蔡翠霞
- 作品数：20 被引量：78H指数：6
- 供职机构：南方医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家公益性行业科研专项广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 一种用于芯片质控的通用序列标签寡核苷酸探针的设计(英文)
- 2011年
- 目的设计一种带有通用序列标签的寡核苷酸探针以应用于寡核苷酸芯片点样的质量控制。方法以HIV寡核苷酸探针作为核心序列,在其一端或两端连接上多种通用序列标签(UST)构建新型探针。然后打印芯片,以Cy5标记的通用引物(Cy5-UP,与UST互补)进行杂交,筛选出5条荧光信号强的探针,重新打印芯片。再分别以不同浓度梯度的、Cy5标记的通用引物(Cy5-UP)和随机引物(Cy5-RP)与芯片杂交,比较两者杂交效率。结果 Cy5-UP的杂交结果显著优于Cy5-RP的杂交结果,特别是在较低浓度时。结论利用Cy5标记的通用引物检测探针上的通用序列标签,可以为芯片点样的质量控制提供一种更有效的方法。
- 杨琼沈年汉蔡翠霞周珏宇李凌郑文岭
- 关键词：寡核苷酸芯片探针设计
- 改良Chelex-100法快速提取转基因农产品DNA被引量：6
- 2011年
- 旨在建立一种从转基因农产品中快速提取DNA的方法。分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取转基因大豆GTS40-3-2基因组DNA,测其浓度和纯度,PCR扩增其内源基因(Lectin)、启动子(CaMV35S)和品系特异性序列,对两种方法进行比较和评价,并研究两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果,以及改良Chelex-100法在玉米、小麦和水稻等其他转基因农产品的应用效果。结果表明,改良Chelex-100法能够快速在1.5 h之内从样品中提取DNA,所提取的DNA直接用于PCR扩增反应,产物电泳条带清晰明亮。两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果未见明显差别。该方法在玉米、小麦和水稻等转基因农产品的应用效果稳定。因此,改良Chelex-100法提取的DNA可以作为PCR扩增模板用于转基因农产品检测。该方法具有经济、简便、快速、安全的特点,适合转基因农产品大规模筛选和鉴别。
- 蔡翠霞肖维威康文杰周琳华吴永彬郑远金马文丽
- 关键词：CTAB法DNA提取PCR
- SUSD2基因真核表达载体构建及其在H322细胞中表达被引量：2
- 2016年
- [目的]构建SUSD2基因真核表达载体,并观察其在真核细胞H322细胞中的表达。[方法]从H322细胞中提取总RNA并逆转录为c DNA,采用PCR技术扩增出含有EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的人SUSD2基因片段,以质粒pc DNA3.1为表达载体,构建重组质粒pc DNA3.1-SUSD2。采用PCR、双酶切鉴定以及测序验证c DNA片段大小和序列正确。将重组载体pc DNA3.1-SUSD2转染H322细胞,Western Blot法检测SUSD2蛋白的表达。[结果]PCR、双酶切鉴定以及测序结果显示pc DNA3.1-SUSD2包含大小、序列正确的SUSD2片段;Western Blot结果显示SUSD2蛋白在转染pc DNA3.1-SUSD2的H322细胞中表达高于转染pc DNA3.1的H322细胞。[结论]成功获得SUSD2基因全长序列,并成功构建SUSD2基因真核表达载体,有效地在非小细胞肺癌细胞株H322中表达,为进一步研究该基因功能及机制奠定了基础。
- 蔡翠霞刘心蕊王涵多高媛王飞
- 关键词：真核表达载体
- 苏云金芽孢杆菌Cry1A(b)抗虫基因LAMP检测方法的建立与应用被引量：7
- 2012年
- 以转基因玉米MON810为模板,针对Cry1A(b)抗虫基因核酸保守序列设计特异性引物,建立LAMP检测体系。对该体系的可行性、灵敏性、特异性进行分析,并应用于转基因产品的检测。研究结果显示该方法快速简单、灵敏度特异性高、结果可视化,可应用于转基因产品中Cry1A(b)基因的初步筛选。
- 周琳华肖维威吴永彬蔡翠霞康文杰刘唐书马文丽
- 关键词：苏云金芽孢杆菌环介导等温扩增技术
- SUSD2基因干扰表达载体的构建及在A549细胞中鉴定被引量：1
- 2017年
- [目的]构建SUSD2基因短发夹RNA(shRNA)的表达载体,并在人非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞中鉴定。[方法]设计合成SUSD2基因shRNA片段,连接到经Bam HⅠ和EcoRⅠ双酶切的psi-m H1 shRNA载体中,构建干扰表达载体psi-m H1-SUSD2 shRNA,酶切后测序鉴定;将干扰载体psi-m H1-SUSD2 shRNA转染A549细胞,荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western Blot法检测干扰载体的干扰效率。[结果]酶切和测序结果显示成功构建了SUSD2基因shRNA的表达载体,q-PCR和Western Blot结果显示最佳干扰载体可使SUSD2 mRNA相对表达量下调75%以上,并可明显抑制A549细胞中SUSD2蛋白的表达。[结论]成功构建了SUSD2基因干扰表达载体,并在A549细胞中有效干扰SUSD2基因的表达。
