高巍
- 作品数：13 被引量：59H指数：3
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 猪链球菌2型的生物学特性检测与分析
- 猪链球菌2型引起的链球菌病是一种重要的人兽共患病,猪链球菌2型的生物学特性与其它类型的链球菌即有共同之处,又有其自己的特点.本试验对猪链球菌2型的形态结构、培养特征、生化特性、对动物的致病性进行了系统研究,并建立了对猪链...
- 高尚庆雷连成高巍李耿韩文瑜
- 关键词：猪链球菌2型生物学特性免疫预防
- 文献传递
- 猫实验动物标准化的研究进展及探讨被引量：15
- 2015年
- 猫作为实验用动物在医学、生物学等研究领域的应用越来越广泛,在某些实验中,如降压实验、作为弱视动物模型及高眼压动物模型等方面具有不可替代的作用。随着国内科研对猫使用量的增多,实验用猫多是从商贩或"收购型饲养场"购买,其来源混杂,遗传、年龄、微生物和寄生虫等携带情况不明,实验重现性差,实验结果存在未知因素的影响。我国在猫标准化方面建设缓慢,已经无法适应实验动物学科的发展及人们对实验动物伦理与福利的需求。本文结合吉林省实验用猫使用情况,对猫实验动物标准化的研究进展及应用前景进行探讨。
- 刘明慧袁宝陈健高巍胡进平俞先峰刘殿峰任文陟
- 猪链球菌2型的分离与鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的对从四川省某猪场分离到的5株细菌进行系统鉴定。方法观察菌体的形态、培养特性、动物致病性和生化反应,并采用PCR法鉴定其血清型和毒力因子。结果5株细菌均为猪链球菌2型,均有毒力因子MRP和EF,其中S1株、S2株和S5株对BALB/c小鼠有致病性,另2株无致病性。结论该猪场的疫情是由猪链球菌2型引起的。本研究为进一步预防和控制猪链球菌2型的流行提供了依据。
- 高巍韩文瑜雷连成高尚庆杜崇涛
- 关键词：猪链球菌2型
- 雏鸡大肠埃希菌的分离鉴定及药敏试验被引量：2
- 2010年
- 对长春市某鸡场送检的10只2日龄疑似患大肠埃希菌病死亡的雏鸡进行了实验室诊断。无菌采集病死鸡的心、肝、脾、肺、肾等组织,通过细菌检测、PCR鉴定、生化试验、血清型鉴定、动物回归试验等系统鉴定,确定其为大肠埃希菌。分离菌药敏试验结果表明,该菌株对复方新诺明、庆大霉素、链霉素等药物敏感,对丙氟哌酸、恩诺沙星、氨苄青霉素、左氟沙星等大多数抗菌药物高度耐药。
- 王丽刘佳陈克研杜崇涛赵传博高巍高丰
- 关键词：雏鸡大肠埃希菌药敏试验
- 小鼠神经细胞cDNA T7噬菌体表面展示文库的构建
- 2011年
- 目的构建小鼠神经细胞cDNA T7噬菌体表面展示文库。方法用Trizol试剂提取原代小鼠神经细胞总RNA,分离、纯化mRNA,经反转录合成其双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoRⅠ/HindⅢ接头,用内切酶EcoRⅠ和HindⅢ消化接头,以形成两端分别带有EcoRⅠ和HindⅢ黏性末端的双链cDNA。经Mini Column进行纯化,收集大小在300 bp以上的双链cDNA片段,将其连接于含有EcoRⅠ和HindⅢ末端的T7Select 10-3b载体上,体外包装后经BLT5403菌株增殖,进行文库扩增。结果所构建的文库库容量为含有3.04×107个重组子,原始滴度为2.8×107 pfu/ml,重组率为92%,扩增后文库滴度为3.5×1010 pfu/ml。对随机挑取的100个噬菌斑进行PCR鉴定,88%的插入片段大于300 bp。结论 成功构建了小鼠神经细胞cDNA T7噬菌体表面展示文库。
- 张磊升高巍赵魁贺文琦宋德光陆慧君高丰
- 关键词：小鼠神经元基因文库
- 猪血凝性脑脊髓炎病毒单克隆抗体的制备与鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的制备猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)单克隆抗体,并进行鉴定。方法通过差速离心和蔗糖密度梯度离心法对猪HEV进行纯化,免疫BALB/c小鼠后,取其脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合,经间接ELISA和血凝抑制试验(HI)筛选能稳定分泌抗HEV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并对单抗进行生物学鉴定。结果筛选出4株能稳定分泌抗HEV单抗的杂交瘤细胞株2H2、2A1、1E2、4D4。经鉴定,4株杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水抗HEV的ELISA效价可达1∶12800～1∶51200,其中3株HI效价可达1∶24～1∶28,另1株为0。4株杂交瘤细胞分泌的单抗与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)均不发生交叉反应;杂交瘤细胞染色体数为83～103;除2A1单抗为IgG2b外,其他3株均为IgG1;Westernblot分析表明,2H2、2A1和4D4能识别HEV的血凝素-酯酶蛋白(HE),1E2可识别纤突蛋白(S)。结论已成功制备出抗HEV的单克隆抗体,为HEV快速检测试剂的研制奠定了基础。
