李雅林
- 作品数：49 被引量：227H指数：8
- 供职机构：泰山医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省教育厅科技计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学生物学更多>>
- 抗绿脓杆菌外毒素A酶标抗体的制备及其应用被引量：3
- 2005年
- 从病死羊体内分离到绿脓杆菌并提取出外毒素A(PEA) ,再以此毒素作为抗原加油佐剂制成乳化抗原免疫家兔 ,获得高免血清并提取免疫球蛋白G(IgG) ;用过碘酸钠法将过氧化物酶标记抗PEA抗体 (IgG) ,制成酶标抗体 ,经检验 ,酶标抗体结合物中的HRP浓度和Ab(IgG)浓度分别是 0 0 6 0 8mg/mL和 0 336mg/mL ;HRP/Ab(IgG)克分子比值为1 72 4 % ;酶 (HRP)结合率是 11 15 %。利用该酶标抗体以ELISA夹心法对羊体内抗PEA抗体含量进行了检测 ,结果证明 ,用酶标抗体ELISA法比用平板凝集实验法检测的抗体效价平均高出二个滴度 ,表明制备的PEA酶标抗体具有灵敏度高。
- 高玲美牛钟相李雅林丁淑燕
- 关键词：绿脓杆菌外毒素A酶标抗体
- 以大黄素为声敏剂介导声动力疗法对小鼠动脉粥样硬化治疗作用的研究被引量：4
- 2018年
- 目的探讨以大黄素为声敏剂介导声动力疗法对小鼠动脉粥样硬化治疗作用。方法高脂饮食诱导Apo E^(-/-)小鼠发生动脉粥样硬化。将50只Apo E^(-/-)小鼠分为不做任何处理的模型对照组、以5-氨基酮戊酸介导的阳性对照组、大黄素高、中、低剂量介导SDT组,每组10只。除模型组外,其余各组自高脂4周起,分别进行相应的声动力治疗,隔天1次,于12周处死小鼠。取心脏,制备切片,通过油红染色检测斑块大小。取主动脉,进行荧光定量PCR检测基质金属蛋白酶TMP-2、TMP-9和TIMP-1,分析对斑块稳定性的影响。同样检测细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-10和TGF-β,分析对炎症的影响。结果大黄素介导声动力疗法能减轻动脉粥样硬化斑块大小;显著增加TIMP-1而降低TMP-2和TMP-9在主动脉的表达。显著降低促炎性细胞因子TNF-α和IFN-γ而增加抗炎性细胞因子IL-10和TGF-β在主动脉局部的表达。结论大黄素介导声动力疗法可能通过降低炎症反应发挥抗动脉粥样硬化作用,该方法对于动脉粥样硬化的治疗具有积极意义。
- 王立民刘有旺王恩波闫兆龙李雅林
- 关键词：大黄素声动力疗法动脉粥样硬化
- pRluc-hKOR-pcDNA3.1真核重组质粒的构建及在HEK293细胞中的表达被引量：5
- 2009年
- 目的:构建与海肾荧光素酶(renilla luciferase,Rluc)融合的人κ型阿片受体(kappa opioid receptor,KOR)的真核表达载体,用于生物发光共振能量转移法检测人KOR与其它受体间的相互作用。方法:以质粒pcD-NA3.1-hKOR为模板,PCR方法扩增人KOR。扩增的人KOR用NotⅠ和XhoⅠ双酶切,同时用这2种酶双酶切质粒pRluc-pcDNA3.1。然后将这2种酶切产物按常规方法连接、转化大肠杆菌Top10。挑取菌落培养,提取质粒,然后进行酶切鉴定,最后进行测序。将测序正确的重组载体用脂质体法转染人胚胎肾(human embryonic kidney293,HEK293)细胞,免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察。结果:扩增出了1条约1.2kb的片段,与预期的人KOR大小相符,质粒酶切结果显示重组质粒pRluc-hKOR-pcDNA3.1被切成2条片段,其中1条为pRluc-pcDNA3.1载体大小,另1条为目的片段大小。经测序鉴定,序列与GenBank(NM_000912)中的序列高度同源。共聚焦显微镜观察显示,阿片受体主要表达在细胞膜上。结论:构建成功了pRluc-hKOR-pcDNA3.1重组真核表达载体,此表达载体可用于检测人KOR与其它受体之间的相互作用。
- 李雅林白波陈京刘有旺刘海青路海
- 关键词：HEK293细胞
- 生物发光共振能量转移技术及其应用被引量：10
- 2009年
- 生物发光共振能量转移(BRET)技术是近10年来出现的一种新的检测蛋白质-蛋白质相互作用的技术.它的最大优势是能在活细胞中实时进行检测,因此能够进行相互作用动力学的研究.本文系统阐述了BRET的原理和方法,综述了BRET技术的最新进展,以及该技术在G蛋白偶联受体(GPCRs)信号转导及药物发现中的应用.
- 李雅林白波陈京
- 关键词：蛋白质-蛋白质相互作用G蛋白偶联受体药物发现
- 鸭瘟的诊断及防制措施研究进展被引量：11
- 2001年
- 李雅林牛钟相
- 关键词：鸭瘟病理学病原学免疫学防制
- 神经生物学教学中加强研究生创新能力的培养(摘要)
- 2009年
- 白波李雅林刘海青宋文刚
- 关键词：神经生物学研究生教学
- 树突状细胞表达的TGF-β1在制备抗动脉粥样硬化药物中的应用
- 本发明公开了一种树突状细胞表达的TGF-β1在制备抗动脉粥样硬化药物中的应用。本发明首先通过cre-lox技术，成功杂交出树突状细胞(DC)不表达TGF-β1的小鼠，通过骨髓移植将这种小鼠的骨髓嵌合进动脉粥样硬化的易感小...
