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细胞固定技术在两种细胞共同培养研究中的应用被引量：3: 2006年; 目的探讨细胞固定对鉴别支气管上皮细胞和嗜酸粒细胞两种细胞共同培养过程中细胞代谢产物来源的作用及其机制。方法用1%多聚甲醛固定嗜酸粒细胞和支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞;通过锥虫蓝、伊红细胞染色,观察多聚甲醛固定对细胞形态、结构、活力和与正常细胞接触培养过程中与正常细胞黏附能力的影响;用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法定量分析固定细胞与正常细胞共同培养过程中对白细胞介素(IL)-6释放的影响。结果多聚甲醛固定后支气管上皮细胞和嗜酸粒细胞均变为死亡细胞,但其形态、结构及嗜酸粒细胞中颗粒着色无明显变化;多聚甲醛固定的BEAS-2B细胞与正常及固定的嗜酸粒细胞接触培养仅有极少量细胞发生黏附,而多聚甲醛固定的嗜酸粒细胞与正常BEAS-2B细胞接触培养则有较大数量的细胞发生黏附,但黏附细胞数量少于两种正常细胞的共同培养;固定后的嗜酸粒细胞与正常BEAS-2B细胞共同培养过程中可诱导BEAS-2B细胞释放IL-6。但与嗜酸粒细胞单独培养比较,固定后BEAS-2B细胞与正常嗜酸粒细胞共同培养对细胞培养上清液中IL-6浓度无明显影响。结论经多聚甲醛固定后,细胞死亡并丧失其代谢功能,但其表面仍保留可诱导其他细胞活化的结构成分,此技术可用于两种或多种细胞共同培养过程中代谢产物来源的鉴别。; 王成彬黄振国叶伟基李洛谊鲍依稀田亚平林伟基; 关键词：上皮细胞嗜酸细胞白细胞介素6 酶联免疫吸附测定

p38 MAPK在嗜酸性粒细胞活化支气管上皮细胞释放MCP-1中的作用被引量：5: 2006年; 目的:探讨支气管上皮细胞与嗜酸性粒细胞联合培养过程中炎性介质的释放及其机制.方法:应用流式细胞微珠实验(CBA)方法定量比较嗜酸性粒细胞、支气管上皮细胞及其联合培养上清液中单核细胞趋化蛋白(MCP)-1的释放以及p38MAPK抑制剂SB203580干预的影响;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析联合培养过程中嗜酸性粒细胞对支气管上皮细胞MCP-1基因表达的活化及SB203580对MCP-1表达的抑制作用.结果:经嗜酸性粒细胞活化后,支气管上皮细胞中MCP-1基因表达明显上调;嗜酸性粒细胞和支气管上皮细胞联合培养上清液中MCP-1蛋白质释放显著增加[(1266±127)ng/Lvs(134±25)ng/L,P<0.001];多聚甲醛固定后的嗜酸性粒细胞不能释放MCP-1,但其在与支气管上皮细胞联合培养过程中仍可增加支气管上皮细胞释放MCP-1[(773±48)ng/Lvs(107±15)ng/L,P<0.001];p38MAPK抑制剂SB203580可有效抑制嗜酸性粒细胞活化支气管上皮细胞表达MCP-1基因,显著降低正常嗜酸性粒细胞和多聚甲醛固定嗜酸性粒细胞与支气管上皮细胞联合培养过程中MCP-1的释放[(1335±115)ng/Lvs(481±42)ng/L和(868±89)ng/Lvs(239±26)ng/L,P<0.001].结论:嗜酸性粒细胞可通过p38MAPK信号传导通路活化支气管上皮细胞表达MCP-1,调控过敏性气道炎症反应.; 王成彬童红莉田亚平汪德清黄振国叶伟基李洛谊林伟基; 关键词：支气管嗜酸细胞单核细胞化学吸引蛋白质1 P38

屋尘螨1类变应原促进外周血嗜酸性粒细胞释放细胞因子的探讨被引量：1: 2007年; 目的探讨屋尘螨1类变应原(DerP1)对嗜酸性粒细胞(E)释放炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α的影响。方法用CD16抗体磁珠法从新鲜人外周血分离E;5×105/mlE与5μg/mlDerP1共培养12h;用流式细胞小球微阵列(cytometricbeadarray,CBA)法定量细胞培养上清液中细胞因子。结果外周血E单独培养过程中仅有极少量IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α释放,但与5μg/mlDerP1共育时,培养上清液中上述5种细胞因子浓度显著增加(P均<0.001),IL-10增加约5倍,其他4种细胞因子均增加约100倍。结论DerP1对E释放炎性细胞因子具有很强的促进作用。; 王成彬黄振国李洛谊叶伟基林伟基丛玉隆; 关键词：屋尘螨嗜酸性粒细胞细胞因子

嗜酸性粒细胞对支气管上皮细胞中p38 MAPK信号转导通路的活化作用观察: 2008年; 目的探讨嗜酸性粒细胞在与支气管上皮细胞接触共培养过程中对后者炎性介质释放的影响。方法用CD16抗体磁珠法分离嗜酸性粒细胞,免疫印迹(Western blotting)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测支气管上皮细胞中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、激活转录因子(ATF)-2蛋白含量,微珠免疫沉淀结合免疫印迹法检测p38MAPK活性。结果经与嗜酸性粒细胞共同培养活化后,支气管上皮细胞中磷酸化p38MAPK蛋白含量及其活性均显著上升,p38MAPK信号转导通路链中下级底物蛋白质ATF-2(细胞内调控某些基因表达的转录因子)量也显著上升;多聚甲醛固定的嗜酸性粒细胞同样可以活化支气管上皮细胞,增加其细胞内p38MAPK蛋白质磷酸化。p38MAPK酶选择性抑制剂SB203580可有效抑制p38MAPK诱导其底物ATF-2磷酸化。结论嗜酸性粒细胞与支气管上皮细胞接触共培养过程中对炎性介质表达和释放的调控作用可能是通过活化支气管上皮细胞内p38MAPK信号传导通路未实现的。; 王成彬黄振国叶伟基林伟基丛玉隆; 关键词：P38丝裂原活化蛋白激酶嗜酸细胞

