高红刚
- 作品数:22 被引量:93H指数:5
- 供职机构:济宁医学院药学院更多>>
- 发文基金:山东省卫生厅科技基金国家自然科学基金济宁市科技局资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 陈氏狸殖吸虫光镜及电镜结构观察
- 2009年
- 目的观察陈氏狸殖吸虫各期形态结构特征。方法从陈氏狸殖吸虫流行区采集溪蟹.分离并观察囊蚴形态.感染实验动物描及大鼠.90~112d剖杀动物,回收虫体,进行形态学观察。结果陈氏狸殖吸虫主要形态特征为:龚蚴的囊壁为单层、平均大小为0.445mm×0.440mm、蚴体与囊壁间可见空隙;后尾蚴的排泄囊为长袋形;戒虫宽长比例为1:2.44~1:3.2,腹吸盘大于口吸盘,卵巢有中心体、指状分叶,睾丸呈长形分叶、长度约为体长16,体棘匆混生型;虫卵多数略不对称。结论陈氏狸殖吸虫囊蚴及成虫形态具有特征性,其囊蚴大小及囊壁晏数、成虫卵巢形态及体棘组成与排列在虫种鉴别中具有重要作用。
- 全芯姜晓刚高红刚郭永和周本江
- 关键词:形态学超微结构
- 淡色库蚊幼虫对三氯杀虫酯和残杀威敏感性观察
- 2010年
- 目的探讨淡色库蚊幼虫不同发育阶段对杀虫剂的敏感性变化,为科学合理地进行蚊虫化学防治提供依据。方法参照WHO生物测定方法测定淡色库蚊敏感品系、抗三氯杀虫酯品系、抗残杀威品系I~IV幼虫的抗药性。结果淡色库蚊抗三氯杀虫酯品系I龄、II龄、III龄、IV龄幼虫的抗性指数依次为4.35、11.84、16.43、17.28;抗残杀威品系I龄、II龄、III龄、IV龄幼虫的抗性指数依次为2.39、6.26、9.58、11.21。结论蚊幼虫随着个体发育对杀虫剂的敏感性水平逐渐降低,在蚊虫化学防治中应选择敏感的低龄阶段施药。
- 李士根蒋滨全芯高红刚王新国
- 关键词:淡色库蚊化学杀虫剂抗药性
- 刚地弓形虫ROP2-P30复合基因在E.coliBL21中的表达和鉴定(英文)被引量:9
- 2006年
- 目的获得编码弓形虫RH株棒状体蛋白2和主要表面抗原1重组复合蛋白为弓形虫病快速诊断试剂盒及蛋白质疫苗的研制作准备。方法用PCR技术从弓形虫基因组DNA中扩增出ROP2和P30基因片段,分别克隆入pMD18T载体,并对重组入外源基因的质粒通过PCR.,双酶切和测序鉴定,将pMD ROP2中的ROP2基因片段经EcoRⅠ和HindⅢ酶切,连接等反应,亚克隆入pET30a(+)原核表达载体构建pET ROP2载体,然后再将pMD P30中的P30基因片段与经BglⅡandEcoRⅠ酶切的pET ROP2载体连接,构建pET ROP2P30载体,经含卡那霉素的LB平板筛选,酶切和PCR鉴定。阳性重组质粒转化到大肠埃氏菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物用SDS PAGE进行鉴定。大量的表达融合蛋白经纯化和复性后,用Westernblot分析。结果从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出特异的ROP2和P30基因片段,成功构建成pET ROP2和pET ROP2P30载体,成功表达了弓形虫棒状体蛋白2和弓形虫棒状体蛋白与主要表面抗原1的融合复合蛋白,表达出的蛋白经纯化复性后具有免疫反应性。结论ROP2和P30基因重组后,在原核表达载体中表达出的蛋白经纯化复性后具有活性,获得纯化和复性的弓形虫ROP2和ROP2P30的高效表达产物,为弓形虫病的诊断和疫苗研究奠定了基础。
- 张佃波魏庆宽宰德富崔勇李瑾高红刚柏雪莲赵立江韩广东刘克义
- 关键词:刚地弓形虫WESTERN
- 冰冻储存对淡色库蚊成虫乙酰胆碱酯酶活性的影响
- 2009年
- -20℃冰冻0、7、14、21和28 d的残杀威抗性品系和敏感品系淡色库蚊3 d龄雌成虫AChE活性均无显著变化。表明-20℃冰冻不影响淡色库蚊AChE活性。因此可将现场采集的蚊虫带回实验室冻存后集中测定AChE。
- 李士根谭文彬高红刚赵玉强王新国王怀位甄天民
- 关键词:淡色库蚊乙酰胆碱酯酶抗药性
- 三种品系白纹伊蚊转铁蛋白基因表达量的比较分析被引量:4
- 2011年
- 目的进行不同品系白纹伊蚊转铁蛋白基因表达量的分析。方法据二维电泳获得肽段序列设计引物扩增基因片段,荧光定量PCR检测在白纹伊蚊抗性品系、敏感品系、现场采集品系蚊体内的表达水平差异。结果成功扩增白纹伊蚊转铁蛋白基因片段,荧光定量PCR表明转铁蛋白基因在抗性品系蚊体内的表达量是敏感品系的10.51倍,现场品系是敏感品系的5.22倍。结论白纹伊蚊转铁蛋白基因可做为新的抗性检测及治理基因靶标。
