罗希
- 作品数：17 被引量：14H指数：3
- 供职机构：浙江工业大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金浙江省重点科技创新团队项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程医药卫生更多>>
- 产醛酮还原酶菌株、醛酮还原酶基因、载体、工程菌及应用
- 本发明公开了一种产醛酮还原酶菌株、醛酮还原酶基因、载体、工程菌构建及应用方法，所述醛酮还原酶基因的核苷酸序列为SEQ ID No.1、SEQ ID No.3和SEQ ID No.5中的一种，SEQ ID No.1、SEQ...
- 郑裕国王亚军罗希刘小青
- 文献传递
- 生物催化制备6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯及菌株
- 本发明提供了一株具有高立体选择性羰基还原酶活性微生物菌种——卡里比克毕赤酵母菌（Pichia caribbic）ZJB-09225，及其在生物不对称还原(R)-6-氰基-5-羟基-3-羰基己酸叔丁酯制备6-氰基-(3R,...
- 郑裕国王亚军盛骏桢罗希沈寅初
- 文献传递
- 边远贫困地区旅游开发中的妇女成长--来自贵州西江千户苗寨的案例
- 以研究贫困著名的印度经济学家、诺贝尔奖获得者阿玛蒂亚·森(Amartya Sen)在论及有关妇女的主体地位与社会变化时认为,参与货币收益的就业对妇女产生多种正向作用,如妇女有更大能力在家庭决策中把儿童养育放到更优先的位置...
- 何景明傅佳慧罗希
- 关键词：旅游开发女性群体
- E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)-cr羰基还原酶分离纯化及酶学性质研究被引量：3
- 2015年
- 利用强酸型阳离子交换层析和疏水作用层析技术,从实验室构建的羰基还原酶工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET28a(+)-cr细胞中分离得到电泳纯NADP(H)依赖型的羰基还原酶,LC-MS-QTOF分析揭示其相对分子质量为35.4 k Da。该酶能不对称还原6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯(CHOHB)、4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)合成阿托伐他汀关键手性合成子6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯、(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯,对丙酮酸乙酯、丁二酮也表现出较高的还原能力。该羰基还原酶的最适作用条件为:30℃,p H7.5;且活性不依赖于金属离子。它催化CHOHB还原反应的最大反应速度vmax 54.3μmol·mg-1·min-1,KmCHOHB值4.4 mmol·L-1;作用于COBE时,最大反应速度vmax 36.5μmol·mg-1·min-1,KmCOBE值1.2×10-1 mmol·L-1。E.coli BL21(DE3)/p ET28a(+)-cr羰基还原酶在他汀手性侧链制造上具有广阔的应用前景。
- 王亚军吴配配罗希郑裕国
- 关键词：分离纯化
- 具有非对映选择性还原6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯活性的微生物菌株筛选与鉴定被引量：3
- 2012年
- 6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯是合成阿托伐他汀钙的关键手性前体。从自然环境中筛选得到一株具有非对映选择性还原6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯活性的菌株X25,结合表型特征、生理生化特征和分子遗传学鉴定,确定菌株X25属于季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)。研究了P.guilliermondii X25静息细胞非对映选择性还原6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯制备6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯过程。结果表明,最佳催化条件为35℃、pH值7.0;在低底物转化率时,能够制备光学纯6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯。
- 毛芳芳王亚军罗希魏积福郑裕国
- 关键词：阿托伐他汀钙羰基还原酶
- 生物还原制备他汀侧链6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯及菌株
- 本发明提供了一株具有反-Prelog非对映体选择性羰基还原酶活性的黏红酵母（Rhodotorula glutinis）ZJB-09224，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，邮政编码：430072，...
- 郑裕国王亚军罗希盛骏桢沈寅初
- 文献传递
- 反-Prelog规则羰基还原酶产生菌Debaryomyces castellii ZJB-12032产酶条件优化研究
- 2014年
- 6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯是合成阿托伐他汀的关键手性前体。实验室保藏菌株Debaryomyces castellii ZJB-12032能够不对称还原6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯β羰基,生成6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯,该生物还原反应符合反-prelog规则。通过优化D.castellii ZJB-12032发酵产酶条件,包括碳源、氮源、磷源、接种量、接种时间、发酵时间,获得其最佳培养基配方:麦芽糖50 g/L、NaNO315 g/L、NaH2PO4·2H2O 0.5 g/L、Na2HPO4·12H2O 0.5 g/L,最适发酵条件:接种量10%,种龄8 h,培养温度30℃,发酵时间24h。在上述最佳发酵条件下,发酵液体积酶活达到10.2 U/L,比酶活1.20 U/g dcw,产物d.e.值99.6%,D.castellii ZJB-12032表现出高差向选择性。
- 姚震罗希王亚军郑裕国
- 关键词：羰基还原酶
- 重组短链脱氢酶LcSDR催化(R)-1-苯基乙醇不对称合成的工艺开发被引量：3
- 2016年
- 采用基因挖掘技术从Lactobacillus composti基因组中筛选到一条编码短链脱氢酶(LcSDR)的序列,该LcSDR能不对称还原苯乙酮(1a)合成(R)-1-苯基乙醇[(R)-1b]。构建了Lc SDR和葡萄糖脱氢酶(EsGDH)双酶偶联催化合成体系,优化了Lc SDR不对称还原1a合成(R)-1b的催化工艺参数。在较佳催化条件下,50 g/L1a转化反应2 h,产物(R)-1b得率93.8%,产物对映体过量值(eep)高于99%,该手性生物合成催化过程的时空产率达到562.8 g/(L·d)。
- 陈敏王亚军柳志强罗希郑裕国
- 关键词：辅酶再生
- 生物催化制备6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯及菌株
- 本发明提供了一株具有高立体选择性羰基还原酶活性微生物菌种——卡里比克毕赤酵母菌（Pichia caribbic）ZJB-09225，及其在生物不对称还原(R)-6-氰基-5-羟基-3-羰基己酸叔丁酯制备6-氰基-(3R,...
- 郑裕国王亚军盛骏桢罗希沈寅初
- 6-氰基-(3R,5R)二羟基己酸叔丁酯合成的补料生物转化工艺
- 2015年
- 通过对羰基还原酶工程菌E.coli BL21/p ET28a(+)-cr与葡萄糖脱氢酶工程菌E.coli BL21/p ET28a(+)-gdh的全细胞协同生物转化工艺进行优化,实现高浓度投料的6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基己酸叔丁酯[(5R)-CHOHB]不对称还原合成6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯[(3R,5R)-CDHHB]。采用全细胞分批转化方式,确定底物(5R)-CHOHB和葡萄糖的一次性投料浓度为300 g/L。进一步考察了补料转化方式对提高转化效率的影响。结果表明,相对于一次性投料的全细胞分批转化工艺,采用连续补料方式和分批补料方式均能使底物投料量达到400 g/L。相对于以往报道,底物投料量提高了33.3%,产物(3R,5R)-CDHHB非对映体过量值(d.e.值)为99.5%,具有良好的工业应用前景。
- 刘小青王亚军沈伟良罗希郑裕国
- 关键词：羰基还原酶
