李正赫
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
- 供职机构：南开大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：天津市科技攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 噬菌体肽库技术筛选α-2b IFN抗原表位与受体结合表位
- 合理设计的小肽可以完全或部分模拟完整蛋白分子的功能，因此肽类激动剂和拮抗剂的研究在基础研究以及临床治疗等领域有着重要的意义。本论文分别以兔抗重组人α-2bIFN多抗及天然表达IFN受体的人羊膜细胞(WISH)作为筛选靶标...
- 李正赫
- 关键词：噬菌体随机肽库抗原表位多克隆抗体
- 文献传递
- 绿色荧光蛋白α2b-干扰素融合蛋白的表达与活性研究被引量：2
- 2005年
- 采用基因重组技术,构建原核表达质粒pET 32a(+)/GFP-α2b-IFN,转化大肠杆菌BL 21,以IPTG诱导融合蛋白的表达并用镍金属螯合层析柱进行纯化.SDS-PAGE及免疫印迹结果显示,46.0 kD的融合蛋白在大肠杆菌中得到了正确的表达,并具有α2b-IFN的抗原活性.受体结合实验表明,该融合蛋白能够与W ISH细胞上的干扰素受体特异性结合,并在激发光下呈亮绿色荧光.采用细胞病变法测定分离纯化的融合蛋白的抗病毒活性,比活力为1.0×107IU/m g.表达的GFP-α2b-IFN融合蛋白具有α2b-IFN的特性与荧光活性,为研究α2b-IFN受体功能以及IFN与细胞相互作用的机理奠定了基础.
- 田旺李正赫杨文博白钢
- 关键词：绿色荧光蛋白融合蛋白原核表达
- 应用噬菌体随机肽库技术研究干扰素-α2b抗原表位被引量：7
- 2005年
- 目的应用噬菌体随机肽库技术,研究干扰素-α2b高抗原性表位。方法利用结合有干扰素-α2b多克隆抗体的免疫磁性微球,对噬菌体随机肽库进行生物淘筛,以ELISA方法鉴定阳性克隆。阳性克隆测序后与干扰素氨基酸序列进行了同源性分析,研究干扰素-α2b分子中高抗原性表位。结果经4轮淘筛后噬菌体克隆的阳性率为57.6%,据随机挑选的12个阳性克隆的同源性分析结果将其分为3组,分别对应干扰素-α2b3个高抗原性表位与预测的结果吻合,其中第2组与干扰素受体结合区AB环接近。结论利用噬菌体随机肽库技术,成功筛选出3个与抗原性预测相符合的干扰素-α2b抗原表位,为研究干扰素分子的作用机理、制备抗特定表位的单克隆抗体以及设计和开发干扰素的小分子模拟肽奠定了基础。
- 田旺李正赫曹学琳杨文博白钢
- 关键词：噬菌体随机肽库免疫磁性微球抗原表位干扰素-Α2BELISA方法阳性克隆
- 绿色荧光蛋白干扰素-α2b融合基因的构建与表达被引量：1
- 2005年
- 李正赫田旺杨文博白钢
- 关键词：干扰素-Α2B绿色荧光蛋白IFN-Α2B酶联免疫吸附法原核表达载体