- 李雅林唐华宋文刚刘有旺
- 文献传递
- 基因修饰DC与Hepa1-6肝癌细胞融合瘤苗的抗肿瘤作用机制被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨腺病毒介导白细胞介素 1 8(interleukin1 8,IL 1 8)基因修饰的小鼠树突状细胞 (dendriticcells,DC)与Hepa1 6肝癌细胞融合后的瘤苗 (IL 1 8 DC Hepa)体内诱导的抗肿瘤免疫应答机制 .方法 :应用 4h51 Cr释放法检测NK细胞杀伤活性 .体内阻断试验观察免疫细胞亚群及免疫分子在IL 1 8 DC Hepa瘤苗诱导抗肿瘤免疫应答中的作用 .建立基因缺陷鼠荷瘤模型 ,观察瘤苗免疫治疗作用 .结果 :IL 1 8 DC Hepa瘤苗与DC Hepa瘤苗比较能更有效地诱导NK细胞活性 [(4 2 .5± 4 .7) %vs (1 3.5± 2 .2 ) % ,q =2 0 .8,P <0 .0 1 ].在抗肿瘤免疫应答的诱导过程中 ,必需有CD4 + T细胞[(6 7.8± 6 .1 )mm2 ,q =2 8.3,P <0 .0 1 ]、CD8+T细胞[(5 8.9± 6 .2 )mm2 ,q =2 4 .4 ,P <0 .0 1 ]、NK细胞 [(30 .6±4 .5 )mm2 ,q=1 2 .0 ,P <0 .0 1 ]、B7/CD2 8的共刺激信号途径[(75 .4± 6 .5 )mm2 ,q =31 .6 ,P <0 .0 1 ]和IFN γ[(6 2 .3±6 .8)mm2 ,q =2 5 .9,P <0 .0 1 ]的参与 ;而在其效应阶段 ,则依赖于CD8+ T细胞 [(6 8.9± 4 .5 )mm2 ,q =4 2 .3,P <0 .0 1 ]、NK细胞 [(38.6± 3.3)mm2 ,q =2 2 .7,P <0 .0 1 ]和IFN γ[(74 .4± 5 .8)mm2 ,q =4 5 .8,P <0 .0 1 ]的参与 ,CD4 + T细胞为非必需的 [(4 .2± 1 .9)mm2 。
- 宋文刚曲迅陈宪锐李雅林李松吴聪
- 关键词：白细胞介素18自然杀伤细胞Γ-干扰素
- 以奶山羊为实验动物模型治疗白色念珠菌性乳腺炎的研究被引量：2
- 2008年
- 以健康泌乳奶山羊为实验动物模型,进行了白色念珠菌性乳腺炎的治疗试验。将30头奶山羊分为发病用药组,发病未用药组和健康对照组。给发病用药组和发病未用药组同时乳导管注射1mL的白色念珠菌的菌液,结果在48h后均出现不同程度的炎症反应。并从患羊乳汁中分离到白色念珠菌。给发病用药组用水煎的自拟中药方剂灌胃,5d后发病用药组症状明显减轻或消失,精神状况明显好转。分别于用药前后对30只奶山羊进行颈静脉采血用于血流变学分析和淋巴细胞转化试验,并分别于用药前后对30只奶山羊采集奶样进行乳成分分析,结果发病用药组的各项健康指标均接近或达到正常。但产奶量比健康对照组稍低。而未用药组的各项健康指标仍显著低于正常水平,证明本方剂对白色念珠菌性乳腺炎具有有效的治疗效果,为进一步研究由白色念珠菌引起的奶牛乳腺炎的治疗提供了试验依据。
- 刘有旺刘翠燕刘辉李雅林姜秀华赵宏坤
- 关键词：中药方剂白色念珠菌乳腺炎奶山羊
- pEYFP-hApelin-R重组真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达被引量：2
- 2010年
- 目的构建与增强型黄色荧光蛋白(EYFP)融合的人Apelin-R(Human Apelin receptor,hApelin-R)真核表达载体,用于Apelin-R介导的细胞内信号转导机制研究。方法以质粒pcDNA3.1-hApelin-R为模板,PCR方法扩增人Apelin-R。扩增的Apelin-R产物与质粒pEYFP-C1按常规方法酶切、连接、转化,并经酶切和测序进行鉴定。将重组质粒用脂质体法转染HEK293细胞,Western blot鉴定人Apelin-R的表达。用Apelin-13诱导后,共聚焦显微镜观察受体在细胞内的位移。结果扩增出了一条1143 bp的基因片段,序列与GenBank(NM_005161)相同。在69 kDa处有一蛋白条带,与预期大小相同。人Apelin-R表达在细胞膜上。诱导30 min后,发生受体向胞浆的位移。结论成功构建了pEYFP-hApelin-R重组表达载体,建立了该质粒转染HEK293的细胞模型。可用于Apelin-R介导的细胞内信号转导机制研究,其结果有助于寻找其作为药物的靶点。
- 陈京李雅林路海白波
- 关键词：真核表达载体HEK293细胞
