洪伟鸣 作品数:159 被引量:268 H指数:8 供职机构: 江苏农牧科技职业学院 更多>> 发文基金: 江苏省自然科学基金 国家自然科学基金 江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 医药卫生 更多>>
T7噬菌体尾丝蛋白随机进化文库的构建 2022年 为筛选遗传背景清晰、裂解性能优良、宿主识别谱广泛的噬菌体用于抗菌产品开发,满足畜禽减抗、无抗养殖需求,通过易错PCR技术定向改变T7噬菌体尾丝蛋白羧基末端基因序列,并构建T7噬菌体尾丝蛋白随机进化文库,为筛选识别不同宿主的T7噬菌体奠定基础。提取T7噬菌体基因组,用SfiⅠ进行单酶切,回收SfiⅠ位点左侧基因组。常规PCR扩增尾丝蛋白羧基末端基因序列(TF-ct,约350 bp)以及gene17至T7基因组右侧末端基因序列(约4000 bp)。以回收的TF-ct片段为模板,进行易错PCR扩增,将随机突变的TF-ct基因片段连接T载体,构建质粒文库。从质粒文库中用SfiⅠ/SphⅠ双酶切出TF-ct片段,并与SfiⅠ位点左侧基因组片段、gp17右侧基因组片段进行连接,利用包装蛋白拯救出T7噬菌体尾丝蛋白随机进化文库。结果易错PCR成功扩增TF-ct基因片段,并连接T载体构建质粒文库;同时随机突变的基因正确插入T7噬菌体基因组相应位置,成功拯救出尾丝蛋白定向进化T7噬菌体文库。从噬菌体文库中随机挑选15个克隆进行序列分析,目的基因的突变率在1.23%~2.16%;尾丝蛋白loop区域的氨基酸突变改变了T7噬菌体吸附宿主的能力。本研究成功构建T7噬菌体尾丝蛋白随机进化文库,验证了loop区域在T7噬菌体识别宿主过程的作用,为后续筛选有益噬菌体开发抗菌产品提供支撑。 洪伟鸣 李睿婷 郭子杰 徐海 左伟勇 张亮 宋亮Preliminary Study on the Effects of Zizhuliqing on Animal Cellular Immune Function 被引量:2 2008年 [Objective] The study aimed to explore the effects of Zizhuliqing Oral Liquid on animal cellular immune function.[Method] MTT method and phagocytizing natural red method were used to determine the effects of Zizhuliqing Oral Liquid on piglet lymphocyte transformation and the phagocytosis of mouse peritoneal macrophages respectively.[Result] The lymphocyte transformation rates of piglets in medicated groups were significantly higher than that in control group;the difference of mouse peritoneal macrophage activities between the medicated groups and the control group was obvious.[Conclusion] Zizhuliqing Oral Liquid could promote the transformation of piglet T lymphocytes induced by ConA and the phagocytosis of mouse peritoneal macrophages to natural red,indicating its good immune enhancement function. 洪伟鸣 邢晓玲 郁杰 葛竹兴 王妲妲关键词:ORAL IMMUNE LYMPHOCYTE TRANSFORMATION MACROPHAGE 抗微生物肽Alloferon的研究进展 2012年 Alloferon-1和Alloferon-2是分离自昆虫细胞的2个小肽,研究结果表明Alloferon-1和Alloferon-2具有抗病毒和抗肿瘤的活性。本文就Alloferon-1和Alloferon-2的抗病毒、抗肿瘤的作用效果及其在兽医临床上的应用进行了综述。 洪伟鸣 左伟勇 吴双 王健 朱善元关键词:多肽 抗病毒 抗肿瘤 豌豆蛋白粉和大豆粕的营养成分及氨基酸全肠表观消化率分析 被引量:6 2018年 本研究旨在通过消化试验比较豌豆蛋白粉(PGM)与大豆粕(SBM)在生长猪上的营养价值,为PGM的应用提供基础数据。在测定PGM和SBM营养成分的基础上,将30头(30.21±2.16)kg的苏姜阉公猪按体重相近原则随机分为3组,每组10头,分别饲喂1种基础饲粮和2种试验饲粮(85%基础饲粮+15%PGM或SBM),单笼饲养,进行体内消化试验。