段凯
- 作品数：14 被引量：35H指数：4
- 供职机构：武汉生物制品研究所更多>>
- 发文基金：“重大新药创制”科技重大专项国家科技重大专项国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 肠道病毒71型灭活疫苗TritonX-100残留检测方法的建立与验证被引量：1
- 2015年
- 目的建立适合于肠道病毒71型（Vero细胞）灭活疫苗原液TritonX-100残留检测方法并加以验证。方法使用分光光度法对TritonX-100残留进行检测,并按照《中华人民共和国药典》（2010年版）二部中的相关规定对检测方法进行验证及初步应用。结果本方法在5~50μg/ml浓度范围能定量检测TritonX-100残留量,取不同浓度TritonX-100检测其回收率在85.97%~107.31%,RSD≤4.05%;重复性检测的RSD≤0.25%,中间精密度试验RSD≤3.18%;对检测中影响结果的参数：检测持续时间、检测温度、检测波长和检测试剂苯酚浓度在一定范围内适度变化后,检测理论浓度的TritonX-100,其平均回收率在86.42%~107.80%,RSD≤3.54%;340nm波长扫描PBS、5%苯酚、PBS＋苯酚的A值均〈0.01,TritonX-100及5%苯酚反应物的A值明显高于此值。结论本方法的准确度、精密度、专属性以及耐用性均符合规定,方法准确稳定,可用于对肠道病毒71型（Vero细胞）灭活疫苗原液中TritonX-100残留量的检测。
- 陈晓琦王继麟郭长福明平刚张柳涂晶杨邦玲段凯黄佐林
- 关键词：肠道病毒71型灭活疫苗
- RNA病毒疫苗株遗传稳定性被引量：3
- 2016年
- 病毒性疫苗种子批及成品的遗传稳定性与疫苗有效性、安全性密切相关.RNA病毒的高突变率和高重组率更易造成其遗传不稳定,因此,在RNA病毒疫苗的研发和生产中,毒株遗传稳定性的检测十分重要.随着分子生物学技术的发展,遗传稳定性的检测方法日渐丰富,同时也出现了很多能控制或提高疫苗遗传稳定性的方法.此文对RNA病毒疫苗株遗传稳定性及其影响机制、检测和提高疫苗株遗传稳定性方法的研究进展做一综述.
- 宣博刘悦越段凯国泰杨晓明
- 关键词：疫苗RNA病毒
- 应用单克隆抗体分析β_2微球蛋白抗原决定簇
- 1995年
- 应用一株T淋巴母细胞CEM免疫BALB／c小鼠后，取脾细胞与SP2／O职合，分别筛选出3株分泌抗β_2-微球蛋白（β_2－m）单抗细胞株，它们的反应性均能被纯化的可溶性β_2-m完全抑制，但D_(11)E_3、H_5B_2两种单抗既能与游离的β2m反应，亦能与细胞膜表面HLA-β_2－m复合物反应，它们识别相同或者权相近的抗原决定簇。相反，D_8E_3抗体不与细胞膜表面抗原反应，经抗体竞争实验及加成实验，均证实D_8E_3抗体所识别的抗原决定簇，与D_(11)E_3、H5B2不同。推测在细胞膜表面，D_8E_3抗体所识别的抗原决定簇可能被HLA重链相关区域所覆盖。
- 张爱华袁雪段凯闭兰王大坤
- 关键词：单克隆抗体Β-微球蛋白抗原决定簇
- 冻干乙型脑炎减毒活疫苗非动物源性稳定剂的配方及其缓冲液的筛选被引量：5
- 2012年
- 目的筛选冻干乙型脑炎减毒活疫苗非动物源性稳定剂的配方及其缓冲液。方法分别以0.01 mol/L PBS和Earles液为缓冲液,右旋糖苷-70、蔗糖、山梨醇、乳糖及组氨酸不同组合构成的冻干稳定剂,制备乙型脑炎减毒活疫苗半成品及冻干疫苗成品,观察在不同温度存放不同时间的稳定性,并检测不同配方冻干稳定剂的崩解温度(Tc)。结果 12种配方冻干稳定剂制成的疫苗半成品可在4℃1周内保持滴度稳定性,在25℃3 d内保持滴度无明显变化,3 d后滴度大幅下降;以0.01 mol/L PBS为缓冲液的稳定剂制备的疫苗的Tc值低于Earles液,以Earles液为缓冲液的D2和F2配方制备的冻干疫苗成品,在4℃及37℃放置1周后,滴度均>5.7 logPFU/ml。结论已筛选出以Earles液为缓冲液,含右旋糖苷-70、蔗糖、山梨醇、乳糖及组氨酸的稳定剂配方,用于制备冻干乙型脑炎减毒活疫苗具有良好的保护效果。
- 段凯李黎
- 关键词：乙型脑炎减毒活疫苗冻干稳定剂缓冲液
- 流感病毒在Vero细胞上的增殖被引量：5
- 2004年
- 目的研究流感病毒在非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)上高效增殖的最适条件。方法将Vero细胞在50cm2细胞瓶或3000mL旋转瓶中培养成单层,以不同感染复数接种流感病毒,在不同的培养条件下孵育,取上清测病毒血凝滴度。结果当加入胰酶终浓度为40μg·mL-1时,低感染复数接种流感病毒,可获得高效价病毒液,在3000mL旋转培养瓶中流感病毒的易感性较在50cm2静置培养瓶中略高。结论建立了流感病毒在Vero细胞上高效增殖的初步方法。
