潘晓娜
- 作品数:7 被引量:9H指数:2
- 供职机构:中山大学附属第三医院更多>>
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- 上调c-myc基因的表达对U937白血病细胞的影响被引量:5
- 2013年
- 目的:构建稳定表达外源c-myc基因的人单核细胞白血病细胞株U937,并初步分析其特性。方法:首先构建重组质粒MSCV-c-myc-IRES-GFP(MMIG)载体,分别用MMIG及空载体MSCV-IRES-GFP(MIG)包装病毒,并感染U937细胞,用流式细胞术分选绿色荧光细胞,获得U937/GFP和U937/MYC细胞,用荧光显微镜及流式细胞术检测GFP阳性率,用Western blotting测定细胞中c-Myc、survivin、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和Bcl-2的蛋白表达水平,流式细胞术检测U937/GFP和U937/MYC细胞周期,并用MTT法测定U937/GFP和U937/MYC细胞的生长情况,克隆形成实验检测克隆形成能力。结果:荧光显微镜观察,MIG和MMIG病毒感染后,2种细胞均表达绿色荧光蛋白;流式细胞术结果显示,MIG病毒感染的细胞荧光率为26.0%,MMIG病毒感染的细胞荧光率为27.7%;Western blotting的结果显示,c-Myc蛋白在MMIG病毒感染的细胞中表达水平升高。流式细胞术分选后,荧光显微镜观察可见绿色荧光蛋白表达明显增多,U937/GFP和U937/MYC细胞绿色荧光蛋白表达率分别达98.7%和93.7%。U937/MYC细胞中c-Myc蛋白表达较U937/GFP细胞显著升高,c-Myc蛋白下游的survivin表达增多,而凋亡相关蛋白XIAP及Bcl-2的表达则没有明显变化。细胞周期检测显示,U937/MYC细胞处于S期的细胞数增多。MTT实验结果显示,U937/MYC细胞的生长速率较U937/GFP细胞增快。U937/MYC细胞的克隆形成能力较U937/GFP细胞强。结论:成功构建了c-myc基因高表达的U937稳定细胞株U937/MYC。在U937/MYC细胞中,c-Myc及其下游的survivin表达明显上调,处于细胞周期S期的细胞数增多、细胞生长加快、克隆形成能力增强,提示c-Myc可能通过增强自我更新能力、加快细胞周期、促进相关抗凋亡蛋白表达从而提高细胞的存活率。
- 潘晓娜方志刚龙梓洁陈家杰刘玲玲范蕊芳林东军
- 关键词:C-MYC蛋白U937细胞
- CX3CL1/CX3CR1信号通路在运动训练改善血管性认知障碍中的作用及机制
- 目的:探讨CX3CL1/CX3CR1 信号通路在运动训练改善血管性认知障碍(VCI)中的作用及机制。方法:选取雄性Wistar 大鼠54 只,随机分为假手术组、对照组和训练组。以两血管法(2-VO)结扎双侧颈总动脉建立V...
- 蒋婷胡昔权张丽颖潘晓娜
- 关键词:血管性认知障碍小胶质细胞髓鞘再生
- 神经细胞自噬与Aβ沉积在运动训练改善脑梗死大鼠认知功能中的作用及机制
- 潘晓娜胡昔权张丽颖郑海清
- c-Myc抑制剂10058-F4对伊马替尼耐药细胞的增殖抑制作用被引量:4
- 2014年
- 目的:探讨c-Myc小分子抑制剂10058-F4对慢性粒细胞白血病细胞K562及伊马替尼耐药的K562/G细胞的影响,为克服耐药提供新的治疗策略。方法:Western blotting测定细胞中c-Myc蛋白表达水平,PI染色检测细胞周期。MTT法及克隆形成实验测定K562及K562/G细胞的增殖情况,Annexin V-PI染色检测细胞凋亡。结果:MTT结果显示,耐药细胞K562/G与K562细胞相比,对伊马替尼的敏感性明显降低;Western blotting检测结果表明耐药细胞具有c-Myc蛋白高表达的特点。进一步MTT结果显示,与对照组相比,c-Myc小分子抑制剂10058-F4可抑制K562及K562/G细胞的增殖,并呈剂量及时间依赖性。重要的是,K562/G细胞比K562细胞对10058-F4敏感性更高。细胞周期检测显示,10058-F4可使K562及K562/G细胞周期阻滞于G0/G1期,表明抑制cMyc导致的增殖抑制与细胞周期阻滞相关。Annexin V-PI染色结果显示10058-F4可促进K562及K562/G细胞发生凋亡。克隆形成实验表明K562/G耐药细胞的克隆形成数目明显高于K562细胞。同时,与对照组相比,10058-F4可抑制细胞的克隆形成能力,并增强伊马替尼的毒性作用。结论:耐药细胞K562/G具有c-Myc高表达的细胞遗传学特点;10058-F4可抑制K562及K562/G细胞增殖,促进凋亡,并抑制细胞的克隆形成能力;c-Myc抑制剂10058-F4可逆转c-Myc高表达引起的耐药。
- 龙梓洁方志刚潘晓娜范蕊芳林东军
- 关键词:C-MYC伊马替尼耐药慢性粒细胞白血病
- 小胶质细胞表型转变和髓鞘再生在运动训练改善慢性脑低灌注大鼠认知功能中的作用及机制
- 蒋婷张丽颖潘晓娜郑海清陈曦罗婧胡昔权
- 神经细胞自噬与Aβ沉积在运动训练改善脑梗死大鼠认知功能中的作用及机制
- 目的:探讨神经细胞自噬与Aβ沉积在运动训练改善脑梗死大鼠认知功能中的作用及机制。方法:130 只雄性自发性高血压大鼠(SHR)随机分成正常组、假手术组、tMCAO 术后组,对照组、训练组、盐水注射组及3-MA 注射组。采...
- 潘晓娜胡昔权张丽颖郑海清
- c-myc小分子抑制剂10058-F4对慢性粒细胞白血病细胞株K562及伊马替尼耐药细胞株K562/G的作用研究
- 目的:探讨c-myc小分子抑制剂10058-F4对K562及伊马替尼耐药细胞株K562/G增殖、凋亡及克隆形成能力的影响。方法:Western blot测定K562及K562/G细胞中e-myc蛋白表达量,应用四甲基偶氮...
- 潘晓娜龙梓洁林东军
- 关键词:C-MYC增殖抑制诱导凋亡