冉新泽
- 作品数:288 被引量:907H指数:14
- 供职机构:第三军医大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金重庆市科学技术委员会院士基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学核科学技术更多>>
- 人骨髓间质干细胞的分离培养与鉴定
- 成人骨髓中除含有造血干细胞以外,还含有另一类干细胞——间质干细胞(或称基质干细胞).间质干细胞具有很强的自我复制能力,如在不同的诱导条件下能产生具有各种表型的子代细胞,即可分化成骨、软骨组织、脂肪、肌肉、肌腱、以及骨髓基...
- 艾国平粟永萍冉新泽刘晓宏刘贤华罗成基程天民
- 文献传递
- 间充质祖细胞源性的神经元样细胞肌内移植后自身特性的维持被引量:1
- 2013年
- 目的探讨间充质祖细胞(mesenchymal progenitor cells,MPCs)源性的神经元样细胞肌内移植后能否维持其自身特性。方法取3周龄健康GFP转基因C57小鼠后肢长骨进行MPC培养及鉴定,选取生长良好的第3代MPC,采用神经元原代培养上清液进行神经元样细胞诱导分化后收集细胞,并制备成5×105/μL细胞悬液备用。选取12周龄健康C57小鼠24只,按随机数字表法分为损伤+移植细胞组、损伤+生理盐水组、假手术+移植细胞组、假手术+生理盐水组。损伤+移植细胞组及假手术+移植细胞组:将制备的5μL MPC悬液散点注入小鼠三头肌内;损伤+生理盐水组和假手术+生理盐水组:同法注入等量生理盐水。术后4周取材,荧光显微镜下观察肌内移植细胞存活情况,电镜观察肌肉超微结构的变化,免疫荧光染色检测神经元特异性标志物NSE、NeuN及神经胶质特异性标志物GFAP的表达情况。结果肌内移植细胞生长良好且均匀分布于肌细胞间隙,并抑制了肌细胞核、线粒体、内质网的退变及肌肉纤维化的发生。损伤+移植细胞组定植存活的移植细胞阳性表达:NSE(58.35±1.37)%、NeuN(60.22±0.16)%及GFAP(13.32±1.65)%,损伤+生理盐水组、假手术+移植细胞组、假手术+生理盐水组均无阳性细胞表达。结论 MPC具有良好的生物学活性,经体外诱导分化为神经元及神经胶质样细胞后移植于失神经支配肌内可定植存活,并能够维持神经元及神经胶质样细胞的特性,同时有效抑制了肌细胞核、线粒体、内质网的退变及肌肉纤维化的发生。
- 赵文勇万立华粟永萍冉新泽
- 关键词:周围神经神经元样细胞
- 放烧复合伤大鼠血清对小鼠骨髓造血祖细胞的影响被引量:5
- 2005年
- 以单纯烧伤、放射损伤为对照 ,观察放烧复合伤大鼠血清对骨髓造血祖细胞的影响及细胞因子的变化。用6 0 Coγ射线全身照射 12Gy ,5kW溴钨灯致大鼠背部 30 %全身体表面积Ⅲ度烧伤。伤后 3、12、2 4、4 8、72和 96小时无菌抽取大鼠血清。按 10 μg m1蛋白加入到骨髓红系或粒系培养体系中培养。伤后 2 4小时 ,应用ELISA法检测血清TNFα水平 ,应用放射免疫法检测IL 6含量。结果显示 ,无论烧伤或放烧复合伤血清组 ,伤后 3、12、2 4、4 8、72和 96小时的CFU E、BFU E和CFU GM培养集落数 ,均显著高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,且以伤后 2 4小时最高 ,烧伤组高达 342 .8%、2 6 1.6 %和 2 2 8.4 % ;复合伤组为 2 5 2 .4 %、2 0 5 .1%和 174 .2 %。但当加入放射损伤大鼠血清时 ,CFU E、BFU -E和CFU GM集落数生长较少 ,最高为 12 .7%。同时 ,烧伤组和复合伤组血清TNFα和IL 6水平显著高于正常对照组 ,更高于放射损伤组。结论 :烧伤或放烧复合伤后的血清对骨髓红系和粒系造血均有明显的促进作用 ,放射损伤后的血清则有明显的抑制作用 ;该作用与血清细胞因子变化有关。