- 张捷汪翠玲钮泽春潘南胜段凯郜金荣
- 关键词：流感病毒VERO细胞增殖条件疫苗宿主细胞
- 吡喹酮治疗前后感染日本血吸虫兔循环29／43KD分子的水平和意义被引量：2
- 1994年
- 本文获得两株抗日本血吸虫２９／４３ＫＤ循环抗原的单克隆抗体，并用该抗体建立了一种检测该循环抗原的双抗体夹心法。我们应用该法研究了感染日本血吸虫兔在吡喹酮治疗前后，血清中２９／４３ＫＤ分子的水平变化。结果表明，２９／４３ＫＤ分子于感染后３～４周内开始出现于外周血循环中，于吡喹酮治疗后３～５周内即从血清中逐渐消逝。此提示该分子可能是早期诊断日本血吸虫病和评价化疗效果的一种有价值的血清标志物。
- 王大坤段凯郑宏钱益美钮泽春
- 关键词：日本血吸虫单克隆抗体循环抗原吡喹酮
- 高效价抗肠道病毒71型兔血清的制备及鉴定被引量：4
- 2014年
- 目的制备高效价的抗肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）兔血清。方法分别用RD细胞和Vero细胞培养EV71,纯化后,将经甲醛灭活和未灭活的EV71抗原分别加入佐剂或不加佐剂,经不同途径（肌肉、皮下、腹腔）免疫家兔,每周采血,分离血清,分别采用ELISA、免疫双扩散、免疫荧光和中和抗体试验检测兔血清抗体效价,并分析不同方法检测兔血清抗体结果的相关性。结果未灭活和灭活的纯化EV71抗原加弗氏佐剂后,经皮下或肌肉途径免疫家兔均可获得高效价的抗EV71兔血清,其中加弗氏佐剂的灭活疫苗经皮下途径免疫获得了最高滴度的中和抗体;当抗血清ELISA效价达到或接近1∶10^8,免疫双扩散效价达到或接近1∶512,抗血清1∶2 000稀释后荧光强度〉荻时,可进行免疫家兔的全血采集;不同方法免疫家兔全血采集的血清中和抗体效价为29 406～1 280 652 U/0.2 ml;免疫双扩散检测与中和抗体和免疫荧光检测结果的相关性较高。结论获得了高效价的抗EV71兔血清,为EV71疫苗抗原的相关检定创造了条件。
- 王继麟陈晓琦吴杰明平刚宰家敏郭长福杨京生段凯
- 关键词：肠道病毒71抗血清酶联免疫吸附测定
- 新时期生物制品人才培养体系的构建与探索
- 2022年
- 为适应国家高等教育改革和生物制品行业人才发展需要,针对目前生物制品人才培养存在的主要问题,从课程建设、研究生能力培养、激励机制和质量保障体系等方面进行了改革和探索,构建了生物制品创新型人才培养体系。该人才培养体系有效提升了研究生培养质量,契合“服务国家需求,面向科学前沿”价值导向,实现了为行业培养和输送创新型人才的目标。
- 杜洪桥李新国韩会珍杨桥段凯
- 关键词：生物制品课程建设创新型人才
- 辛酸钠对人免疫球蛋白中病毒的灭活效果被引量：8
- 2012年
- 目的研究辛酸钠对人免疫球蛋白中脂质包膜病毒和非脂质包膜病毒的灭活效果。方法人免疫球蛋白样品中加入≥6 LgTCID50/0.1 ml的脂质包膜病毒伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)、辛德毕斯病毒、HIV-1111B株或非脂质包膜病毒猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV),于(30±1)℃水浴条件下作用不同时间后,测定残余病毒滴度,并经传代培养验证辛酸钠灭活病毒的效果。检测灭活处理后人免疫球蛋白的理化及生物学特性,并经SDS-PAGE和双向电泳法分析灭活处理后蛋白的结构。结果辛酸钠能有效灭活人免疫球蛋白中的脂质包膜病毒,目的蛋白的回收率达97%以上,而对无包膜病毒的灭活作用不明显;辛酸钠处理未影响人免疫球蛋白的理化和生物学特性及蛋白的结构。结论辛酸钠对脂质包膜病毒具有较好的灭活效果,可确保人免疫球蛋白生产工艺的安全性。
- 邹莉邹炜彭良俊李策生邢延涛段凯彭焱吴凡方舸
- 关键词：辛酸钠免疫球蛋白类病毒灭活生物活性
- 基于产学研结合的生物制品教学改革与实践被引量：2
- 2023年
- 科研院所普遍存在研究生招生规模小、教师教学投入不够、教育理念不新、应用研究与科研理论脱节等问题。武汉生物制品研究所从确立复合型人才培养模式、搭建产学研结合创新平台、共建导师团队和生物制品课程、加强横向合作拓展实践教学资源、保障研究生培养经费投入及课程教学质量5个方面进行了改革和实践,构建了产学研结合的创新生物制品课程体系,实现科研院所高层次人才培养模式的创新,显著提高了研究生实践能力和研究生培养质量。
- 杜洪桥李新国韩会珍杨桥段凯
- 关键词：产学研教学改革
