郑佳琳
- 作品数:17 被引量:11H指数:2
- 供职机构:华南农业大学更多>>
- 发文基金:长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 狂犬病毒HEP-Flury株基质蛋白的原核表达及纯化被引量:2
- 2010年
- 为原核表达狂犬病毒(RV)基质蛋白(M),本研究以RV的HEP-Flury株全长重组质粒为模板扩增M基因,双酶切后定向克隆至原核表达载体pQE30,构建重组质粒pQE-M并转化至宿主菌E.coli M15(pREP4),在IPTG的诱导下表达。SDS-PAGE电泳分析显示M蛋白为25ku。Western blot检测证明,重组蛋白可被鼠抗His单克隆抗体及鼠抗狂犬病毒多克隆抗体特异识别。本研究为狂犬病诊断方法的建立奠定了基础。
- 江飙郑佳琳邝贞结梁红茹徐蕙郭霄峰
- 关键词:狂犬病病毒基质蛋白原核表达
- 检测犬源狂犬病毒中和抗体ELISA方法的建立被引量:4
- 2012年
- 为了有效监测犬免疫狂犬病疫苗后的保护效力,以狂犬病毒(Rabies virus,RV)糖蛋白的主要优势抗原表位区G3蛋白(RV G3)作为包被抗原,建立了一种检测狂犬病毒中和抗体效价的间接ELISA方法.通过优化反应条件,确定抗原最佳包被量为8 mg/L,血清的最佳稀释度为1∶100,酶标二抗的稀释度为1∶3 000.特异性试验表明,该抗原不与犬瘟热病毒、犬腺病毒、犬细小病毒阳性血清发生交叉反应;批内和批间重复性试验的平均变异系数都小于10%;敏感性达1∶1 280.此方法检测134份血清样品的结果与美国SYNBIOTICS试剂盒相比,总符合率达95.6%.
- 傅秋玲郑佳琳林颖仪张莹阳佑天潘姣姣吴晓薇郭霄峰
- 关键词:狂犬病毒糖蛋白中和抗体间接ELISA
- 犬源狂犬病病毒中和抗体ELISA检测方法的建立
- <正>目的为了有效监测犬免疫狂犬病毒疫苗后的抗体阳转率和抗体水平。方法以狂犬病病毒糖蛋白的主要优势抗原表位区G3蛋白作为包被抗原,建立了一种检测狂犬病病毒中和抗体效价的间接ELISA方法。结果通过优化反应条件,确定抗原最...
- 傅秋玲郑佳琳林颖仪郭霄峰
- 关键词:中和抗体间接ELISA
- 文献传递
- 狂犬病毒分离株糖蛋白基因的克隆与序列分析被引量:1
- 2010年
- 为分析狂犬病毒(RV)分离株糖蛋白基因之间的差异,本研究采用RT-PCR的方法扩增由广东某地临床表现正常犬的唾液中分离的RV(GD33)分离株的G基因,将其克隆、测序后与国内外部分毒株相应基因进行核苷酸序列比较,结果表明,该分离株与其他毒株相比核苷酸同源性为94%~97.1%;氨基酸同源性为97%~99.2%。而GD33分离株与HEP-Flury株在跨膜区、膜内区有很高的一致性;另外,GD33分离株与HEP-Flury和FluryLEP株在333位点出现精氨酸被取代的现象,证实GD33分离株这2个疫苗株没有显著差异,对监控我国狂犬病疫情具有一定的意义。
- 江飙郑佳琳梁红茹徐蕙郭霄峰
- 关键词:狂犬病毒糖蛋白基因
- 狂犬病病毒糖蛋白抗原表位富集区单克隆抗体的制备
- 为制备狂犬病病毒糖蛋白抗原表位富集区单克隆抗体,以原核表达的部分糖蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,所获得的杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选和有限稀释法克隆,获得3株能稳定分泌单抗的杂交瘤细胞株。...
- 郑佳琳江飙张东霞施赫赫郭霄峰
- 关键词:狂犬病病毒糖蛋白抗原表位单克隆抗体
- 全序列密码子优化对狂犬病病毒基质蛋白原核表达的影响
- 采用PCR方法由HEP-Flury株全长质粒中扩增狂犬病病毒基质蛋白序列M,另采用全序列合成方法将其序列中稀有密码子替换为大肠杆菌偏嗜密码子,得到优化后序列MN。将以上两个序列双酶切后定向克隆至原核表达载体pET-32a...
- 江飙郑佳琳张东霞郭霄峰
- 关键词:狂犬病病毒基质蛋白密码子优化原核表达
- 狂犬病病毒糖蛋白基因的修饰、原核表达及其单克隆抗体的制备
- 狂犬病是由狂犬病病毒(rabies virus,RV)引起的一种人兽共患的烈性传染病,一旦发病难以医治。准确、及时、快速的诊断是临床治疗的前提,也是免疫监测、流行病学调查的主要手段,还是有效控制狂犬病的关键。狂犬病病毒的...
- 郑佳琳
- 关键词:狂犬病病毒糖蛋白抗原表位原核表达单克隆抗体
- 狂犬病病毒糖蛋白抗原表位富集区单克隆抗体的制备
- 备狂犬病病毒糖蛋白抗原表位富集区单克隆抗体,以原核表达的部分糖蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,所获得的杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选和有限稀释法克隆,获得3株能稳定分泌单抗的杂交瘤细胞株。通过...
- 郑佳琳江飙张东霞施赫赫郭霄峰
- 文献传递
- 全序列密码子优化对狂犬病病毒基质蛋白原核表达的影响
- 采用PCR方法由HEP-Flury株全长质粒中扩增狂犬病病毒基质蛋白序列M,另采用全序列合成方法将其序列中稀有密码子替换为大肠杆菌偏嗜密码子,得到优化后序列MN。将以上两个序列双酶切后定向克隆至原核表达载体pET-32a...
- 江飙郑佳琳张东霞郭霄峰
- 关键词:狂犬病病毒基质蛋白密码子优化原核表达
- 文献传递
- 一株通过基因修饰以优化表达后的狂犬病病毒糖蛋白及其单克隆抗体和应用
- 本发明公开了经修饰的狂犬病病毒的G蛋白基因G3,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;该G蛋白基因G3表达得到的经修饰的狂犬病病毒的G蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;所述狂犬病病毒为狂犬病病毒(rabi...
- 郭霄峰张戴婷郑佳琳阳佑天王怡飞
- 文献传递