预试期4 d,收粪期4 d。结果表明:与SBM相比,PGM的粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE)和钙(Ca)含量较高,粗纤维(CF)、无氮浸出物(NFE)和粗灰分(Ash)含量较低;PGM中蛋氨酸(Met)、亮氨酸(Leu)、苏氨酸(Thr)和缬氨酸(Val)4种必需氨基酸含量高于SBM,而赖氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)和组氨酸(His)3种必需氨基酸含量低于SBM;生长猪对PGM中CP、NFE的全肠表观消化率显著低于SBM(P<0.05);生长猪对PGM中Lys和Leu 2种必需氨基酸的全肠表观消化率显著低于SBM(P<0.05),其余氨基酸之间没有显著差异(P>0.05)。综上,PGM的整体营养价值低于SBM,但PGM部分营养物质含量高于SBM,在猪饲粮生产中具有一定替代大豆粕的潜力。 周根来 张伟 张伟 左伟勇 左伟勇 张栋关键词:大豆粕 生长猪 营养成分 一种预防和治疗断奶仔猪腹泻的中药组合物及其应用 本发明公开了一种预防和治疗断奶仔猪腹泻的中药组合物及其应用,由以下原料按照重量组成:白头翁20‑30份、泡桐花10‑25份、蜘蛛香15‑25份。本发明采用上述中药原料配伍,制作工艺简单易行,药效协同促进,治疗仔猪腹泻治愈... 王婧 郁杰 陈芳 王妲妲 洪伟鸣 陈晓兰 陈未 邢晓玲文献传递 鸡Toll样受体2的克隆表达及多克隆抗体的制备 被引量:5 2014年 试验旨在制备鼠抗鸡Toll样受体2(chTLR2)的多克隆抗体。采用RT-PCR方法从活化的鸡外周血淋巴细胞中扩增其胞外区片段chTLR2(chTLR2t1和chTLR2t2),并构建这两个片段的原核表达重组质粒,优化蛋白质的表达条件,SDS-PAGE和Western-blot法检测融合蛋白,将融合蛋白作为免疫原免疫Balb/c小鼠,利用相应的原核表达的全长蛋白检测特异性抗体滴度。结果显示,成功获得chTLR2的胞外区片段,构建的原核表达重组质粒经IPTG诱导能成功表达预期的重组蛋白,免疫小鼠可产生特异性抗体,抗体效价分别为1∶16 000和1∶10 000。表明制备的鼠抗chTLR2多抗具有良好的特异性,为进一步研究chTLR2的功能提供了重要材料。 吴双 朱善元 王永娟 王安平 左伟勇 洪伟鸣关键词:原核表达 多克隆抗体 CHICKEN TOLL-LIKE 芒果苷的应用 本发明涉及中药技术领域,公开了芒果苷的新应用。本发明利用Western‑Blot、qRT‑PCR、细胞凋亡等技术通过各个层面的实验证明了,芒果苷能够显著抑制PRRSV感染和复制,具有显著的抗PRRSV病毒作用,有望成为新... 秦枫 朱善元 郭长明 刘云 吴双 吴植 王安平 王永娟 封琦 洪伟鸣文献传递 鸽副黏病毒经鸡胚传代引起毒力和F基因序列变化的研究 被引量:1 2018年 为研究鸽副黏病毒ND167在SPF鸡胚传代中毒力和F基因序列变化,运用有限稀释法将ND167连续传代扩繁,每代次均选择病毒稀释度最高且血凝价最高的尿囊液进行传代,共传10代次,测定第1、5和10代次的最小致死量致死鸡胚的平均时间(MDT)、1日龄雏鸡脑内致病指数(ICPI)和F基因序列。结果表明,ND167在鸡胚传代过程中F蛋白裂解位点氨基酸虽未突变,但是毒力却在逐渐增强,从中等毒力株演变为强毒力株。说明对于PPMV毒力判定需要根据动物实验进行,需警惕PPMV在鸡群中反复传代引起毒力增强。 吴双 朱善元 郭长明 左伟勇 王永娟 秦枫 洪伟鸣 王安平关键词:传代 毒力 猪传染性胸膜肺炎病原菌的分离鉴定与药敏试验 2008年 洪伟鸣 郁杰 葛竹兴 于青青 王妲妲关键词:猪传染性胸膜肺炎 药敏试验 病原菌 胸膜肺炎放线杆菌 呼吸道传染病 集约化发展 鸭源新城疫病毒F基因在昆虫细胞中的表达和鉴定 被引量:2 2015年 为在昆虫细胞中表达鸭源新城疫病毒(NDV)F蛋白,本试验首先根据鸭源NDV F基因序列设计引物,PCR扩增出F基因,将其克隆至杆状病毒表达载体pFastBac1,获得重组转座载体pFastBac-F,将其转化到大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中,经抗性和蓝白斑筛选,获得重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-F,在脂质体介导下转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBac-F。Western blotting、间接免疫荧光试验结果均显示表达的重组蛋白能与鸭抗NDV阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。结果表明鸭源NDV F蛋白在昆虫细胞中获得了成功表达,为鸭新城疫的预防控制奠定了基础。 王安平 朱善元 王永娟 吴双 左伟勇 洪伟鸣关键词:鸭源新城疫病毒 F基因 昆虫细胞