丁鹤
- 作品数：10 被引量：8H指数：2
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 新孢子虫NcSAG4基因克隆及原核表达被引量：1
- 2012年
- 目的构建新孢子虫NcSAG4基因原核表达载体,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达。方法根据新孢子虫NcSAG4基因序列设计特异性引物,以新孢子虫总核酸为模板PCR扩增目的片段,与pMD-18-T连接,构建克隆载体pMD-NcSAG4,经双酶切后回收目的片段,与表达载体pGEX-T连接,构建原核表达载体pGEX-NcSAG4,用IPTG诱导,通过SDS-PAGE及Western blot进行鉴定。结果成功构建了新孢子虫NcSAG4基因原核表达载体pGEX-Nc-SAG4;SDS-PAGE电泳显示,在IPTG诱导下阳性菌高效表达了分子质量单位为18.79ku的蛋白质;Western blot显示表达产物可被抗新孢子虫的多克隆血清识别。结论成功构建了NcSAG4基因原核表达载体,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中高效表达,为建立经济、实用的诊断新孢子虫病的ELISA方法奠定了基础。
- 李赫丁鹤李建华刘畅宫鹏涛王伟利杨举张国才张西臣
- 关键词：新孢子虫克隆原核表达
- 阴道毛滴虫14-3-3基因的克隆、表达及鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的克隆阴道毛滴虫14-3-3基因并进行原核表达。方法根据阴道毛滴虫14-3-3基因序列设计特异性引物,以阴道毛滴虫cDNA为模板通过PCR扩增获得目的片段,与pMD-18-T连接,构建克隆载体pMD-Tv-14-3-3,经双酶切后回收目的片段,进行测序鉴定,然后与表达载体pGEX-T连接,构建原核表达载体pGEX-T-Tv-14-3-3,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过SDS-PAGE及Western blot鉴定表达产物。结果成功构建了阴道毛滴虫14-3-3基因原核表达载体pGEX-T-Tv-14-3-3;SDS-PAGE电泳检测显示,在IPTG诱导下,阳性菌高效表达分子质量单位为27ku的蛋白质;Western blot显示表达产物可被抗阴道毛滴虫多克隆血清识别。结论成功构建了阴道毛滴虫14-3-3基因原核表达载体,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中高效表达。
- 刘畅丁鹤刘鑫宫鹏涛李建华李淑红李赫张国才杨举张西臣
- 关键词：阴道毛滴虫克隆原核表达
- 阴道毛滴虫端粒DNA鉴定及其调节蛋白研究
- 阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis,TV)是寄生在人体泌尿生殖系统的寄生性原虫。它不仅能够引起女性滴虫性阴道炎和宫颈炎、男性尿道炎和前列腺炎,还可以感染小鼠和松鼠猴。呈世界性分布,是一种危害人兽健康的...
- 丁鹤
- 关键词：阴道毛滴虫端粒DNATRFTBP
- 文献传递
- 阴道毛滴虫TvRab11C基因的克隆及原核表达
- 2012年
- 目的克隆并原核表达阴道毛滴虫TvRab11C(G3 Ras-related protein Rab11C)基因。方法利用PCR技术扩增阴道毛滴虫TvRab11C基因,与原核表达载体pET-28a连接,构建重组原核表达质粒pET-28a-TvRab11C,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达产物的可溶性,Western blot分析表达产物的反应原性。结果重组原核表达质粒pET-28a-TvRab11C经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为30 000,主要以包涵体形式存在,可被抗阴道毛滴虫多克隆抗体识别。结论成功克隆了阴道毛滴虫TvRab11C基因,并在E.coli BL21(DE3)中获得了表达,为进一步研究TvRas基因和G蛋白与阴道毛滴虫寄生能力和致病性的关系奠定了基础。
- 刘畅丁鹤宫鹏涛李建华李淑红李赫张国才张西臣
- 关键词：克隆原核表达
- 不同细菌及酵母菌对阴道毛滴虫体外生长的影响
- 2014年