- 王霄谭文彬程鹏公茂庆刘丽娟王海防全芯高红刚
- 关键词:白纹伊蚊转铁蛋白荧光定量PCR
- 藤黄酸类成分的硅胶干柱层析法分离及其酰胺新实体的合成
- 2021年
- 目的探讨从藤黄中提取分离藤黄酸(GA)、新藤黄酸(GNA)的实验技术及其酰胺新实体的合成。方法藤黄丙酮提取物中分离出藤黄酸吡啶盐的母液浸膏与200目硅胶均匀混合后干法上样,硅胶H干柱逆流梯度层析分离出GA、GNA,N,N’-二异丙基碳二亚胺法催化合成它们的N-芳基和N-烷基酰胺。结果较高效分离出GA、GNA,温和制备了N-[2-(N’,N’-二甲氨基)乙基]藤黄酰胺、N-(3-氯-4-氟苯基)新藤黄酰胺和N-(3-氯-4-氟苯基)藤黄酰胺3种酰胺新实体。结论本实验所建立的GA、GNA干柱逆流层析分离及其酰胺化方法操作简便、温和、重现性好。
- 周采菊高红刚郭永恩李爱华刘帅王保国
- 关键词:藤黄酸新藤黄酸
- 冰冻储存对淡色库蚊非特异性酯酶活性的影响被引量:1
- 2009年
- 目的探讨冰冻储存对淡色库蚊非特异性酯酶(non-specific esterase,NSE)活性的影响,为蚊虫抗药性生物化学检测方法的推广应用提供依据。方法以β-乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,测定单个蚊虫NSE活性。结果DDVP抗性品系淡色库蚊NSE活性水平明显高于敏感品系;经完全随机设计的方差分析比较,-20℃冰冻0、7、14、21、28d的淡色库蚊NSE活性A值之间的差别,敏感品系4龄幼虫的F值为0.7642,该品系3日龄雌成虫的F值为0.7452,DDVP抗性品系4龄幼虫的F值为0.1092,该品系3日龄雌成虫的F值为0.1521,P值均>0.05,差异无统计学意义。结论-20℃冰冻28d对淡色库蚊4龄幼虫和3日龄雌成虫体内NSE活性无影响,可在现场采集蚊虫带回实验室集中测定。
- 李士根王霄谭文彬甄天民全芯高红刚刘永春
- 关键词:淡色库蚊非特异性酯酶抗药性
- 弓形虫重组耻垢分枝杆菌M.S-P30-ROP2载体活疫苗的构建及鉴定
- 弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种世界性分布的专性细胞内寄生原虫,属于顶复门生物,由法国学者Nicolle和Manceaux于1908年在北非刚地梳趾鼠的肝、脾单核细胞内发现的,因虫体呈弓形而得名。根据毒...
- 高红刚
- 关键词:弓形虫重组耻垢分枝杆菌免疫抑制剂
- 文献传递
- 编码刚地弓形虫棒状体蛋白2与主要表面抗原1基因的克隆和表达(英文)
- 2006年
- 目的构建编码弓形虫RH株棒状体蛋白2(ROP2)和主要表面抗原1的重组表达质粒,纯化和复性的融合蛋白为弓形虫病快速诊断试剂盒及蛋白质疫苗的研制作准备。方法用PCR技术从弓形虫基因组DNA中扩增出ROP2和P30基因片段,分别克隆入pMD18-T载体,并对重组入外源基因的质粒通过PCR、双酶切和测序鉴定,将pMD-ROP2中ROP2基因片段经EcoRⅠ和HindⅢ酶切、连接等反应,亚克隆入pET-30a(+)原核表达载体,构建pET-ROP2载体,然后再将pMD-P30中的P30基因片段与经同样NcoⅠ和EcoRⅠ酶切的pET-30a(+)载体连接,经含卡那霉素的LB平板筛选,酶切和PCR鉴定。阳性重组质粒转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物用SDS-PAGE进行鉴定。大量的表达融合蛋白经纯化和复性后,用Western blot分析。结果从弓形虫RH株DNA中扩增出特异的ROP2和P30基因片段,成功克隆出pET-ROP2和pET-P30载体。结论成功构建了pET-ROP2和pET-P30重组体,获得纯化和复性的弓形虫ROP2和P30的高效表达产物,为弓形虫病的诊断和疫苗研究奠定了基础。
- 张佃波高红刚崔勇魏庆宽宰德富李瑾柏雪莲赵立江刘克义
- 关键词:刚地弓形虫P30基因WESTERNBLOT
- 刚地弓形虫侵入宿主细胞的机制(英文)
- 2006年
- 弓形虫是一种世界性分布的细胞内寄生原虫,其中间宿主范围广泛,能感染包括人在内的众多哺乳动物,目前尚无有效的防治方法。弓形虫入侵宿主细胞是一个连续、复杂的过程,包括在细胞表面和细胞外基质的滑移运动、附着和主动侵入宿主细胞,以及纳虫泡的形成,已经证明有许多成分参与这一过程。本文就这方面做一简要综述。
- 高红刚张佃波刘克义
- 关键词:弓形虫入侵机制