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蜡梅WRKY转录因子基因CpWRKY71及其启动子的克隆和应用: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及蜡梅WRKY转录因子基因CpWRKY71及其启动子的克隆和应用。本发明的目的是为蜡梅逆境胁迫研究提供一种新选择。本发明提供了蜡梅WRKY转录因子基因CpWRKY71，其编码蛋白具有如S...; 黄仁维刘道凤眭顺照马婧李志能李名扬; 文献传递

“素心”蜡梅花粉生活力及贮藏力的研究被引量：1: 2016年; 采用离体萌发法,研究不同的培养基对成年株"素心"蜡梅(Chimonanthus praecox)花粉萌发的作用,并探讨不同干燥时间及贮藏条件对花粉生活力的影响。结果表明,干燥4h的花粉在10%蔗糖+75mg·L^(-1) H_3BO_3+0.1‰CaCl_2+50mg·L^(-1) GA3的培养基上培养4h后萌发率最高,并且干燥4h后的花粉贮藏2d后生活力下降明显,在-20℃条件下贮藏6d后花粉萌发率明显高于4℃和20℃贮藏的花粉,第8d后3种贮藏条件下的花粉萌发率均不到1%。研究结果可为测定和分析蜡梅花粉生活力提供一定的参考,也为蜡梅储存指出了方向。; 杨姗张家瑞秦垚马婧李名扬李志能; 关键词：蜡梅花粉生活力贮藏力

蜡梅凝集素基因克隆及其对蚜虫、蛞蝓抗性分析被引量：8: 2011年; 【目的】克隆蜡梅凝集素基因并研究其抗蚜虫和抗蛞蝓活性,为植物抗虫基因工程提供理论依据和试验材料。【方法】通过随机挑选克隆测序的方法,从蜡梅花cDNA文库中克隆蜡梅凝集素基因,并构建植物表达载体,用农杆菌介导的叶盘法转化烟草,并对转基因植株进行抗蚜和抗蛞蝓试验。【结果】从蜡梅花cDNA文库中克隆到了一个凝集素基因CpLEC(GenBank登录号:DQ352145),该基因全长871 bp,ORF框长558 bp,编码185个氨基酸。该基因DNA分析表明其不含内含子。具有单子叶植物甘露糖凝集素基因家族的特征,有2个典型的甘露糖结合位点(QXDXNXVXY),和1个变异的可能结合位点(HXGXNXVXY)。Southern杂交表明,该基因在蜡梅基因组中为多拷贝。构建了35S启动子控制下的CpLEC基因的植物表达载体pBI121-CpLEC,利用根癌农杆菌介导法转化烟草获得抗卡那霉素的植株。PCR和半定量RT-PCR分析表明,CpLEC基因已经整合到植物基因组中并在转录水平上得到了有效表达。抗蚜虫鉴定表明,转基因植株及其离体叶片有效地抑制了蚜虫的群体增长率,平均抑制率分别为60%和68%。抗蛞蝓试验结果表明转基因植株有明显的抗蛞蝓活性,转基因烟草虫害指数为0.17,远低于非转基因烟草的虫害指数0.96。【结论】克隆获得了蜡梅凝集素基因CpLEC,通过转基因手段分析其抗蚜和抗蛞蝓活性,结果表明该基因对抗虫基因工程有重要的应用价值。; 眭顺照李琳莉祝钦泷马婧李名扬; 关键词：转基因烟草抗性蚜虫蛞蝓

中国芦荟AlDREB2基因的克隆及其胁迫表达被引量：5: 2009年; 为了研究中国芦荟的抗逆机理,以cDNA为模板,利用3′RACE和PCR扩增方法,克隆得到了一个编码DREB蛋白的基因,命名为AlDREB2,GenBank登录号为FJ560460。其cDNA序列全长为886bp,包含一个636bp的开放阅读框,推导编码的氨基酸序列(212个氨基酸)与库拉索芦荟AlDREB1的序列相似性很高。进化树分析结果将AlDREB2归入DREB亚家族中A-6亚组。利用RT-PCR技术分析了AlDREB2基因的表达与胁迫的关系,表明AlDREB2基因在非生物胁迫与生物胁迫中能够被不同程度诱导表达。; 张倩马婧何婧李名扬眭顺照; 关键词：芦荟 DREB转录因子胁迫处理

2个蜡梅nsLTP基因启动子的克隆及其在烟草中的瞬时表达分析被引量：7: 2012年; 利用hiTAIL-PCR法得到了2个蜡梅(Chimonanthus praecox)非特异性脂转移蛋白(non-specific lipid transfer protein)基因家族成员CpLTP3和CpLTP4翻译起始位点上游启动子序列,长度分别为1298bp和838bp。生物信息学分析表明2个序列均存在启动子的基本元件TATA-box和CAAT-box及多个与植物非生物胁迫相关的响应元件。在烟草叶片中的瞬时表达结果表明这两个启动子序列均具备驱动报告基因GUS表达的功能。; 马婧刘群王晓斌眭顺照李名扬; 关键词：蜡梅非特异性脂转移蛋白启动子胁迫