- 目的研究大肠埃希菌J20、保加利亚乳杆菌、金黄葡萄球菌及AH109酵母菌体外对阴道毛滴虫生长的影响。方法分别将不同浓度(104、105、106和107个/ml)的大肠埃希菌J20、保加利亚乳杆菌、金黄葡萄球菌及AH109酵母菌与阴道毛滴虫进行体外共培养,并对不同培养时间(2、4、6和8 h)的虫体进行计数。结果与空白对照组相比,大肠埃希菌J20及金黄葡萄球菌在低浓度(104个/ml)时即明显影响阴道毛滴虫体外生长(P均<0.01),在6 h时即可见白色死亡虫体沉淀:保加利亚乳杆菌仅在高浓度(106和107个/ml)时对阴道毛滴虫的生长有明显影响(P均<0.01):AH109酵母菌在不同浓度及不同培养时间对阴道毛滴虫的生长均无明显影响(P>0.05)。结论大肠埃希菌J20、金黄葡萄球菌及高浓度(106和107个/ml)保加利亚乳杆菌对阴道毛滴虫生长影响显著,而AH109酵母菌无明显影响,为进一步研究阴道毛滴虫感染后,在体内与阴道菌群的相互作用关系奠定了理论基础。
- 丁鹤于艳辉宫鹏涛李建华杨举李赫张国才张西臣
- 关键词：阴道毛滴虫保加利亚乳杆菌金黄葡萄球菌
- 阴道毛滴虫TvRab11C基因克隆及原核表达
- 刘畅丁鹤宫鹏涛李建华李淑红李赫张国才张西臣
- 阴道毛滴虫TPI基因克隆及原核表达被引量：1
- 2012年
- 目的构建阴道毛滴虫TPI基因原核表达载体,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达。方法根据阴道毛滴虫TPI基因开放阅读框设计并合成特异性引物,以阴道毛滴虫总cDNA为模板PCR扩增目的片段,与pMD-18-T连接构建克隆载体pMD-TPI,经双酶切回收目的片段,与表达载体pGEX-T连接,构建原核表达载体pGEX-TPI,经IPTG诱导后通过SDS-PAGE及Western blot鉴定表达产物。结果成功构建了阴道毛滴虫TPI基因原核表达载体pGEX-TPI;SDS-PAGE电泳显示,在IPTG诱导下重组质粒转化菌高效表达分子质量单位为27.5ku的蛋白质;Western blot显示表达产物可被抗阴道毛滴虫的多克隆血清识别。结论成功构建了TPI基因原核表达载体,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中高效表达,为进一步研究阴道毛滴虫TPI基因功能奠定了基础。
- 丁鹤刘畅宫鹏涛李建华李赫张国才杨举李淑红张西臣
- 关键词：阴道毛滴虫克隆原核表达
- 硝唑尼特体外抑杀阴道毛滴虫效果观察被引量：2
- 2011年
- 目的观察硝唑尼特体外抑杀阴道毛滴虫效果。方法分别以2、1、0.5、0.25、0.125、0.062 5和0.031 25mg/ml,硝唑尼特作用于阴道毛滴虫携病毒株与无病毒株12和24 h,观察体外抑杀效果。实验以甲硝唑作为药物对照。结果随着药物浓度的增加和作用时间的延长,硝唑尼特对两种虫株的抑制率均增高,显微镜下可见滋养体活力下降,培养基底部有死亡虫体沉淀,染色后可见滋养体细胞质内有空泡,鞭毛脱落,虫体变形,细胞核变形,细胞膜破裂,细胞溶解。经统计学分析,硝唑尼特对阴道毛滴虫两种虫株的抑制率差异无统计学意义(χ2=0.12,P>0.05)。在24 h时,甲硝唑对阴道毛滴虫无病毒株抑制率为81.06%,硝唑尼特(1 mg/ml)对阴道毛滴虫两种虫株的抑制率可达100%,硝唑尼特对阴道毛滴虫无病毒虫株的抑制率显著高于甲硝唑(χ2=4.43,P<0.01)。结论硝唑尼特对阴道毛滴虫两种虫株均有较好的抑杀作用,其中对无毒株阴道毛滴虫的抑杀效果硝唑尼特优于甲硝唑。
- 丁鹤刘畅刘鑫曲晗宫鹏涛李建华杨举张西臣
- 关键词：阴道毛滴虫甲硝唑
- 阴道毛滴虫携病毒与无病毒株差异蛋白比较研究
- 阴道毛滴虫(Trichomonas vaginalis, TV)是寄生在人体泌尿生殖道系统,主要引起女性的滴虫性阴道炎,男性的尿道炎及不育等症状,此外,阴道毛滴虫还可以引起其他动物如小鼠成为带虫者,松鼠猴表现出临床症状,...
- 丁鹤
- 关键词：阴道毛滴虫ITRAQ磷酸丙糖异构酶锤头状核酶
- 文献传递
- 弓形虫致密颗粒蛋白研究进展被引量：3
- 2016年
- 弓形虫是一种胞内寄生性原虫,由其引发的人兽共患病给公共卫生安全带来了威胁。弓形虫致密颗粒蛋白是弓形虫致密颗粒细胞器分泌的一类免疫活性蛋白,与虫体在细胞内寄生、发育密切相关,是重要的弓形虫疫苗候选抗原分子。论文将近年来在致密颗粒蛋白方面的研究发现和进展进行阐述,为今后的深入研究提供参考。
- 王英贺曹利利姚新华苑淑贤郭衍冰宫鹏涛丁鹤董航魏峰
- 关键词：弓形虫致密颗粒蛋白
