杜青
- 作品数:30 被引量:168H指数:8
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- 孕妇感染弓形虫后胎儿生长发育跟踪研究被引量:7
- 1997年
- 本文随访了52例感染弓形虫的孕妇(抗弓形虫的IgG、IgM均为阳性)采取新生儿脐动脉血及胎盘分别测定抗弓形虫抗体及其DNA,两项均为阳性24例,发生率为46.15%,3例畸胎的畸形部位组织均测得弓形虫DNA为阳性。提示孕妇感染弓形虫后能通过胎盘垂直感染胎儿,使胎儿发育受损造成不良妊娠结局。
- 王海琦杜青倪黎陈子庆
- 关键词:畸胎宫内感染弓形体胎儿生长发育
- 携带Egr-1基因调控序列的TK基因的腺病毒载体的构建被引量:5
- 2006年
- 目的:构建以GFP做标志基因的放射敏感基因Egr-1调控单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(herpssimplexvirusthymidinekinase,TK)的腺病毒载体。方法:以PCl-neo-Egr-1-TK(pET)为模板扩增Egr-1,插入到pAdTrack的XbaI和XhoI位点,构建重组质粒pAdTrack/Egr-1;与pET酶切获得TKcDNA相连,构成pAdTrack/Egr-1-TK;用PmeI酶切后与pAdEasy-1混合,应用细菌内同源重组法获得重组表达质粒pAdEgr-1-TK。结果:重组表达质粒pAdEgr-1-TK的酶切鉴定符合预期结果,感染肿瘤细胞可见绿色荧光表达。结论:通过细菌内同源重组成功构建含GFP做标志基因的pAdEgr-1-TK重组表达质粒,为研究Egr-1调控自杀基因及对肿瘤细胞进行灭活打下了基础。
- 刘金龙郭仕英刘训良李朝军杜青郭治源夏建国
- 关键词:腺病毒载体EGR-1
- 人胎垂体细胞单层培养研究被引量:1
- 1996年
- 应用酶消化和机械分散相结合的方法,可获得成活率高、分散好的细胞。在体外培养中,经纯化和5-溴脱氧尿甙(bromodeoxyuridine,BrdU,0.1 mmol/L)处理,有效地抑制了成纤维细胞生长。通过形态学观察和激素测定,表明培养的垂体细胞成活,可保持良好的形态和功能15天以上。
- 王一芳张宁远彭长平陆顺兴丁小健陈华群杜青毕志刚
- 关键词:胎儿垂体细胞细胞培养细胞移植
- 角膜缘上皮细胞体外培养、冻存和复苏的实验研究被引量:7
- 2003年
- 目的 建立兔角膜缘上皮细胞体外培养、冻存和复苏的方法。方法 兔角膜缘上皮细胞组织块接种培养。取第三代细胞进行冻存。于冻存后第2周,3、6个月复苏细胞。用MTT法测细胞生长曲线。结果 兔角膜缘上皮细胞体外生长良好。培养细胞AE1单克隆抗体染色阳性,PAS染色阴性。冻存细胞复苏成功。冻存细胞复苏后生长曲线良好。结论 兔角膜缘上皮细胞可以在体外培养、冻存和复苏。
- 王亚冬袁南荣杜青刘翠平
- 关键词:角膜缘上皮细胞体外培养冻存
- 辐射调控自杀基因的腺病毒载体在胰腺癌细胞中的表达被引量:1
- 2007年
- 早期生长反应基因-1(Egrd)启动子可由电离辐射诱导,使得转导基因的表达可从时间与空间上进行调控,由此驱动单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(TK)在胰腺癌细胞中高效表达,提高杀伤胰腺癌细胞的效率,本研究旨在观察辐射调控下的自杀基因的腺病毒载体在胰腺癌细胞中的表达。
- 刘金龙郭仕英刘训良杜青夏建国李朝军
- 关键词:胰腺癌细胞腺病毒载体自杀基因早期生长反应基因胸苷激酶基因单纯疱疹病毒
- 胃癌中转化生长因子-βRⅡ、胰岛素样生长因子-ⅡR、Bax基因突变与微卫星不稳定性相关性研究被引量:3
- 2004年
- 目的:检测胃癌组织中转化生长因子-βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)、胰岛素样生长因子Ⅱ型受体(IGF-ⅡR)和Bax基因突变与微卫星不稳定性(MSI)发生情况,探讨其相关性以及MSI在胃癌发生发展中可能的作用机制。方法:胃镜下取36例胃癌标本,酚与氯仿法抽提基因组DNA,银染PCR-SSCP方法同时检测目的位点。结果:胃癌组织中TGF-BRⅡ、IGF-ⅡR和Bax基因发生突变分别有7例、6例和6例,MSI发生率达58.3%,3种基因突变均见于MSI阳性的胃癌,尤其是MSI-H型胃癌。结论:MSI可通过引起靶基因突变,特别是部分抑癌基因突变,促进了部分胃癌的发生发展。
- 张道富刘平张小勇黄霞月杜青
- 关键词:基因突变微卫星不稳定性胰岛素样生长因子受体BAX基因
- 由Egr-1调控TK基因灭活胰腺癌细胞的实验研究被引量:3
- 2007年