金荞麦无色花色素还原酶基因FdLAR的克隆和表达分析被引量：7: 2012年; 无色花色素还原酶(leucoanthocyantin reducase,LAR)基因是植物类黄酮代谢途径中催化缩合单宁合成的一个关键结构基因,本研究通过简并PCR结合RACE的方法,获得了1个金荞麦(Fagopyrum dibotrys(D.Don)Hara)无色花色素还原酶基因FdLAR(GenBank accession:JN793953),序列全长1 581 bp,其中开放阅读框长1 176 bp,编码391个氨基酸的蛋白质,在N端存在1个保守结构域,属于RED蛋白家族。将该基因重组到表达载体pET-32a(+)中进行原核表达,经IPTG诱导、SDS-PAGE检测,结果表明金荞麦无色花色素还原酶基因能在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,电泳检测到1条大约66 kD的外源蛋白,与预测的融合蛋白分子量相符。利用实时荧光定量PCR技术检测FdLAR基因在金荞麦根茎中不同生长发育时期的表达情况,同时测定相应根茎中类黄酮的含量,结果表明FdLAR基因的表达量与类黄酮积累之间的关系在营养生长和生殖生长阶段呈现出不同的变化趋势,推测该基因可能在金荞麦类黄酮次生代谢产物积累中起作用。; 马婧王斌代银眭顺照李名扬; 关键词：金荞麦类黄酮简并PCR 原核表达实时荧光定量PCR

蜡梅快速碱化因子基因CpRALF的克隆及表达分析被引量：1: 2012年; 通过随机克隆测序的方法从蜡梅花cDNA文库中获得快速碱化因子基因,命名为CpRALF(GenBank登录号为:JQ217379)。扩增获得的DNA序列与cDNA序列一致,表明该基因不具有内含子,包含一个384bp的最大开放阅读框,编码一个长127个氨基酸的蛋白质。蛋白质序列同源比对发现其含有快速碱化因子特有的YIXY、YXRGC和4个保守的半胱氨酸以及双精氨酸结构。实时荧光定量PCR分析表明该基因在蜡梅茎、根和盛开的全花中表达量较高;在花发育过程中,蕾期和衰败期表达丰度高。在对蜡梅幼苗进行高温、低温、高盐、重金属4种非生物胁迫处理后,通过实时荧光定量PCR对CpRALF在幼叶中的表达量进行分析,结果表明高温、高盐和重金属能够促进该基因表达,而低温则抑制该基因的表达,且CpRALF对高盐与重金属胁迫的响应比对高温和低温胁迫的响应更为显著和迅速,表明该基因可能在蜡梅花发育以及非生物胁迫反应响应方面发挥作用。; 王斌杨汶源孙晶晶马婧李名扬眭顺照; 关键词：蜡梅基因克隆

金荞麦MYB转录因子基因FdMYBP1的克隆及分子特征分析被引量：6: 2009年; 目的：对金荞麦MYB转录因子基因FdMYBP1进行克隆和序列特征分析。方法：采用RACE结合cDNA文库筛选的方法，从金荞麦cDNA文库中克隆MYBP1基因（FdMYBP1）；生物信息学分析，Southern杂交。结果：克隆到1个MYBP1转录因子基因（FdMYBP1），通过Southern杂交分析，推测FdMYBP1基因是1～2个拷贝基因；FdMYBP1基因编码1个长256个氨基酸的蛋白质，在N端存在1个保守结构域，属于MYB转录因子家族。结论：首次从金荞麦中克隆到转录因子基因FdMYBP1，它具有MYB同源基因的典型特征，可能在金荞麦类黄酮代谢途径中起作用。; 马婧祝钦泷郭铁英刘光德眭顺照李名扬; 关键词：金荞麦 MYB转录因子类黄酮

园艺专业研究生《基因工程实验技术》课程教学探索与实践被引量：3: 2014年; 针对园艺专业研究生的特点和人才培养要求,分析了《基因工程实验技术》课程在理论和实验教学中存在的不足,结合笔者在该课程教学实践中积累的经验和体会,从课程的理论体系、实验设置、实施方案和考核制度几个方面进行了探索,提出了一套较为有效的教学体系.; 马婧眭顺照李名扬; 关键词：基因工程实验教学教学改革

蜡梅CpSRG1基因、启动子及其应用: 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及蜡梅CpSRG1基因、启动子及其应用。本发明提供了蜡梅CpSRG1蛋白、编码该蛋白的基因及启动子的克隆其应用。本发明首次克隆获得蜡梅CpSRG1基因，并通过实时荧光定量PCR技术检测...; 马婧李桂香刘道凤罗江会门维婷李名扬眭顺照; 文献传递

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马婧

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