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小鼠血清外泌体不同提取方法的比较被引量：1: 2021年; 目的:通过超速离心法和密度梯度离心法分离小鼠血清来源外泌体,为今后研究选择适合的方法提供参考。方法:将18只昆明系小鼠雌雄各半分为3组,每组6只,其中两组分别用超速离心法及密度梯度离心法提取小鼠血清中外泌体。通过透射电子显微镜观察2种方法提取外泌体的形态结构。之后在不同日期对剩下1组同种系同日龄6只小鼠的血清利用超速离心法提取外泌体,对得到的外泌体与之前该方法得到的结果进行比较,检验超速离心法的重复性。结果:通过对2种方法提取到的外泌体进行观察,与密度梯度离心法相比,超高速离心法提取的外泌体浓度更高,杂质较少。结论:超高速离心法是更为可靠且有效的外泌体提取方法。; 邱山桐张昊沈雅丽潘阳阳曾巧英王萌; 关键词：小鼠外泌体密度梯度离心法

HSP27基因在母牦牛生殖器官和孤雌激活胚胎中的表达: 通过克隆牦牛热休克蛋白27(heat shock proteins27,HSP27)基因,分析其生物学特性,探讨正常生理条件下HSP27基因在繁殖周期母牦牛主要生殖器官及不同时期牦牛孤雌激活胚胎中的表达差异,来阐明HSP...; 何翃闳潘阳阳李秦陈平温泽星李谷月蒋佳颖余四九; 文献传递

猪链球菌2型感染致小型猪肺炎的病理学研究: 2014年; 为探明猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)感染肺组织的主要病变及其在肺组织中的分布,并针对病变的肺脏进行系统的病理学研究。选取6头SPF巴马小型猪,5头用于实验组,分别肌肉注射1×109 CFU/mL的SS2菌液2mL;1头对照猪注射等体积生理盐水。记录死亡时间,同时观察死亡前实验小型猪的临床症状变化;剖解病死猪,观察肺部病变;随机取部分肺组织计算肺脏的湿/干比值,分析其与死亡时间的关系;取病变肺组织进行组织病理学观察;制作冰冻切片,用SS2荧光抗体检测SS2在肺组织中定位和菌量。结果显示:(1)实验组2头感染小型猪在6h内发生急性死亡,且死亡前没有任何神经症状,只是存在呼吸异常等症状,同时其肺脏的湿/干比值最大;另3头分别在感染12、20h和36h死亡,死亡前具有SS2典型的神经和呼吸异常症状,肺脏的湿/干比值也随之降低,可见死亡越早肺水肿程度越严重。(2)病死猪肺组织病理学观察结果显示,肺泡的间隔增宽,出血,有大量炎性物质渗出,肺泡腔内可见数量不等的红细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和浆液性渗出物等典型的间质性肺炎特征症状。(3)SS2荧光抗体检测显示SS2可侵入肺组织的各个部位,并且在6h和20h菌量相接近。结果表明SS2感染小型猪肺病变以炎症反应为主,并发现SS2感染诱发动物急性死亡与其感染导致呼吸功能衰竭有关。; 刘雨潇潘阳阳杨志彪华修国曾巧英崔立; 关键词：猪链球菌2型猪肺泡巨噬细胞肺脏病理学

科研模式化兽医药理学实验教学改革初探被引量：5: 2019年; 兽医药理学实验是动物医学专业的专业基础实验课,是理论知识转化为实践知识连接的桥梁。传统的兽医药理学实验教学模式中,学生缺乏主观能动性和实验设计能力,不利于创新型人才的培养。如何通过改进兽医药理学实验的教学思维和模式,促进学生对实验原理的理解、提高动手能力和创新意识,学以致用是该内容教学面临的主要问题。本文将科研思维和模式应用于兽医药理学的实验教学中,通过教师对学生讨论过程的评价、应用能力评价和学生满意度调查3个方面评价教学效果,以达到改善教学质量,提高实践技能,为培养合格的兽医人才提供保障。; 王萌潘阳阳王桂荣叶得河; 关键词：兽医药理学实验教学

