游丽
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：山东大学附属省立医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 糖基化终末产物对SH-SY5Y细胞氧化应激及凋亡的影响被引量：4
- 2012年
- 目的研究糖基化终末产物(AGEs)对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)凋亡的影响,探讨AGEs与阿尔茨海默病(AD)发病机制的关系。方法分别以不同浓度糖基化修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)处理SH-SY5Y细胞48 h,选取AGE-BSA敏感浓度(200μg/mL)处理细胞不同时间,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率,确定AGE-BSA诱导SH-SY5Y凋亡最佳浓度及时间。将细胞随机分为对照组、牛血清白蛋白(BSA)对照组、AGE-BSA组、AGE-BSA+抗RAGE中和抗体组、AGE-BSA+α-硫辛酸组、AGE-BSA+DPI(NADPH氧化酶抑制剂)组。FCM检测细胞凋亡率变化,Hoechst 33258染色观察细胞形态改变,应用活性氧荧光探针DCFH-DA检测活性氧(ROS)水平,Western blot测定Caspase-12的表达。结果细胞凋亡率随AGE-BSA浓度增加及作用时间延长而升高,200μg/mL AGE-BSA作用48 h细胞凋亡率从对照组的(2.23±0.08)%增加到(16.8±1.27)%(P<0.05),同时,Hoechst染核后可见典型凋亡形态改变,细胞内ROS水平显著增高,Caspase-12蛋白表达明显上调,与对照组相比差异显著(P<0.05),而分别用抗RAGE中和抗体、α-硫辛酸、DPI预处理后再加入AGE-BSA,各组与AGE-BSA组比较,凋亡率明显下降,ROS水平、Caspase-12蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论糖基化终末产物可刺激SH-SY5Y细胞产生大量ROS及活化Caspase-12介导细胞凋亡,通过阻断其与特异性受体RAGE结合或减少细胞内ROS可减轻细胞凋亡的发生。
- 董传芳刘雪平王美霞徐松殷青青孙志坚游丽
- 关键词：阿尔茨海默病活性氧CASPASE-12
- 吡格列酮改善胰岛素抵抗大鼠脑组织Tau蛋白磷酸化水平被引量：2
- 2012年
- 目的探讨胰岛素增敏剂吡格列酮(PIO)对胰岛素抵抗(IR)模型大鼠皮质Tau蛋白磷酸化水平的影响及可能的机制。方法选择Wistar大鼠46只,随机选20只分为对照组和PIO组,每组10只;另26只通过果糖喂养建立IR大鼠模型后,分为IR组和IR+PIO组,每组13只,采用免疫印迹法检测皮质Tau蛋白磷酸化、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(PKB)、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)及GSK-3β位点中Ser9的磷酸化水平。结果与对照组比较,IR组大鼠皮质Tau蛋白磷酸化水平明显增高;磷酸化PI3K、磷酸化PKB和磷酸化GSK-3β蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);而PIO能显著抑制Tau蛋白磷酸化水平,上调磷酸化PI3K、磷酸化PKB和磷酸化GSK-3β的水平(P<0.05,P<0.01);各组GSK-3β差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IR通过抑制PI3K-丝/苏氨酸蛋白激酶通路激活,促进GSK-3β活性上调,可能是引起大鼠海马Tau蛋白过度磷酸化的重要原因;PIO可能通过降低GSK-3β活性进而抑制Tau蛋白的过度磷酸化。
- 董泗芹董传芳孙志坚游丽罗鼎真刘雪平
- 关键词：胰岛素TAU蛋白质类蛋白激酶类神经原纤维缠结
- 糖基化终末产物对SH-SY5Y细胞内质网应激的影响被引量：2
- 2012年
- 目的研究糖基化终末产物(AGEs)对体外培养的神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)内质网应激的影响,探讨AGEs在AD发病中的可能机制。方法以糖基化修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)分别处理SH-SY5Y细胞0、12、24、48 h,蛋白质免疫印迹法检测内质网应激(ERS)相关蛋白GRP78、p-eIF2α、Caspase-12的表达水平。再将细胞随机分为正常对照组(NC组)、牛血清白蛋白对照组(BSA组)、AGE-BSA组、AGE-BSA+抗RAGE中和抗体组(RAGE-Ab组)、AGE-BSA+α-硫辛酸组(ALA组)、AGE-BSA+NADPH氧化酶抑制剂DPI组(DPI组)。蛋白免疫印迹法半定量检测各组细胞ERS相关蛋白表达水平变化,同样处理后用免疫荧光染色观察GRP78、p-eIF2α表达水平,应用活性氧荧光探针DCFH-DA检测各组细胞活性氧(ROS)水平。结果 AGE-BSA处理细胞24 h后免疫蛋白印迹可见GRP78、p-eIF2α出现表达高峰,同时荧光染色可见两者高水平表达,48 h后Caspase-12表达水平显著升高,且ROS水平达到NC组的6.95倍。与AGE-BSA组相比,RAGE-Ab组、ALA组、DPI组的ROS水平都有不同程度的降低(P<0.01),同时GRP78、p-eIF2α、Caspase-12的表达水平均有明显下调(P<0.01或P<0.05)。结论 AGEs可诱导SH-SY5Y细胞ROS产生,并通过启动氧化应激及内质网应激对细胞造成损伤。
- 董传芳刘雪平徐松王美霞殷青青孙志坚游丽
- 关键词：糖基化终末产物阿尔茨海默病活性氧内质网应激
