兰小勤
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- AEG1促进肝癌细胞HepG2分泌细胞因子IL-6、IL-1β的实验研究被引量：3
- 2013年
- 目的研究AEG1能否促进肝癌细胞HepG2分泌细胞因子IL-6、IL-1β,探讨AEG1是否参与改变肿瘤微环境。方法用脂质体稳定转染法分别转染pcDNA3.1(-)-AEG1(AEG1全长质粒)、psilencer 2.0-shAEG1(AEG1干扰质粒)至HepG2细胞,相对应以转染空质粒pcDNA3.1(-)、psilencer 2.0的HepG2细胞为对照组;采用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)、Western blotting检测AEG1 mRNA和蛋白表达变化;采用实时荧光定量RT-PCR和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞因子IL-6、IL-1β的表达和分泌。结果与转染相应空载体的阴性对照组和未转染的空白对照组相比,分别转染AEG1全长质粒/AEG1干扰质粒后,HepG2细胞中AEG1的蛋白表达明显增高/降低。转染AEG1全长质粒的HepG2细胞中IL-6、IL-1βmRNA均较对照组和空白组明显增强(P均<0.05),细胞培养介质中IL-6、IL-1β蛋白浓度也显著高于对照组(P均<0.05);转染AEG1 shRNA的HepG2细胞中IL-6、IL-1βmRNA均较对照组和空白组降低(P均<0.05),细胞培养介质中IL-6、IL-1β蛋白浓度也低于对照组(P均<0.05)。结论成功构建稳定过表达和沉默AEG1的HepG2细胞,AEG1能调控IL-6、IL-1β的表达和分泌。
- 邓欢周珍珍黄焕军刘静梅刘吉巧兰小勤田德安
- 关键词：肝细胞癌HEPG2IL-6IL-1Β
- 地塞米松抗小鼠肾缺血-再灌注损伤的作用研究被引量：3
- 2013年
- 目的研究糖皮质激素受体(GR)激动药地塞米松(DEX)对小鼠肾缺血-再灌注损伤的作用及其机制。方法建立小鼠肾缺血-再灌注损伤模型。18只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组(n=6),分别为假手术(SHAM)组、肾缺血-再灌注损伤模型(IRI)组、地塞米松预处理(DEX)组。SHAM组和IRI组缺血前1 h给予0.9%氯化钠溶液(4 mg·kg-1,腹腔注射),DEX组缺血前1 h给予地塞米松(4 mg·kg-1,腹腔注射),IRI组和DEX组血管夹夹闭左肾动脉,置于32℃温箱后1 h松开血管夹,去除右肾。SHAM组操作同上,但不夹闭左肾动脉。再灌注24 h后处死小鼠,收集血清和肾脏标本。测定血尿素氮(BUN)和血清肌酐(Cr),PAS染色后显微镜下观察肾脏形态学变化,PCR检测单核细胞趋化蛋白(MCP-1)和干扰素(IFN-γ)。结果与SHAM组相比,IRI组血清肌酐,血尿素氮明显升高。病理检查可见肾脏内肾小管上皮细胞明显肿胀坏死、蛋白管型形成明显,还可观察到炎症细胞浸润明显增加。PCR显示MCP-1,IFN-γ明显上调。与IRI组相比,DEX组血清肌酐,血尿素氮明显下降,肾小管上皮细胞肿胀坏死减轻,炎症细胞浸润减少,MCP-1、IFN-γ表达降低。结论 GR激动药DEX可通过抑制炎症反应减轻肾缺血-再灌注损伤。
- 张炯张颖江潮杨娟余冲肖芳兰小勤裴广畅李月强李俊华
- 关键词：地塞米松炎症
- ERK介导的炎性反应参与肾缺血再灌注损伤
- 2013年
- 目的研究小鼠肾缺血再灌注损伤的发病机制。方法建立小鼠肾缺血再灌注损伤模型。12只雄性C57BL／6随机分为2个组（n=6），分别为假手术组（Sham），肾缺血再灌注损伤模型组（IRI）。IRI组血管夹夹闭左肾动脉，置于32℃温箱后1h松开血管夹，去除右肾。Sham组操作同上，但不夹闭左肾动脉。再灌注24h后处死小鼠，收集血清和肾脏标本。测定血清肌酐（Cr）和血尿素氮（BUN）。PAS染色后显微镜下观察肾脏形态学变化，Western印迹分析ERK、p-ERK的表达，PCR检测MCP-1、IFN-γ。结果与假手术组（Sham）相比，IRI组血清肌酐、血尿素氮明显升高，病理检查可见肾脏内肾小管上皮细胞明显肿胀坏死、蛋白管型形成明显，还可观察到炎性细胞浸润明显增加。ERK、p-ERKWestern印迹结果PCR显示MCP-1、TNF-α也明显上调，但ERK表达不变。结论在肾缺血再灌注中，ERK激活介导的炎性后府可能参与了肾扣伤。
- 张炯张颖肖芳兰小勤江潮杨娟余冲裴广畅李月强李俊华
- 关键词：肾缺血再灌注损伤ERK炎症
- PPAR-γ激动剂吡格列酮通过抑制炎症反应减轻顺铂诱导的小鼠急性肾损伤被引量：2
- 2013年
- 目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator-activated receptor，PPAR）-γ激动剂吡格列酮对顺铂（cisplatin，CDDP）诱导的小鼠急性肾损伤（acute kidney injury，AKI）的可能保护作用及其机制。方法腹腔注射顺铂制备小鼠AKI模型。18只小鼠随机分为正常对照组（CT组），AKI模型组（C组）和吡格列酮治疗组（C＋P组）。C组和C＋P组按25mg／kg给予顺铂处理。C＋P组在顺铂注射前3d，连续三天给予吡格列酮灌胃。CT组给予生理盐水作为对照。顺铂或盐水处理72h后处死小鼠，收集血清和肾脏标本。测定血清肌酐和尿素氮，PAS染色后显微镜下观察肾脏形态学变化，同时通过Westernblot检测炎症指标诱生型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）。结果与CT组相比，CDDP诱导C组血清肌酐及尿素氮明显升高，病理检查可见肾小管上皮细胞肿胀坏死、蛋白管型形成及炎症细胞浸润明显增加，同时炎症指标iNOS表达上调。与C组相比，C＋P组血清肌酐、尿素氮明显下降，肾小管上皮细胞肿胀坏死减轻，炎症细胞浸润减少，iNOS表达下调。结论PPAR-7激动剂吡格列酮可通过抑制iNOS削弱炎症反应从而减轻顺铂诱导的小鼠急性肾损伤。
- 张炯李俊华肖芳兰小勤裴广畅李月强刘蔚高红宇韩敏徐钢
- 关键词：小鼠顺铂