- 陈克研赵传博贺文琦陆慧君高巍常志广王丽高丰
- 关键词：血凝性脑脊髓炎病毒单克隆抗体酶联免疫吸附试验
- 靶向H、N基因siRNA对犬瘟热病毒在vero细胞中复制的抑制作用
- 2015年
- 以犬瘟热病毒(CDV)的核衣壳蛋白基因(N基因)和血凝素蛋白基因(H基因)作为靶基因,各设计并体外合成小干扰RNA,分别为N1、N2、N3和H1、H2、H3。将6对siRNA分别转染非洲绿猴肾细胞(Vero)并在转染后接种CDV,48h后通过细胞病变(CPE)、间接免疫荧光、TCID50、荧光定量PCR等方法对2组6个siRNA抑制CDV在Vero细胞中增殖的效果进行比较研究。结果显示,转染细胞感染CDV 48h后,6个siRNAs干扰组细胞出现的绿色荧光明显少于对照组,病毒感染滴度分别是对照组的1/293、1/11、1/29、1/83、1/302和1/90,6个干扰组的CDV基因拷贝数分别是对照组的12.96%、57.75%、23.47%、31.82%、12.82%、15.58%。结果表明,6对siRNAs均对CDV在Vero细胞中的复制具有不同程度的抑制作用,且以H2组抑制效率最高。
- 袁龙艾纯旭马云青陈健袁宝高巍胡进平任文陟
- 关键词：SIRNA
- 抗猫杯状病毒单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定被引量：1
- 2012年
- 为了制备抗猫杯状病毒的单克隆抗体,并对其基本生物学特性进行鉴定。分别采用饱和硫酸铵方法、差速离心、氯化铯密度梯度离心方法对猫杯状病毒(FCV)进行纯化,将纯化的猫杯状病毒作为抗原对BALB/c小鼠进行免疫,通过细胞融合和杂交瘤筛选技术建立抗猫杯状病毒单克隆抗体的杂交瘤系,鉴定单克隆抗体的亚型。结果表明:本实验获得了2株稳定分泌特异性抗猫杯状病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为D8、E5,其亚型均为IgM。获得的单克隆抗体与犬细小病毒(CPV)、猫细小病毒(FPV)、犬瘟热病毒(CDV)均无交叉反应。成功制备了抗猫杯状病毒单克隆抗体,为建立相关诊断方法奠定了基础。
- 艾纯旭樊小烨孟令伟高巍袁宝陈建胡进平任文陟
- 关键词：杂交瘤细胞单克隆抗体细胞融合
- 猪丹毒杆菌的分离鉴定及耐药性试验被引量：28
- 2011年
- 本试验通过细菌检测、生化试验、血清型鉴定、动物回归试验等对长春市某猪场送检疑似细菌感染的病死猪进行系统地分析,初步判定为猪丹毒杆菌致死。药敏试验分析结果表明,该菌株仅对青霉素、红霉素、呋喃唑酮、呋喃妥因4种药物敏感,对大多数抗菌药物高度耐药。经电镜负染观察及传代细胞系进行病毒分离,结果均为阴性。
- 郭良兴陈克研赵魁高巍李志萍赵传博王丽高丰
- 关键词：猪丹毒杆菌耐药性
- 抗犬瘟热病毒噬菌体抗体库的构建
- 2013年
- 目的构建抗犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)T7噬菌体单链抗体(single-chain antibody fragment,scFv)库。方法用灭活CDV经皮下注射免疫犬,共3次,每次间隔2周,第3次免疫后2周采集犬外周血,分离淋巴细胞,提取淋巴细胞总RNA,RT-PCR分别扩增犬IgG重链(heavy chain,VH)和轻链(light chain,VL)基因片段,通过SOE-PCR法将VH和VL用一段linker连接组装成scFv基因,经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后,连接到表达载体T7 Select 10-3b上,用包装蛋白包装后,以大肠埃希菌BLT5403为宿主菌进行增殖,随机挑取50个噬菌斑,进行PCR鉴定,并测定文库滴度。结果扩增的VH和VL基因大小均与预期相符,测序结果经blast比对,扩增的片段与犬IgG的VH和VL序列匹配率达90%以上;所构建的原始文库滴度为3.2×107pfu/ml,扩增后的文库滴度为5.0×108pfu/ml。对随机挑取的50个噬菌斑进行PCR鉴定,重组率为94%。结论成功构建了抗CDV的T7噬菌体抗体库,为犬科动物犬瘟热的防治提供了参考。
- 马云青任文陟高娟陈健岳媛高红博高巍
- 关键词：犬瘟热病毒单链抗体
