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白蚁内切-β-1，4-葡聚糖酶基因的克隆、表达及分子改造: 纤维素(Cellulose)是地球上最丰富的有机物质，它是光合作用最主要的产物，同时也是最丰富的可再生资源，地球上每年光合作用可产生大于100亿吨的植物干物质，其中一半以上是纤维素和半纤维素。但纤维素的利用目前尚未完全开...; 秦国梅; 关键词：白蚁葡聚糖酶基因克隆基因表达 RT-PCR; 文献传递

绿色木霉葡聚糖内切酶EGⅢ基因在大肠杆菌中的表达、定点突变及其动力学特性的研究: 2009年; 将绿色木霉葡聚糖内切酶EGⅢ基因亚克隆到表达载体pET-22b(+),构建重组质粒pET-egl3,转化到大肠杆菌BL21(DE3)。利用金属亲和层析对重组EGⅢ进行纯化,纯化后酶比活力达到6 U/mg蛋白,最适反应温度为60℃,最适pH为4.0。同时对EGⅢ催化区的氨基酸残基R130和E218进行定点饱和突变,各筛选到一株酶活有提高的突变子R130P和E218F,其比活力为野生型EGⅢ的2.8倍和3.45倍。突变酶E218F的Km提高了一倍,催化效率Kcat提高了5.4倍;而R130P的Km和Kcat没有明显变化。两个突变酶的最适酶解温度和pH分别都提高至65℃和4.4。; 黄艳燕左文朴秦国梅韦宇拓杜丽琴庞宗文黄日波; 关键词：绿色木霉大肠杆菌

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秦国梅