于翠 作品数:74 被引量:291 H指数:9 供职机构: 上海出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 上海出入境检验检疫局科研基金 上海市科委技术标准专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 哲学宗教 更多>>
进境棉籽中棉花枯萎病菌的检疫鉴定和监控策略 被引量:1 2014年 对从澳大利亚进境的多批棉籽进行了病原菌分离,纯化培养后得到3株疑似棉花枯萎病菌的菌株FOV-093、FOV-130和FOV-245。形态学观察表明:菌株FOV-093、FOV-130和FOV-245均产生典型的棉花枯萎病菌大型分生孢子和小型分生孢子,前者呈镰状或椭圆形弯曲,后者呈假头状着生,多数为单孢,卵圆形;用通用引物ITS4/ITS5和特异引物FOV-F/R扩增,分别获得518 bp和354 bp的DNA片段,测序后通过BLAST比对表明,其与GenBank中Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum序列同源性为100%,;致病性测定表明:3个菌株均可侵染棉花并致其萎蔫死亡。根据上述试验结果,将分离获得的菌株FOV-093、FOV-130和FOV-245鉴定为棉花枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum。加强进境棉籽的检疫和病害监控,是防止该真菌扩散和传播的有效方法。 孙娟 陈舜胜 乔艳艳 于子翔 于翠 杨翠云关键词:棉花枯萎病菌 鸢尾黄斑病毒几种PCR检测方法的建立和比较研究 被引量:6 2012年 以带有鸢尾黄斑病毒的烟草叶片为材料,研究建立了IYSV的普通RT-PCR、免疫捕获RT-PCR和SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR方法,并比较了几种检测方法的灵敏度。结果表明,DAS-ELISA检测灵敏度较低,为1 mg带毒叶片。而各种PCR方法的灵敏度均高于DAS-ELISA 100倍以上,其中SYBR GreenⅠ实时荧光RT-PCR检测灵敏度最高,可从0.4μg的带毒叶片中检出IYSV,而RT-PCR的灵敏度为40μg带毒叶片,IC-RT-PCR的检测灵敏度是RT-PCR的4倍。鉴于DAS-ELISA灵敏度较低,建议在用ELISA初筛时,如样品OD405值与阴性对照OD405值之比在2.0左右时需要再用分子方法加以确证,以防漏检。 代欢欢 杨翠云 周琦 于翠关键词:PCR 灵敏度 上海郊区黄瓜绿斑驳花叶病毒的鉴定和防治对策 被引量:7 2013年 在上海市浦东新区孙桥蔬菜基地温室内发现大量黄瓜植株发病,叶片出现花叶、斑驳、皱缩和变形等症状,发病率达50%以上。经DAS-ELISA、RT-PCR和摩擦接种试验鉴定,发现引起黄瓜发病的病原生物是黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus),并提出了防治对策。 胡亚萍 董萍 赵驾浩 张艇 于子翔 于翠 杨翠云关键词:黄瓜绿斑驳花叶病毒 进境美国柚子中冬生疫霉的分离鉴定 被引量:2 2017年 从美国加州进境柚子表现褐腐症状的组织中分离到1个疫霉菌株9099,对其进行形态学特征观察、PCR检测、序列分析和致病性测定。试验结果表明,该菌株在V8培养基上菌落平贴,呈花瓣状;在PDA培养基上菌落边缘不规则,白色。孢子囊卵形或椭圆形,大小为(28.4~46.8)μm×(16.3~23.8)μm(平均37.5μm×19.4μm),长宽比为1.7~2.2∶1(平均1.9∶1)。菌株为同宗配合,卵孢子黄橙色,球形,满器,大小26.3~39.3μm(平均32.7μm),壁厚1~3μm。利用冬生疫霉(Phytophthora hibernalis)特异引物对PHIB1/PHIB2和751F/752R扩增9099的基因组DNA分别得到407 bp和616 bp的预期目标条带。