毕延震
- 作品数：184 被引量：143H指数：5
- 供职机构：湖北省农业科学院更多>>
- 发文基金：湖北省农业科技创新中心资助项目转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 体细胞核移植技术生产转基因猪胚胎的研究
- 2013年
- 以转染绿色荧光蛋白基因的猪胎儿成纤维阳性细胞作为体细胞核移植的核供体,体外成熟卵母细胞为核移植受体构建绿色荧光蛋白转基因克隆猪胚胎,研究供核细胞的处理、注核部位及重构胚融合/激活时间对转GFP克隆胚早期发育的影响.结果显示,胎儿成纤维细胞血清饥饿与非饥饿培养10 d处理组,采用卵周间隙核移植重构胚的卵裂率(82.35%和79.07%)差异不显著(P>0.05);体外培养42～44 h卵母细胞进行胞质内和卵周间隙注核的重构胚胎,其卵裂率(81.11%和76.80%)差异不显著(P>0.05);将卵周间隙注射法构建重构胚在0～1 h,2～4 h和6～8 h进行融合/激活操作,前2组重构胚卵裂率(75.61%和83.07%)无显著差异(P>0.05),但显著高于第3组(60.00%)的卵裂率(P<0.05).
- 华再东刘西梅毕延震华升郑新民
- 关键词：供核细胞
- 小鼠胚胎冷冻保存条件研究
- 2014年
- 为探索在实验室条件下最佳的小鼠胚胎冷冻保存条件。对不同发育阶段小鼠胚胎按照同一个冷冻程序进行冷冻;两个不同的冷冻程序对同一个发育阶段的小鼠胚胎进行冷冻。结果表明,-7℃平衡10 min,然后以0.3℃/min的速率迅速降至-35℃,-35℃平衡5 min后投入液氮中,此冷冻程序比较适合小鼠胚胎冷冻;冷冻保存对16细胞以上的小鼠胚胎影响较小。
- 张立苹曹辉刘西梅毕延震肖红卫李莉华再东华文君
- 关键词：小鼠胚胎冷冻保存
- m^(6)A去甲基化酶FTO对猪肌卫星细胞分化的影响
- 2023年
- 【目的】探究N^(6)-甲基腺苷(m^(6)A)去甲基化酶FTO表达水平对猪肌卫星细胞分化的影响,并比较不同表型猪FTO表达和m^(6)A甲基化修饰水平。【方法】收集分化第0、2和4天的猪肌卫星细胞,用Western blotting和实时荧光定量PCR分别检测FTO和肌球蛋白重链(MyHC)蛋白表达、肌分化因子(MyoD)和肌细胞生成素(MyoG)的mRNA表达水平;利用免疫荧光法检测肌卫星细胞分化标志基因MyHC表达情况;采用Dot blotting检测m^(6)A甲基化修饰水平。将过表达载体(OE-FTO)、空白对照(NC)和FTO基因干扰载体(siRNA-FTO)、阴性对照(siRNA-NC)分别转染猪肌卫星细胞并诱导分化,检测FTO、肌细胞分化相关基因表达情况以及m^(6)A甲基化修饰水平,利用免疫荧光法检测MyHC表达以及肌管形成情况;利用Western blotting和Dot blotting分别检测大白猪、宁乡猪不同组织中FTO蛋白表达情况以及m^(6)A甲基化修饰水平。【结果】在猪肌卫星细胞诱导分化过程中,与诱导分化第0天相比,第2和4天时FTO、MyHC蛋白表达水平极显著升高(P<0.01),FTO、MyoD和MyoG基因mRNA表达水平显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01);第4天时m^(6)A甲基化修饰水平显著下降(P<0.05)。与NC组相比,OE-FTO组FTO蛋白表达量极显著升高(P<0.01),在诱导分化的第0、1和2天,OE-FTO组FTO和MyHC基因mRNA表达水平均极显著升高(P<0.01),MyoD基因mRNA表达水平极显著下降(P<0.01);在诱导分化的第1、2、3和4天,OE-FTO组m^(6)A甲基化修饰水平显著或极显著下降(P<0.05;P<0.01)。与siRNA-NC组相比,siRNA-FTO组FTO蛋白表达水平显著降低(P<0.05),在诱导分化第0、1、2和3天,siRNA-FTO组FTO、MyHC基因mRNA表达水平极显著或显著降低(P<0.01;P<0.05),m^(6)A甲基化修饰水平显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01);在诱导分化第0、2和3天,siRNA-FTO组MyoG基因mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。大白猪背最长肌中FTO蛋白表达水平显著高于宁乡猪(P<0.05),m^(6)A甲基化修�
- 任祖凤顾浩胡康洪毕延震
- 关键词：FTO诱导分化
- 一站式PCR方法
- 本发明属于生物化学与分子生物学领域，涉及一种新型PCR反应方法，依次包括如下步骤：1)兼容染料混合物的配制，所述兼容染料混合物由聚蔗糖400、甲酚红、柠檬黄和Gelred组成；2)PCR主体混合物的配制，所述主体混合物由...
