贾玉玺
- 作品数：9 被引量：23H指数：4
- 供职机构：大理学院基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 弓形虫基因分型研究进展被引量：8
- 2013年
- 弓形虫感染可引起严重的弓形虫病,而不同宿主感染的弓形虫株基因型差异较大,不同基因型弓形虫株的致病力及药物敏感性亦存在较大差异。目前,对弓形虫基因型的分析多选用限制性片段长度多态性PCR(PCR RFLP)、高度重复序列PCR、多重PCR和巢氏PCR等技术,扩增位点多选择B1、SAG2、HSP70、GRA6等遗传标记。传统的弓形虫基因型主要有3个,随着研究的不断深入,越来越多的基因型被发现。本文就弓形虫基因分型研究进展进行综述。
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- 关键词：弓形虫基因基因分型
- 云南西部人类免疫缺陷病毒与弓形虫双重感染者一氧化氮水平的研究
- 2013年
- 目的了解人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）与弓形虫双重感染者的一氧化氮（nitric oxide，NO）水平及感染弓形虫与NO之间的关系。方法收集144例HIV阳性者血清，进行弓形虫抗体检测．于9个月后再次取血．前后两次取得的血清应用硝酸还原酶法测定其NO的水平：对HIV阳性者血清进行CD4＋细胞计数．根据CDg细胞计数水平将患者分为免疫功能正常组、免疫功能受损组和免疫功能严重受损组．检测三组患者的NO水平。用SPSS16．0软件对检测结果进行统计学分析。结果HIV与弓形虫双重者感染者的血清NO值为（82．77±5．82）μmol／L。HIV阳性无弓形虫感染者的NO值为（44．56±5．38）μmol／L，二者差异有统计学意义（P〈0．05）；第一次和第二次检测的HIV与弓形虫双重感染者NO水平分别为（81．37±8．22）μmol／L和（84．18±8．28）μmol／g．差异无统计学意义（P〉0．05）；第一次和第二次检测的HIV单一感染者NO值分别为（48．35±9．16）μmol／L和（40．78±5．67）μmol／L差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫功能正常组NO水平与免疫功能受损组、免疫功能严重受损组进行比较，差异均具有统计学意义（P〈0．05）；免疫功能受损组NO水平高于免疫功能严重受损组，但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HIV与弓形虫双重感染者血清NO水平比HIV阳性单一阳性者高．随着HIV阳性者CD4＋细胞计数的下降．机体产生NO的能力也在减弱。
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- 关键词：弓形虫
- 云南临沧HIV阳性者血液中弓形虫SAGSAG2基因位点分析被引量：1
- 2015年
- 目的初步了解云南临沧HIV阳性者血液中弓形虫的基因型特征。方法运用巢式PCR法对弓形虫SAG2基因的两个片段分别进行基因提取、扩增,然后对PCR产物进行回收纯化、酶切及测序,并与弓形虫基因I型标准株进行对比鉴定。结果从170份HIV阳性者全血样本中分别扩增出35个弓形虫SAG2基因(241、221 bp),从其中扩增阳性的全血样本中各选择4份分别进行酶切,扩增出目的基因片段,进一步从酶切样本中选择2份与弓形虫基因标准株RH株进行对比,酶切SAG2基因(241 bp)显示血液样本基因型为Ⅰ型或Ⅱ型,酶切SAG2基因(221 bp)确定基因型均为Ⅰ型。结论初步确定云南临沧HIV阳性者弓形虫基因型以Ⅰ型为主。
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- 关键词：弓形虫HIV阳性基因型巢式PCR
- 世界各地不同基因型弓形虫流行概况被引量：1
- 2013年
- 刚地弓形虫是一种专性细胞寄生原虫,可以感染包括人类在内的几乎所有温血动物并在世界范围内传播,引起人兽共患寄生虫病。不同地区或同一地区不同宿主的弓形虫基因型不同,不同基因型的弓形虫虫株的致病性存在很大差异。本文就世界各地不同基因型弓形虫流行概况进行了综述。
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- 关键词：弓形虫基因型
- 分离自HIV阳性者的弓形虫与RH株GRA6基因比较被引量：3
- 2014年
