王景龙
- 作品数：23 被引量：140H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 布鲁氏菌胞内寄生的研究进展被引量：2
- 2012年
- 布鲁氏菌是一种能够在哺乳动物巨噬细胞内生存和增殖的兼性厌氧菌。近年来,布鲁氏菌的研究主要集中在参与细胞内寄生过程中的毒力因子及其对宿主细胞的影响。主要论述布鲁氏菌如何逃避巨噬细胞的防御及其在细胞内寄生状况。
- 张瑞王秀然李晓艳王景龙钱晶冉会玲王兴龙
- 关键词：布鲁氏菌巨噬细胞寄生防御机制
- 羊布鲁菌16M VjbR蛋白酵母双杂交诱饵表达载体的构建及其毒性和自激活效应检测
- 2013年
- 利用Sos招募系统(SRS),通过PCR扩增羊布鲁菌16M VjbR基因的编码序列,定向克隆到酵母表达载体pSos中,构建诱饵重组质粒pSos-VjbR,经测序正确后其将转入酵母菌cdc25H(α)感受态细胞,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无自激活作用。结果表明,经序列测定证实重组诱饵质粒pSos-VjbR构建成功。重组质粒转化入酵母细胞后,经检测其表达产物对cdc25H(α)酵母细胞无毒性作用,对报告基因亦无自激活作用。可以利用SRS研究与羊布鲁菌16M VjbR蛋白相互作用的蛋白,为进一步研究羊布鲁菌致病机制奠定了基础。
- 屈海龙王景龙李晓燕张瑞王秀然陈思钱晶王兴龙
- 关键词：自激活作用酵母双杂交
- MALDI质谱成像的样本制备技术及应用研究进展被引量：2
- 2012年
- MALDI质谱成像技术（Maldi tof ImagingMass Spectrometry,MALDI-IMS）,是利用MALDI质谱技术将得到的蛋白组学数据,结合计算机辅助成像产生分子图像,进而描绘出组织上已知及未知分子分布情况的新技术。该技术已被广泛应用于生命科学的很多领域,如动植物生理学、病理学[1-3]、药物研发[4-6]等。1样品制备技术MALDI质谱成像实验的关键是样品的制备[7],它主要包括冰冻切片的制备和基质的选择及应用等。
- 徐静万家余许娜许琴李楠王景龙刘文森
- 关键词：MALDI质谱技术成像技术植物生理学
- CD4^+T细胞表位预测及其应用
- 2011年
- 目前,运用生物软件预测CD4+T细胞表位的技术越来越成熟,为表位疫苗的研究提供了有利的条件。对T细胞表位预测技术及其应用进行了综述。
- 李向阳张嘉保何永聚王景龙
- 关键词：生物信息学表位预测CD4+T细胞
- 羊布氏菌强毒株16M感染小鼠骨髓树突状细胞模型的建立
- 2011年
- 目的建立羊布氏菌强毒株16M感染小鼠骨髓树突状细胞(Dendritic cell,DC)的模型。方法体外分离C57小鼠骨髓原代细胞,经粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte monocyte colony stimulating factor,GM-CSF)和重组人白细胞介素-4(Recombinant human interleukin-4,rhIL-4)诱导分化后,倒置显微镜观察DC形态,流式细胞术鉴定其分化程度。在体外建立羊布氏菌16M感染小鼠骨髓DC模型,间接免疫荧光试验和透射电镜进行鉴定,并进行感染后羊布氏菌16M的重培养及染色观察。结果培养第5天,细胞形态符合髓源DC,伸出长的树突样和伪足样突起;第7天,细胞呈半悬浮,周围有大量突起;体外培养DC的纯度约达70%,符合试验要求。DC在感染后12 h具有最强的吞噬能力,胞内细菌量最少。重培养后经染色,可观察到羊布氏菌16M典型的细菌形态。结论成功构建了羊布氏菌感染小鼠骨髓DC模型,为进一步研究布氏菌与DC的相互作用及胞内寄生机制奠定了基础。
- 李晓艳王景龙张瑞孙春辉郎需龙杨艳玲屈海龙赵勇坤王兴龙
- 关键词：小鼠骨髓树突细胞
- 羊型布氏菌WbkC基因真核表达质粒的构建及鉴定被引量：5
- 2011年