- 危敏叶华秀蔡翠霞
- 关键词：短发夹RNAA549细胞非小细胞肺癌
- 挤出成型法制备添加铁离子的管式阳极支撑固体氧化物燃料电池（英文）
- 2017年
- 本文通过挤出成型法,成功制备了管式固体氧化物烘焙电池阳极支撑体,并以YSZ为电解质,LSM为阴极组装成电池测试其电化学性能。为了改善阳极的结构,在阳极粉料分别中添加了三种造孔剂:石墨、玉米粉和淀粉,并进行了单电池的组装及电池性能测试。SEM分析和电化学测试结果都表明,与玉米粉和淀粉相比,石墨为造孔剂效果更好。另外,为了进一步优化阳极的性能,本文在以石墨为造孔剂时,同时在阳极中添加了相当于5%mol Ni的Fe离子。SEM结果显示Fe离子的加入能够减少阳极的烧结,优化阳极结构。随后的电化学性能测试亦表明,随着Fe离子的加入,单电池的性能从241m W·cm^(-2)提高到了400m W·cm^(-2)。而由于Fe的电阻大于Ni,电池的欧姆阻抗与未添加Fe离子时相比有了一定的提高。
- 王涵多高媛王妮莎刘江蔡翠霞
- 关键词：固体氧化物燃料电池阳极支撑体微观结构电化学性能
- 相转换法制备中低温SOFC阳极支撑体被引量：1
- 2018年
- 利用相转换法,在阳极浆料中添加油酸、相对分子质量为1 000的聚乙二醇(PEG)和丙酮等3种有机添加剂,制备椎管式Ni-钆掺杂氧化铈(Ni-GDC)基阳极支撑体。以丙酮为添加剂时,阳极截面的指状孔结构最多,且在1 400℃下烧结后的孔隙率最高(42%);以PEG-1000和油酸为添加剂时,阳极的指状孔结构减少甚至消失,烧结后的孔隙率较低。以丙酮为添加剂,可在不使用石墨造孔剂的情况下,通过相转换法制得符合固体氧化物燃料电池(SOFC)阳极孔隙率要求的材料。在丙酮为添加剂的阳极上浸渍GDC膜电解质,将GDC电解质膜分别在1 300℃、1 400℃和1 500℃下烧结,发现单体电池在1 400℃烧结后的输出性能最好,在600℃下的功率密度为620 m W/cm2。
- 王涵多蔡翠霞高媛刘江
- 关键词：阳极支撑体电化学性能
- PBL教学法在生物化学课堂中的运用被引量：5
- 2020年
- PBL教学法(Problem-Based Learning,简称PBL)在中国高等医学院校推行的时间较短。基因表达的调控是生物化学和分子生物学教学的重要内容,也是当今医学发展最快的学科之一,本文总结该章PBL教学法的经验体会,以期对PBL教学在中国高等医学院校的推广提出建设性意见。
- 王涵多蔡翠霞高媛
- 关键词：PBL教学高等医学院校
- 沉默HERC4表达可抑制宫颈癌细胞的增殖、凋亡和迁移被引量：12
- 2017年
- 目的探讨HERC4对宫颈癌细胞生物学功能的影响及其分子机制。方法设计特异HERC4 si RNA干扰序列,Lipofectamine2000法转染Hela细胞,Western blotting检测转染特异si RNA后Hela细胞HERC4蛋白的表达水平;CCK-8法检测转染后Hela细胞的增殖能力;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测转染后Hela细胞凋亡率的变化;划痕实验检测转染后Hela细胞迁移能力。Western blotting检测转染后Hela细胞Cyclin D1、Bcl-2表达变化。结果转染特异si RNA后Hela细胞HERC4蛋白表达量明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,干扰组Hela细胞生长速度明显减慢,细胞凋亡率增加,迁移能力明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。转染后Cyclin D1和Bcl-2在蛋白水平的表达显著下调(P<0.01)。结论 si RNA可有效降低宫颈癌Hela细胞中HERC4的表达,并通过抑制Cyclin D1表达抑制宫颈癌Hela细胞的增殖和迁移能力,抑制Bcl-2表达增加细胞凋亡能力。
- 危敏张艳玲陈岚蔡翠霞王涵多
- 关键词：SIRNAHELA细胞细胞迁移
- LAMP技术检测食品中转基因成分CaMV35S启动子的研究被引量：8
- 2013年
- 目的:建立一种快速检测CaMV35S启动子基因的环介导等温扩增技术检测方法。方法:针对CaMV35S启动子设计4对特异性引物,在链置换酶(Bst酶)作用下,65℃扩增1h。通过对转基因大豆GTS40-3-2等8种转基因标准品的检测,对该方法进行特异性评价。以F3、B3为引物,转基因大豆GTS40-3-2为模板,纯化后的PCR扩增产物与pMD-18T载体连接,构建含有CaMV35s启动子的质粒标准分子。配制7个浓度梯度的标准质粒分子,进行灵敏度分析。同时应用该方法和荧光PCR方法检测35种农产品及其加工品。结果:该方法特异性强,结果可视,检测灵敏度达200copies/μL,35种样品的检测结果与SYBRGreen荧光PCR检测结果一致。结论:建立的LAMP法具有快速,简单,可视化,灵敏度高和特异性强等优点,可应用于转基因产品的初步筛选。
- 肖维威周琳华吴永彬蔡翠霞马文丽刘唐书
- 关键词：花椰菜花叶病毒环介导等温扩增技术转基因食品