云芝丹参对鼻咽癌患者免疫调节作用的临床研究: 目的：鼻咽癌是香港较为流行的一种肿瘤,而传统的放疗、化疗会引起鼻咽癌患者机体免疫系统的损伤。我们研究中药云芝丹参对接受放疗的鼻咽癌患者免疫系统的调节作用;方法：27例组织病理学检查证实为鼻咽癌患者被纳入本次研究,设立中药...; 鲍依稀黄振国林伟基梁秉中; 关键词：基因芯片鼻咽癌云芝丹参; 文献传递

云芝丹参的体外促增殖试验及其临床应用研究被引量：2: 2007年; 目的通过云芝丹参的体外促增殖试验及对乳腺癌患者的临床应用研究，观察其对机体免疫调节活性的影响。方法采用MTT比色法、流式细胞分析法和ELISA法，分别检测云芝丹参对PHA刺激后的健康成人外周血单个核细胞增殖作用及服用云芝丹参胶囊后的乳腺癌患者外周血淋巴细胞亚群和血浆SIL-2R的浓度。结果体外实验，中低浓度的云芝丹参药液（6．25～200μg／mL）对健康成人PBMC有促增殖作用，高浓度（400μg/mL）时则产生抑制作用；而临床试验中，乳腺癌患者血浆sIL-2R浓度、CD8^＋细胞百分率均显著降低，而B淋巴细胞数量及百分率、CD4^＋／CD8^＋比值和Th细胞的百分率都明显升高。结论云芝丹参胶囊对正常人及乳腺癌患者都具有免疫增强作用。; 鲍依稀黄振国李进祝绚林伟基; 关键词：云芝丹参乳腺癌可溶性白细胞介素2受体

嗜酸性粒细胞活化支气管上皮细胞释放IL-6被引量：1: 2005年; 目的:探讨嗜酸性粒细胞活化支气管上皮细胞后对其细胞因子白细胞介素(IL)-6分泌的影响。方法:正常和1%多聚甲醛固定的嗜酸性粒细胞分别与支气管上皮细胞(BEAS-2B)细胞联合培养,应用流式细胞微珠实验(CBA)方法定量细胞培养上清液中细胞因子的浓度,用RT-PCR方法分析经嗜酸性粒细胞活化后支气管上皮细胞中IL-6的基因表达。结果:经嗜酸性粒细胞活化后,支气管上皮细皮中IL-6基因表达显著上调,细胞培养上清液中IL-6蛋白质浓度升高,多聚甲醛固定后的嗜酸性粒细胞能够刺激支气管上皮细胞中IL-6基因表达和蛋白质释放。结论:嗜酸性粒细胞可活化支气管上皮细胞中IL-6基因表达和促进其蛋白质分泌。; 王成彬黄振国叶伟基鲍依希田亚平林伟基; 关键词：支气管上皮细胞嗜酸性粒细胞增多白细胞介素6

TNF-α诱导支气管上皮细胞表达ICAM-1被引量：5: 2005年; 目的:探讨支气管上皮细胞活化对ICAM-1基因和细胞表面ICAM-1蛋白质表达的影响。方法:用10ng/m l TNF-α作用于正常培养的支气管上皮细胞(BEAS-2B)12h,通过RT-PCR分析ICAM-1在BEAS-2B细胞中的基因表达和用流式细胞仪分析ICAM-1在BEAS-2B细胞表面蛋白质量。结果:TNF-α与BEAS-2B细胞共同培养12h,可上调BEAS-2B细胞ICAM-1基因的表达和增加BEAS-2B细胞表面的ICAM-1蛋白质量。结论:TNF-α可诱导BEAS-2B细胞ICAM-1基因和蛋白质表达。; 王成彬黄振国叶伟基田亚平林伟基; 关键词：支气管上皮细胞胞间黏附分子1

嗜酸性粒细胞活化支气管上皮细胞释放IL-6: 目的:探讨嗜酸性粒细胞活化支气管上皮细胞后对其细胞因子白细胞介素(IL)-6分泌的影响. 方法:正常和1％多聚甲醛固定的嗜酸性粒细胞分别与支气管上皮细胞(BEAS-2B)细胞联合培养,应用流式细胞微珠实验(CB...; 王成彬黄振国叶伟基鲍依希田亚平林伟基; 关键词：支气管上皮细胞嗜酸性粒细胞白细胞介素6; 文献传递

支气管上皮细胞和嗜酸性粒细胞联合培养对IL-8释放的影响: 目的探讨支气管上皮细胞和嗜酸性粒细胞联合培养对细胞趋化因子白细胞介素（IL）-8分泌的影响。方法人支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞与人外周血嗜酸性粒细胞联合培养;应用流式细胞微珠实验（CBA）方法定量细胞培养上清液中细...; 王成彬黄振国叶伟基鲍依希田亚平林伟基; 文献传递

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黄振国

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