- 目的:观察对放射敏感的早期生长反应基因-1(early growth response-1,Egr-l)启动子调控单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase,TK)基因是否对胰腺癌细胞的杀伤作用有增敏效应。方法:以细菌内同源重组法构建含TK基因的腺病毒载体pAdEgr-1-TK,转染人胰腺癌细胞株PC-3,60Co-γ射线照射后,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析各不同照射剂量组TK基因的mRNA的表达。加入前药丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV),MTT法检测其对胰腺癌细胞的杀伤作用。结果:经60Co-γ射线照射后,与对照组胰腺癌细胞(0.86±0.11)相比,前药GCV可明显提高对转染pAdEgr-1-TK胰腺癌细胞的杀伤效率(0.08±0.03)(P<0.001)。结论:由Egr-l启动子调控的TK自杀基因在γ射线作用下可以显著提高杀伤胰腺癌细胞的能力。
- 刘金龙钱清刘训良郭治源杜青郭仕英李朝军
- 关键词:胰腺癌Γ射线基因治疗EGR-1启动子
- 乳腺癌肿瘤相关巨噬细胞中HIF-2α/EPAS1表达与血管生成的关系被引量:6
- 2006年
- 目的:研究乳腺癌组织中血管生成的定量分析及与肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)中低氧诱导因子-2α(HIF-2α)表达的相关性,探讨TAMs中HIF-2α表达对肿瘤间质血管生成的作用机制及对肿瘤生物学行为的影响。方法:应用免疫组化SP法检测60例乳腺癌组织中微血管密度(MVD)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、TAMs及TAMs中低氧诱导因子-2α(HIF-2α)的分布,并进行定量和相关性分析。结果:乳腺癌组织中微血管分布于肿瘤生长活跃的间质中。VEGF在正常的乳腺组织及癌组织均有表达,分布弥散。癌组织及癌周明显高于正常组织(P=0·006,P=0·013),以癌间质最高。TAMs在肿瘤组织内形态呈多样化,分布不均,以癌间质最高;HIF-2α在肿瘤细胞及TAMs中均有表达,但在癌组织及癌周TAMs中明显高于正常组织。TAMs中HIF-2α的表达与VEGF及MVD呈显著正相关(r=0·488,P=0·000;r=0·401,P=0·002)。结论:乳腺癌TAMs在肿瘤微环境中可能促进HIF-2α呈过量表达,并与VEGF及MVD显著相关,其表达在肿瘤微环境中具有促进肿瘤血管生成作用,且影响肿瘤的生物学行为。
- 郝汉霞王水刘力嘉范萍杜青张伟民王聪
- 关键词:巨噬细胞内皮生长因子缺氧
- 乳腺癌细胞系中肿瘤干细胞相关亚群初步研究被引量:12
- 2007年
- 目的:检测不同乳腺癌细胞系中肿瘤干细胞相关亚群含量,并探讨使乳腺癌细胞系MCF-7中肿瘤干细胞相关亚群富集的方法。方法:利用流式细胞仪检测3种乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435s中SP细胞(side populationcells)比例及CD44+CD24-/low细胞比例。用Percoll不连续密度梯度法分离MCF-7细胞亚群,利用流式细胞仪筛选出SP细胞富集的亚群。用添加生长因子的无血清培养液培养MCF-7,检测其中CD44+CD24-/low细胞的比例。结果:MCF-7、MDA-MB-435s中SP细胞比例分别为3.61%和2.72%,MDA-MB-231中未检测到SP细胞。3种细胞系中CD44+CD24-/low细胞比例分别为0.87%、0.59%和94.04%。MCF-7经Percoll分选,D亚群SP细胞富集,比例高达25.23%。MCF-7中CD44+CD24-/low细胞比例随着无血清培养时间的增加而增加,3周时达29.35%。结论:SP检测与CD44+CD24-/low细胞检测是目前乳腺癌干细胞检测的两种常用方法,但两者在同一乳腺癌细胞系中的检测结果并不一致,两种方法均有一定的局限性。另外,Percoll分选或无血清培养均能使MCF-7中肿瘤干细胞相关亚群(SP细胞或CD44+CD24-/low细胞)富集。
- 许健王水许立生杜青刘晓安
- 关键词:乳腺癌细胞系肿瘤干细胞SP细胞流式细胞仪
- 辐射调控性TK基因载体在胃癌细胞中的表达被引量:1
- 2007年
- 目的利用放射敏感基因早期生长反应基因1(Egr-l)启动子驱动单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(TK),观察其在胃癌细胞中的表达。方法以细菌内同源重组法构建含TK基因的腺病毒载体pAdEgr-1-TK,转染人胃癌细胞株MGC-803,分别以0、5、7.5、10、15、20Gy剂量γ射线照射,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析,比较TK基因的mRNA表达。结果转染后的胃癌细胞株经射线照射后其TK mRNA的表达较未照射组(56.4±1.46)%有明显提高,以10Gy最为显著(132.3±2.18)%,(P<0.01)。结论经γ射线照射后,射线激活Egr-l启动子可引起TK基因在胃癌细胞中高效表达,为进一步研究胃癌的放化疗提供了依据。
- 刘金龙刘训良郭仕英钱清杜青陈国玉
- 关键词:胃癌Γ射线自杀基因