小鼠孤雌激活胚胎早期发育过程中胞吞作用相关蛋白的动态表达分析: 2021年; 为探索哺乳动物孤雌激活胚胎早期发育过程中胞吞作用相关蛋白的动态表达,通过体外生产小鼠孤雌激活胚胎,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)技术检测不同发育时期小鼠孤雌激活胚胎胞吞作用相关蛋白Cav1、Cav2基因和蛋白相对表达水平,并采用免疫荧光技术进行不同发育时期小鼠孤雌激活胚胎中Cav1、Cav2表达定位分析。结果表明,在小鼠孤雌激活胚胎不同时期均可检测到Cav1、Cav2基因及其蛋白的表达,其中囊胚和桑椹胚中该2个基因的表达水平最高,4-8细胞时期次之,2细胞最低;各发育时期孤雌激活胚胎中Cav1、Cav2蛋白主要定位在胚胎细胞胞质内;囊胚中内细胞团(ICM)细胞中Cav1的荧光强度高于滋养层细胞。说明胞吞作用相关蛋白Cav1、Cav2可能参与小鼠早期胚胎发育的生理调控,桑椹胚和囊胚时期可能是其发挥生理功能的重要时期,并且在囊胚时期对内细胞团发育的调控作用更为显著。研究结果可为探索胞吞作用参与哺乳动物胚胎早期发育的调控机制提供重要参考。; 许瑞华周应聪孙莹王萌芮弦王靖雷马睿余四九潘阳阳; 关键词：孤雌激活胚胎发育

甘肃省猪香港病毒的巢式PCR检测及VP1基因序列的系统发育分析被引量：2: 2015年; 猪香港病毒(PHoV)于2008年在我国香港首次发现,属细小病毒新成员。本研究自甘肃省兰州、张掖、天水市养猪场和屠宰场采集血液样品147份,针对PHoV的VP1基因保守区(GenBank No.EU200677)设计2对引物,用巢式PCR(nPCR)检测PHoV。结果,甘肃省生猪PHoV总阳性率为38.10%(56/147)。其中,12周龄以上猪的阳性率(55.56%)显著高于6周龄以下猪(25.00%)(P<0.05);三地区间的阳性率差异不显著(P>0.05)。从56份阳性样本中挑选具地域代表性的12份,对VP1扩增片段测序(GenBank注册号:JQ177084~JQ177095),并和GenBank中的所有VP1序列一起进行系统发育分析。结果表明,12个VP1片段序列之间的相似性为95.2%~99.0%。其中,JQ177093、JQ177085和JQ177089构成一个独立的分支;其余9株和来自GenBank的12株参考序列均处于另一分支。9株中,JQ177095、JQ177087和JQ177091构成一个亚分支,紧邻罗马尼亚野猪株(JF738366);JQ177086、JQ177090和JQ177094构成第二个亚分支,紧邻香港株HK3;JQ177088、JQ177092和JQ177084构成第三个亚分支,紧邻香港株HK5。12株PHoV的VP1基因片段序列与香港株HK1~HK6的总体相似性为96.7%~99.7%,与罗马尼亚野猪株为95.2%~99.0%。本研究结果表明,源于罗马尼亚野猪株和香港株的PHoV均在甘肃省猪群中高水平流行。; 黄晓锋潘阳阳许芳曾巧英; 关键词：巢式PCR 基因序列系统发育分析

牦牛肺动脉平滑肌细胞的分离培养与鉴定被引量：2: 2020年; 比较组织块贴壁法和酶消化法对牦牛肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)原代培养的差异,为牦牛PASMCs的分离培养及后续的研究建立细胞模型。采用组织块贴壁法和0.2%Ⅰ型胶原酶消化法分别获取牦牛PASMCs,倒置相差显微镜下比较2种方法分离的细胞形态;台盼蓝染色测定细胞活力;α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和钙调节蛋白(calponin)免疫荧光法对细胞进行鉴定;细胞计数法获得细胞生长曲线并进行观察。结果显示,显微镜下2种方法获得的PASMCs均为长梭形,呈典型的"峰-谷"状结构,且传代存活率均在98.5%以上;2种细胞免疫荧光鉴定结果均表明培养的细胞为PASMCs;组织块贴壁法和酶消化法的PASMCs生长曲线无明显差别(P>0.05)。结果表明,2种方法均能顺利分离得到较纯的PASMCs,但各有优缺点,因此可根据具体情况选用牦牛PASMCs的原代分离培养方法。; 赵紫涵何俊峰潘阳阳张倩; 关键词：牦牛肺动脉平滑肌细胞细胞培养