- 冉新泽粟永萍郑怀恩郭朝华刘都户周燕虹刘晓宏艾国平
- 关键词:烧伤放烧复合伤血清造血祖细胞细胞因子
- 姜黄素对实验性肝纤维化大鼠结缔组织生长因子表达的影响被引量:3
- 2009年
- 目的观察中药姜黄素抗四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的疗效及作用机制。方法将50只Wistar大鼠分为正常对照组、模型对照组、中药治疗1组及2组,于造模第1周及第4周开始用姜黄素治疗。免疫组织化学技术检测结缔组织生长因子(CTGF)在肝内表达及其在细胞中的定位含量。结果经中药姜黄素治疗后肝纤维化大鼠肝组织内CTGF表达降低,CTGF的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞质。结论中药姜黄素能有效地减轻CCl4诱导肝纤维化大鼠的损伤及纤维化程度,其机制可能是抑制肝内CTGF表达。
- 刘中禄孙仁山冉新泽
- 关键词:姜黄素肝硬化胞间信号肽类和蛋白质类
- 皮肤创伤愈合的转录组学研究进展被引量:2
- 2019年
- 皮肤创伤愈合涉及到复杂的细胞、分子网络调控,愈合障碍导致的慢性难愈创面和增生性瘢痕是棘手的医学难题。转录组学是在整体水平上研究特定时空细胞中全部基因转录本种类、结构和功能及转录调控规律的学科,其相关技术的发展为研究皮肤创伤愈合不同阶段、不同结局的分子机理和调控网络提供了有力工具。本文就转录组学在皮肤创伤愈合中的应用情况、取得成果等方面的研究进行简要综述,旨在为后续的研究提供参考。
- 王涛赵娜龙爽汪国建冉新泽粟永萍
- 关键词:皮肤伤口愈合转录组转录组学
- 难愈性创面修复局部人血管内皮生长因子165真核表达载体的构建与评价被引量:1
- 2005年
- 目的:克隆人血管内皮生长因子165cDNA并构建其真核表达载体,为放创复合伤的难愈性创面的促愈修复提供实验基础。方法:实验于2001-09/2003-05在第三军医大学创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室完成。从白血病HL-60细胞提取总RNA,经过反转录-聚合酶链反应扩增编码人血管内皮生长因子165的cDNA序列,将其克隆至pMD18-T载体后进行测序鉴定,然后将该序列插入双顺反子的真核表达载体pIRES2-EGFP的多克隆位点中。观察以下指标①反转录-聚合酶链反应扩增人血管内皮生长因子165cDNA。②阳性重组质粒pMD18-T-hVEGF165的筛选。③DNA测序鉴定。④阳性重组质粒pIRES2-EGFP-VEGF165的筛选。结果:反转录-聚合酶链反应扩增得到约600bp的目的DNA片段,酶切pMD18-T-hVEGF165得一与目的片段大小一致的条带,且测序分析其与GeneBank中报道的编码人血管内皮生长因子165cDNA序列完全一致。pIRES2-EGFP-hVEGF165的酶切电泳显示目的条带成功插入真核表达载体pIRES2-EGFP中。结论:成功构建了含有人血管内皮生长因子165cDNA的真核表达载体,如果通过转基因技术可提高血管内皮生长因子165在放创复合伤难愈性创面的局部的表达,有望为修复难愈创面开辟一条新的途径。
- 刘志君徐辉冉新泽许川山
- 关键词:血管生成因子
- 制作鼠组织优质石蜡切片方法的探讨被引量:13
- 2002年
- 目的 探讨制作大鼠各组织优质石蜡切片的方法。方法 鼠组织块的常规脱水、透明、浸蜡、切片与染色。结果 根据所述经验和方法可制作出 3~ 4μm的优质石蜡切片。
