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DNA甲基化与表型效应及环境因素相互关系被引量：2: 2015年; DNA甲基化作为表观遗传现象的分子基础由Holliday和Pugh于20世纪70年代发现。表观遗传是指DNA序列不发生变化但基因表达却发生了可遗传改变，这些信息能经有丝分裂和减数分裂在细胞和个体世代间传递，而不借助于DNA序列的改变，即表观遗传是非DNA序列差异的核遗传。DNA甲基化是表观遗传学重要改变之一。研究表明，除遗传机制外，环境因素还可通过表观遗传机制，如诱导DNA甲基化模式改变等，在不改变DNA序列前提下，改变基因表达，从而引起表型发生变化。本研究针对DNA甲基化、表型效应、环境因素三者之间关系及DNA甲基化在环境因素所致表型效应中的作用综述如下。; 刘永哲于敏; 关键词：DNA甲基化环境因素

转化生长因子-β受体抑制剂复合物C促进人胚胎干细胞向视网膜色素上皮细胞定向诱导: 2014年; 目的观察转化生长因子-β（TGF—B）受体抑制剂复合物C对人胚胎干细胞（hESC）向视网膜色素上皮（RPE）细胞定向诱导效率的影响。方法将H1hESC分为对照组和实验组。对照组在细胞过度融合后，以去除碱性成纤维细胞生长因子的血清替代物培养体系诱导RPE细胞定向分化。实验组于诱导分化前6d在培养体系中加入1μmol／l复合物C诱导分化第1、3、5周，采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测两组人类配对盒基因（PAX6）、小眼球相关转录因子（MITF）、细胞视黄醛结合蛋白（CRAI。BP）、RPE65mRNA的表达。将hESC来源的RPE（hESC—RPE）细胞分离纯化，采用RT—PCR、蛋白免疫印迹法（Westernblot）和细胞免疫荧光法对纯化的hESC-RPE细胞进行鉴定。结果诱导分化第4周，实验组肉眼可见色素团块，对照组无色素团块出现。将实验组的色素细胞分离纯化后，可见100％的细胞表现为多角形色素化。RT—PCR检测结果显示，实验组PAX6mRNA表达在诱导分化第1、3周显著高于对照组，差异有统计学意义（t=28．498、3．141，P〈0．05）；诱导分化第3、5周，实验组MITF（户8．866、10．111）、CRAlBP（t=5．293、5．394）和RPE65（t=9．263、9．504）的表达均明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。hESC-RPE细胞PAX6、MITF、CRALBP、RPE65mRNA表达均显著高于hESC（t=9．154、17．284、18．204、44．194）和ARPE-19（t=7．605、16．770、18．190、44．190）细胞，差异有统计学意义（P〈0．05）。Westernblot检测结果显示，hESC-RPE细胞高水平表达RPE标志蛋白PAX6、RPE65。荧光显微镜观察发现，hESC—RPE细胞表达RPE细胞特异性标志蛋白PAX6、紧密连接蛋白-1。结论TGF-I？受体抑制剂复合物C能显著提高hESC向RPE定向诱导效率。; 杨博宇杨春波于敏李筱荣; 关键词：胚胎干细胞视网膜色素上皮细胞

叶酸对N2a-APP695细胞Tau蛋白及其Ser396位点磷酸化的调控被引量：1: 2013年; 目的:研究叶酸对转染人APP695质粒的小鼠成神经瘤细胞(N2a)Tau蛋白的表达及其磷酸化修饰的影响。方法:稳定转染人APP695质粒的N2a细胞根据叶酸不同剂量分为4组,叶酸缺乏组(0μmol/L)、叶酸正常组(10μmol/L)、叶酸低剂量组(20μmol/L)、叶酸高剂量组(40μmol/L)。各组细胞作用96 h后,用Real-time PCR检测其tau mRNA表达,用Western blot检测Tau总蛋白以及磷酸化Tau蛋白(p-Tau Ser396)的表达。结果:与叶酸正常组相比,叶酸的添加对tau mRNA及总蛋白的表达水平作用不明显;叶酸对Tau蛋白Ser396位点磷酸化有显著的影响,随叶酸剂量的增加Tau Ser396位点去磷酸化逐渐增强。结论:添加叶酸能对Alzheimer’s disease(AD)模型细胞中磷酸化Tau蛋白Ser396位点有显著的去磷酸化作用,提示叶酸对AD可能具有一定的治疗作用。; 姜明月于敏李文黄国伟; 关键词：叶酸阿尔茨海默病 TAU蛋白

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于敏

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