菌株9099的ITS序列与Gen Bank中P.hibernalis的序列相似性为99.89%~100%。基于ITS序列构建的系统进化树显示菌株9099与P.hibernalis聚在同一个分支,亲缘关系最近。创伤接种柚子果实,接种处组织出现典型褐腐症状。根据形态学特征及ITS序列分析等,将菌株9099鉴定为P.hibernalis。 焦彬彬 刘劼 宋绍祎 陈仲兵 于翠 易建平关键词:柚子 食品过敏原大豆P34蛋白基因的实时荧光PCR检测 被引量:9 2012年 以大豆主要过敏蛋白P34基因为靶标,采用TaqMan探针实时荧光PCR方法建立食品过敏原大豆成分的检测方法。实验表明建立的检测方法具有特异性,灵敏度高,检测限为10mg/kg。通过对市售样品的检测,该方法适用于对常见食品种类的检测,但不适用于精加工油脂等精细加工产品的检测。 张舒亚 于翠 宋青 于卓然 高琴关键词:食品过敏原 大豆 百合无症病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立 被引量:3 2014年 百合无症病毒(Lily symptomless virus,LSV)是侵染百合科植物的主要病毒之一。根据该病毒不同分离株外壳蛋白基因(coat protein,CP)的保守序列,设计特异性引物与荧光探针,建立了LSV的实时荧光RTPCR检测方法。利用该方法检测LSV的2个阳性样品,均能够得到典型扩增曲线,而在百合斑驳病毒、烟草环斑病毒、番茄环斑病毒等其他病毒阳性样品中没有典型的扩增曲线,表明了该方法的特异性。与普通RTPCR法相比,此方法灵敏度提高10倍。应用该方法,2012年6月至今,宁波出入境检验检疫局从荷兰进境的67批百合种球样品中检出53批百合无症病毒阳性,检出率为93%。 余澍琼 陈先锋 张吉红 于翠 张慧丽 闻伟刚关键词:百合无症病毒 百合科 从进境水仙上检测出南芥菜花叶病毒 被引量:23 2005年 利用DAS-ELISA对从荷兰进口的6个品种的水仙种球进行检测发现,品种为Recurvus的水仙种球对ArMV的多抗血清呈阳性反应达85%。免疫吸附电镜观察到在感病水仙种球中存在直径约30nm的球状病毒粒子。根据ArMV外壳蛋白(CP)基因的保守序列设计引物,RT-PCR能从感病样品中扩增到预期580bp特异条带,序列测定分析表明此条带的序列为ArMV部分CP基因,在系统关系树上与ArMV的其它分离物形成一簇、亲缘关系很近,表明从进境水仙上检测到了ArMV。 于翠 杨翠云 杨艳 洪健关键词:南芥菜花叶病毒 水仙 ELISA RT-PCR 鸢尾黄斑病毒研究进展 2012年 鸢尾黄斑病毒是番茄斑萎病毒属一种新近检测鉴定的病毒。本文对该病毒的理化特性、传播方式、寄主范围和危害症状、检测方法和防治方法等方面进行了综述。 杨艳 高军 宋绍祎 杨翠云 于翠关键词:番茄斑萎病毒属 液相芯片技术在植物病毒检疫中的应用展望 被引量:2 2010年 液相芯片是一个在悬浮液态体系中进行的生物分子间反应,并以100种不同荧光编码的微球作为探针载体的一类新型生物芯片技术。具有高通量、高灵敏度、高准确度、高精密度、宽的线性范围及操作简便等众多优势,可用作蛋白质和核酸等生物分子的高通量检测平台。本文主要介绍了液相芯片的检测原理、优势,并对该技术的应用及在植物检疫中的展望作一简要介绍。 代欢欢 陈舜胜 杨翠云 戚龙君 于翠关键词:液相芯片 免疫磁珠结合RT-PCR检测黄瓜绿斑驳花叶病毒 被引量:7 2010年 以感染黄瓜绿斑驳花叶病毒的黄瓜种子为材料,建立了免疫磁珠结合RT-PCR直接检测种子携带病毒的高灵敏度方法。结果表明:当磁珠的包被单克隆抗体浓度为1.5×10^(-5)mg/mL时,可检测到的最低抗原浓度为7.813×10^(-3)mg/mL,相当于8 ng种子中的黄瓜绿斑驳花叶病毒。该方法的灵敏度比免疫捕获RT-PCR(IC-RT-PCR)的灵敏度高出8倍。 阚春月 衣杰荣 王守法 于翠 杨翠云关键词:黄瓜绿斑驳花叶病毒 RT-PCR 免疫磁珠分离 黄瓜种子