牦牛PRDX4基因的分子特征分析及其在输卵管和卵巢中的表达: 2021年; 为研究牦牛过氧化物还原酶4(PRDX4)基因在牦牛卵巢和输卵管中的作用,采取繁殖周期不同阶段牦牛卵巢和输卵管样品,采用IHC技术,进行PRDX4蛋白表达的定位检测;进行牦牛PRDX4基因的克隆,并分析其分子特征;采用RT-qPCR技术,检测m RNA在牦牛卵巢和输卵管中的相对表达量;采用Western-blot技术,检测PRDX4蛋白在牦牛卵巢和输卵管中的相对表达量。IHC结果显示,在繁殖周期不同阶段牦牛卵巢中,PRDX4蛋白主要表达于颗粒细胞、卵巢体细胞和粒黄体细胞,且在妊娠期的染色强于黄体期和卵泡期;在繁殖周期不同阶段牦牛输卵管中,PRDX4蛋白主要表达于黏膜上皮细胞,且在卵泡期的染色强于黄体期和妊娠期。成功克隆出牦牛PRDX4基因的CDs区,其保守性较高,与家牛、印度牛、美洲狮及金钱豹等的同源性均在86%以上;分子特征分析结果显示,牦牛PRDX4蛋白的氨基酸数为227,分子式为C_(1146)H_(1854)N_(348)O_(317)S_(15),原子总数为3680,pI为10.58,分子质量为26.06 ku,且其主要分布于粒线体、细胞核、细胞质、细胞骨架,含量分别为69.6%、21.70%、4.30%、4.30%;该蛋白具有Sec/SPI信号肽,其二级结构由3种折叠方式构成,其中含有89个α-螺旋、31个延伸链、107个无规卷曲,占比分别为39.21%、13.66%、47.14%,且具有三级结构;该蛋白有18个丝氨酸磷酸化位点、13个苏氨酸磷酸化位点,且不存在蛋白结合位点、糖基化位点,具有可溶性,且有两个跨膜区。qRT-PCR结果显示,在繁殖周期不同阶段卵巢中,PRDX4基因在卵泡期和妊娠期的相对表达量均显著高于黄体期(P<0.05),且两者无显著差异(P>0.05);在繁殖周期不同阶段输卵管中,PRDX4基因的相对表达量不存在显著差异(P>0.05)。Western-blot结果显示,在繁殖周期不同阶段卵巢中,PRDX4蛋白在卵泡期显著高于黄体期和妊娠期(P<0.05),且在黄体期和妊娠期无显著差异(P>0.05);在繁殖周期不同阶段输卵�; 卢国杰潘阳阳韩小红王萌蔺蕙崔燕张虔蔡得琪康彩彩余四九; 关键词：牦牛分子特征

一种牦牛卵泡液外泌体的提取方法及其应用: 本发明公开了一种牦牛卵泡液外泌体的提取方法及其应用，属于外泌体技术领域。该提取方法将收集的牦牛卵泡液，第一次离心后取上清液一；将上清液一第二次离心取上清液二，之后经第一次超速离心得沉淀一，将沉淀一重悬后第二次超速离心得沉...; 潘阳阳许瑞华王靖雷余四九崔燕刘斌王萌王立斌

一种实用兔心脏采血保定装置: 本实用新型涉及一种实用兔心脏采血保定装置，包括底架，底架顶部设有并列的第一工作台面和第二工作台面，第二工作台面的高度低于第一工作台面；所述第一工作台面沿靠近第二工作台面的一侧设有转轴，转轴连接有第三工作台面；所述第三工作...; 王萌潘阳阳余四九崔燕徐庚全王立斌; 文献传递

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潘阳阳

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