报告基因结果显示,在PC-3和LINCaP细胞中,乐卡地平、异丙肾上腺素、螺内酯、组胺和地塞米松均可促进外源和内源AR的转录活性,与HCA结果基本一致,但结果高于HCA筛选测得的EC50。结论以荧光标记细胞为基础的HCA技术是灵敏和快速识别AR激动剂的分析方法。乐卡地平、螺内酯、异丙肾上腺素、组胺和地塞米松具有AR激动活性。
- 冯帆龙隆李微王莉莉
- 关键词:雄激素受体激动剂