- 目的构建羊型布氏菌脂多糖O-侧链合成必需的甲酰基转移酶WbkC基因真核表达质粒,并进行鉴定。方法提取16M株羊型布氏菌基因组DNA,PCR扩增WbkC基因,克隆至psos载体上,构建诱饵重组质粒psos-WbkC,转化酵母菌株cdc25Hα,进行菌落PCR鉴定,并检测其在酵母双杂交系统中的自激活和定位情况。结果诱饵重组质粒psos-WbkC经PCR双酶切及测序证明构建正确;重组酵母菌经PCR鉴定,可扩增出约780 bp的目的基因;诱饵质粒在酵母双杂交系统中无自激活且定位正确。结论已构建了羊型布氏菌WbkC基因真核表达质粒psos-WbkC,可应用于酵母双杂交系统中,用于寻找巨噬细胞cDNA文库中与WbkC相互作用的蛋白质。
- 王景龙屈海龙王秀然郎需龙李晓艳王兴龙
- 关键词：真核细胞基因表达
- 翻译调控肿瘤蛋白的原核表达及纯化
- 2012年
- 目的原核表达并纯化翻译调控肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)。方法以人乳腺癌细胞系MCF-7总RNA为模板,PCR扩增TCTP基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。His Trap FF层析柱纯化重组蛋白后,进行Western blot鉴定。结果克隆的目的基因序列正确,未发生碱基突变;重组表达质粒经双酶切鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为20 000,主要以包涵体形式表达;纯化后纯度为80%,可与兔抗人TCTP多克隆抗体特异性结合。结论已成功在大肠杆菌BL21(DE3)中表达并纯化了TCTP,为进一步研究其在肿瘤等疾病发生、发展及治疗中的作用奠定了基础。
- 陈智嘉谷励王景龙许小敏陈思嘉
- 关键词：原核细胞基因表达纯化
- 感染牛布鲁菌544A的巨噬细胞蛋白质组学分析被引量：2
- 2012年
- 布鲁菌在巨噬细胞内寄生改变了巨噬细胞的很多结构和功能,对牛布鲁菌强毒株544A感染的巨噬细胞和未感染的巨噬细胞全细胞蛋白进行比较蛋白质组学分析,质谱鉴定和生物学信息检索,结果显示,共有13个差异蛋白点,代表了12种蛋白质,这些蛋白主要参与细胞的代谢,细胞骨架合成,蛋白损伤修复以及基因的转录调控等生物过程。这些蛋白的发现将为进一步研究布鲁菌的感染与致病机制提示方向,同时也为深入探讨病原菌与宿主的相互作用模式奠定了基础。
- 赵永坤杨艳玲孙春晖郎需龙王秀然王景龙张瑞王兴龙
- 关键词：布鲁菌小鼠巨噬细胞比较蛋白质组学双向电泳质谱鉴定
- 三氧化二砷诱导乳腺癌细胞株MCF-7凋亡对端粒酶活性的影响被引量：2
- 2012年
- 乳腺癌是严重威胁妇女健康的恶性肿瘤之一,近年发病率逐年上升,且发病年龄也趋于年轻化。近年来研究发现As2O3不仅对APL细胞,而且对其他血液肿瘤细胞和许多实体瘤细胞均具有诱导凋亡作用。Wang等研究表明端粒酶与恶性肿瘤发生有着紧密的关联。
- 陈智嘉谷励王景龙陈思嘉
- 关键词：AS2O3乳腺癌细胞系细胞存活率端粒酶活性凋亡
- 羊布氏菌SOD基因重组酿酒酵母菌株的构建及鉴定
- 2011年
- 目的构建羊布氏菌超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)基因重组酿酒酵母菌株,并进行鉴定。方法 PCR扩增羊布氏菌16M株SOD基因,与psos载体连接,构建重组表达质粒psos-SOD,转化酿酒酵母菌cdc25H,并进行PCR鉴定、表型验证、自激活及定位情况检验。结果重组真核表达质粒psos-SOD经双酶切和测序证明构建正确;重组酵母菌经PCR可扩增出525 bp的SOD基因条带,其表型正常,无自激活宿主菌的作用,表达蛋白定位正确。结论已成功构建了羊布氏菌SOD基因重组酿酒酵母菌株,为研究布氏菌致病的分子机制奠定了基础。
- 王景龙屈海龙杨延玲孙春辉王秀然郎需龙李晓艳卜昭阳王兴龙
- 关键词：超氧化物歧化酶