- 目的对分离自大理地区的HIV阳性者感染的弓形虫与RH株进行致密颗粒抗原(GRA6)基因的对比分析。方法采用巢式PCR方法对大理HIV阳性者血液样本与RH株基因组进行扩增,选取GRA6基因阳性扩增产物,用MseⅠ内切酶进行酶切电泳成像,并对基因序列进行测定与分析。结果成功扩增出约800 bp大小的GRA6基因片段,MseⅠ内切酶内切后得到约600 bp和200 bp 2个条带。测序结果显示,HIV阳性者血样扩增产物与RH株扩增产物的GRA6基因仅存在2个碱基差异:第447对碱基处C变成G、第623对碱基处G变成T,而且在序列中的146 bp和690 bp处均找到MseⅠ酶切位点(TTAA)。结论初步判断大理地区的HIV阳性者感染的弓形虫基因型与弓形虫RH株一致,同属基因Ⅰ型。
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- 关键词：刚地弓形虫HIV基因型
- 云南HIV阳性患者感染弓形虫基因型的初步分析被引量：6
- 2013年
- 2011年9月至2012年12月收集云南省西部地区HIV阳性患者全血样品150份,利用巢氏PCR技术对血样进行弓形虫B1基因的扩增,扩增产物经限制性内切酶Pm1Ⅰ和XhoⅠ酶切,进行限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)。自B1基因扩增阳性的血样中取5份扩增产物测序,结果与标准基因Ⅰ型株B1基因序列(登录号为AF179871)进行比对分析。在150份HIV阳性患者血样中,13份扩增出弓形虫B1基因,约530 bp。PCR产物酶切结果显示,13份血样均得到1个片段,约为500 bp,与标准基因Ⅰ型株的条带一致。测序结果显示,4份血样的扩增产物完全一致,与基因Ⅰ型株的B1基因序列仅有3个碱基的差异;余1份血样的扩增产物在第230对碱基处G→A。因此初步确定此次研究中的云南省西部地区HIV阳性患者感染弓形虫基因型为Ⅰ型。
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- 关键词：人类免疫缺陷病毒刚地弓形虫B1基因巢式PCR
- 云南省龙陵县HIV阳性者感染弓形虫的SAG2基因位点分析被引量：4
- 2014年
- 目的初步了解云南省龙陵县HIV阳性者感染弓形虫的基因型特征。方法使用基因提取试剂盒提取龙陵县HIV阳性者感染弓形虫的基因,运用巢式PCR技术分别对弓形虫SAG2基因(241bp、221bp)进行扩增,扩增产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳,紫外投射仪下观察结果。用DNA胶回收试剂盒切胶回收PCR产物并进行酶切,酶切产物置于37℃恒温培养箱孵育16h,孵育后的酶切产物用2.5%琼脂糖凝胶电泳,凝胶成像系统摄像观察结果并与弓形虫基因Ⅰ型标准株进行对比鉴定。结果 112份HIV阳性者全血37份扩增出弓形虫SAG2基因(241bp、221bp)。从37份弓形虫SAG2基因(241bp、221bp)扩增阳性的全血标本中选择条带较亮的6份进行酶切,并与弓形虫基因I型标准株比对,初步确定2号标本为基因Ⅲ型,其他标本为基因Ⅰ型。从酶切的6份标本中选择2份进行测序,其中1份为酶切Ⅲ型(测序的2号标本)。经过基因序列对比分析,各弓形虫株之间SAG2基因的碱基对差异较小。其中基因Ⅰ型36份,Ⅲ型1份。结论初步确定云南省龙陵县HIV阳性者感染弓形虫的基因型以Ⅰ型为主,Ⅲ型少见,未见Ⅱ型及其他基因型。
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- 关键词：HIV阳性弓形虫
- 巢式PCR在弓形虫检测和基因研究中的应用进展被引量：8
- 2013年
- 弓形虫是一种专性细胞内寄生的寄生虫,人感染后多呈隐性感染,临床检测及诊断困难。巢式PCR是利用2套引物,对靶细胞基因2次识别并进行2轮扩增的方法,它可从极少量的模板中获得较高浓度和纯度的靶片段,在弓形虫的检测和基因研究中具有敏感性高、特异性强、稳定性好的优点。本文对巢式PCR在弓形虫中的应用进行了综述。
- 陈凌娟贾玉玺申丽洁
- 关键词：巢式PCR弓形虫
- 分子诊断技术在弓形虫检测和基因分析中的研究进展
- 2014年
- 弓形虫是一种专性细胞内寄生的寄生虫,人感染后多呈隐性感染,临床表现缺乏特异性,检测及诊断较为困难.分子诊断是应用分子生物学方法,检测患者体内遗传物质结构或表达水平的变化,继而做出诊断的技术,它为疾病的预防、诊断、治疗和转归提供更为准确的信息.目前,分子诊断技术主要有核酸探针技术、PCR及其衍生技术、环介导等温扩增技术、基因芯片技术等.该文对分子诊断技术在弓形虫中的应用进行综述.
- 冷丽陈凌娟贾玉玺罗米申丽洁
- 关键词：刚地弓形虫弓形虫病基因分析