- 毕延震张嘉农马钧
- 诱导型IGF1转基因猪的构建
- 郑新民乔宪凤华文君肖红卫李莉周荆荣刘西梅张立苹程妮刘中华华再东毕延震魏庆信
- “诱导型IGF1转基因猪”应用于猪的育种和养猪生产。其技术原理为：通过基因重组技术，构建四环素诱导的IGF1表达载体；通过原核注射的转基因技术，将IGF1诱导表达载体导入猪的基因组，构建诱导型转IGF1基因猪；再应用在饲...
- 关键词：
- 关键词：转基因猪养猪育种技术
- 通用型基因打靶载体
- 本发明公开了一种通用型基因打靶载体，属于生物工程领域。该通用型基因打靶载体使用新霉素磷酸转移酶和EGFP为正选择标记，DsRed为负选择标记；正选择标记基因表达框的两侧各含有1个同向排列的LoxP位点；在LoxP位点附近...
- 毕延震郑新民华再东任红艳张立苹刘西梅华文君李莉肖红卫魏庆信
- 转EGFP-attB基因PK15细胞核型分析方法的建立
- 2013年
- 以转EGFP-attB基因PK15细胞（猪肾细胞15）为试验材料,研究不同秋水仙素浓度、低渗时间对染色体标本制备的影响。结果表明,使用秋水仙素浓度为0.04~0.08μg/mL、低渗时间为15~20 min时所制备的染色体标本分裂相分散好,可以做核型分析用,为下一步做染色体荧光原位杂交检测研究转EGFPattB基因在染色体上的整合位点奠定了基础。
- 肖红卫刘西梅毕延震华文君李莉张立苹华再东郑新民
- 关键词：转基因核型分析
- 从随机整合到靶向修饰的转基因动物技术被引量：2
- 2012年
- 转基因动物技术产生30年来取得了迅速发展,先后建立了多种转基因方法,尤其是从外源基因的随机整合发展到定位整合,成为定向进行动物遗传改造的强大工具。介绍各种转基因动物技术的建立及目前发展的概况,以及从随机整合到靶向修饰的发展过程。
- 魏庆信郑新民毕延震
- 关键词：转基因动物
- 一种试验用细胞笔
- 本实用新型公开一种试验用细胞笔，包括：容置管、针头、分隔板、弹簧、多级气腔柱、密封塞、螺柱及弹性膜，所述容置管包括第一连接管及第二连接管；所述多级气腔柱的外周面上凹陷形成有多个圆形按压槽；所述多级气腔柱的外周面上凹陷形成...
- 华再东肖伟毕延震任红艳朱喆肖红卫张立苹郑新民
- 文献传递
- 猪杂种一代与亲本肌肉组织间正反向消减cDNA文库的构建被引量：8
- 2005年
- 应用抑制消减杂交技术成功构建了杂种一代梅大猪、亲代大白猪的背最长肌正反向消减cDNA文库。以βactin为指标检测2个文库的消减效率分别为215和210倍。从相应的质粒文库中分别获取了700个和623个有效阳性克隆,PCR检测插入片段主要分布在150~600 bp之间。亲本与子代肌肉组织间消减cDNA文库的构建为进一步分离、鉴定与杂种优势相关的基因奠定了基础。
- 毕延震熊远著徐德全谢红涛
- 关键词：杂种一代亲本抑制消减杂交技术背最长肌质粒文库