- 闫国和古德全林远冉新泽魏永江
- 关键词:鼠组织石蜡切片制作方法
- 骨髓间充质干细胞成骨分化中转化生长因子受体的表达被引量:3
- 2009年
- 背景:机体受创后尤其是骨折发生后,骨髓间充质干细胞将启动成骨分化,其表面多种生长因子如碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子、骨形态发生蛋白的受体表达将发生变化。目的:观察骨折损伤后不同时相骨髓间充质干细胞表面转化生长因子受体的表达变化。设计、时间及地点:对照观察实验,于2002-02/2003-11在解放军第三军医大学预防医学院复合伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室完成。材料:选用健康成年兔,建立成兔桡骨骨折模型。方法:在造模当日及造模后1,5,10,15,20d抽取实验兔骨髓液,取骨髓有核细胞,纯化间充质干细胞,成骨分化培养基诱导培养。主要观察指标:通过Western-blot法检测转化生长因子β1,β2受体在间充质干细胞上的表达。结果:造模后1d转化生长因子β1受体表达与造模当日比较无明显差异(P>0.05);造模后5d,其表达显著高于造模当日(P<0.05);造模后10d与5d比较无明显差异(P>0.05),但显著高于造模当日(P<0.05);造模后15,20d的转化生长因子β1受体表达显著高于造模当日及造模后5,10d(P<0.01)。造模后1,5d转化生长因子β2受体表达与造模当日无明显差异(P>0.05);造模后10,15d,其表达显著高于造模当日(P<0.05);造模后20d转化生长因子β2受体的表达显著高于造模当日及造模1,5,10,15d(P<0.01)。结论:创伤后体内骨髓间充质干细胞成骨分化过程中转化生长因子β1,β2受体的表达呈现逐渐增高的趋势。
- 王劲张勇罗成基冉新泽
- 关键词:间充质干细胞转化生长因子Β1转化生长因子Β2受体分化
- 小鼠轻型肠型放射病肠上皮细胞差异表达基因的筛选研究被引量:3
- 2002年
- 目的 筛选经辐射诱导后小鼠肠上皮细胞的差异或特异表达基因。方法 通过基因库检索和计算机分析 ,设计出较通用的 5’端武断引物在基因库中其呈现几率要高出数倍到数十倍的 4条 5′端高同源mRNA差示引物 ,应用DDRT PCR ,测序凝胶电泳 ,放射自显影 ,分子杂交等方法 ,分析并筛选小鼠受 12Gyγ射线全身照射后 3h(R1组 )和 96h(R2组 )肠上皮细胞差异或特异表达基因。结果 5′端高同源性引物mRNA差异结果显示 ,与正常比较 ,小鼠全身 12Gy照射后不同时相的肠上皮细胞基因表达存在差异 ,从近 80 0 0条PCR扩增产物中 ,比较筛选出 12个差异表达基因片段。RNA blot杂交对 11个辐射损伤情况下差异表达基因片段进行了鉴定。R1S1和R1S2差异基因片段在辐射损伤后 3h的肠上皮细胞中呈特异性表达 ;R2S2和R2S5基因片段在辐射损伤后 96h的肠上皮细胞中呈特异性表达 ;R2S1、R2S6和R2S8基因片段是假阳性差异表达基因片段 ;而R2S1、R2S4及R2S8用RNA blot法检测不到表达。序列分析结果显示R1S1和R2S2在基因库中未见高同源的基因序列 ,与R1S1同源性最高 (60 0 0 % )的是一个源于大鼠输卵管特异性糖蛋白基因 ,R2S5与一种小鼠肌细胞钙离子信号传导分子有 67 2 1%的同源性 ;R2S2高度同源于鼠源性肿瘤诱导蛋白p3 2 (91 5 2 % )
- 胡川闽粟永萍程天民王军平刘贤华王晓东冉新泽
- 关键词:基因克隆同源性
- 合并放射损伤的创伤难愈与促愈研究的进展与思考被引量:14
- 2002年
- 程天民冉新泽
- 关键词:创伤伤口愈合