田博
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
- 供职机构:山东师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 悬浮培养HEK-293 N3S细胞生产重组腺病毒Ad-GFP的实验研究被引量:5
- 2007年
- 利用5L生物反应器悬浮培养HEK-293N3S细胞生产携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(recombinant adenovirus-greenfluorescent protein,Ad-GFP),为规模化生产腺病毒基因药物建立一种稳定可行的生产工艺。复苏的种子细胞进行逐级放大最后接入5L搅拌式生物反应器中,采用含5%胎牛血清(FBS)的DMEM/F12培基灌流培养293N3S细胞,当细胞密度达到(2-4)×10^6个/mL时感染Ad-GFP,48h后收获细胞,经两步氯化铯超速离心获得纯化的Ad-GFP。采用紫外分光光度计比色法和高压液相色谱法(HPLC)测定病毒颗粒数和纯度,采用组织培养半数感染剂量(TCID50)法检测腺病毒的感染滴度。连续培养10-12d,细胞密度可达到(2-4)×106个/mL左右,纯化的Ad-GFP感染滴度和颗粒数分别为1.0×10^11IU/mL和1.68×10^12VP/mL,比活性为6.0%,A260/A280比值为1.33,产品纯度达到99.2%。建立了5L生物反应器悬浮培养293N3S细胞生产重组腺病毒Ad-GFP的生产工艺,对携带其他基因的重组腺病毒药物生产具有一定的指导意义。
- 田博吴彬张群伟毕建进王澜朱宝珍耿越吴祖泽
- 关键词:重组腺病毒生物反应器
- 油菜花粉超临界CO2萃取物对高脂血大鼠脂质代谢的影响
- 本文研究了油菜花粉超临界CO2萃取物对高脂血大鼠脂质代谢的影响。结果表明,油菜花粉对高血脂大鼠血脂的降低作用,主要是通过增加HDL-C和LCAT水平,促进胆固醇转运、代谢和排出,抑制HMG-CoA还原酶活性减少胆固醇体内...
- 耿越涂文利张静静张晾张健田博
- 关键词:油菜花粉脂质代谢中药药理
- 文献传递
- 规模化悬浮培养哺乳动物细胞生产腺病毒工艺的实验研究
- 腺病毒载体(Adenovirus Vector,AdV)作为基因治疗的运载系统近年来发展较快,在已经报道1000多种基因治疗的临床方案中,约26﹪是用腺病毒作为载体.AdV最大的优点就是可以在包装细胞内高滴度复制,另外,...
- 田博
- 关键词:重组腺病毒生产工艺分离纯化
- 文献传递