李新红
- 作品数:52 被引量:164H指数:7
- 供职机构:第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学历史地理更多>>
- 汉滩病毒84FLi株L片段全长cDNA克隆的构建及鉴定
- 2007年
- 目的:克隆汉滩病毒84FLi株L片段的cDNA。方法:提取病毒总RNA,反转录为cDNA模板,用高保真的Taq酶扩增出含有L片段部分克隆的片段84L1(1-1875)、84L2(1725-3352)、84L3(2921-4961)和84L4(4727-6533),将这4个片段分别与T载体pGEM-T-Easy连接,转化感受态大肠杆菌后获得4个克隆pGEM-L1、pGEM-L2、pGEM-L3和pGEM-L4。利用酶切连接方法获得pGEM-L12和pGEM-L34,2段产物覆盖全长的L片段,并且于2921-3352 nt区域内相互重叠;再利用酶切连接的方法获得了含有L片段全序列的cDNA克隆。结果:获得6个含有L片段部分片段的克隆,进而酶切组装为含有L片段全序列的cDNA克隆。结论:应用分段克隆和逐次拼接法成功构建了84FLi株L片段全序列的cDNA克隆。
- 张野李新红黄长形王平忠姜泓白雪帆
- 关键词:汉坦病毒基因克隆
- 汉滩病毒S基因体外转染Vero-E_6细胞
- 1999年
- 张梦华杨为松黄长形李光玉汪毅李新红白雪帆
- 关键词:汉滩病毒核蛋白基因真核表达载体
- 原核细胞表达的肾综合征出血热病毒核蛋白免疫原性及免疫保护作用的研究被引量:9
- 1996年
- 对原核细胞表达的肾综合征出血热病毒核蛋白的免疫原性及免疫保护作用进行了研究,结果发现表达的核蛋白具有很强的免疫原性,免疫小白鼠血清中抗肾综合征出血热病毒荧光抗体滴度达1:12800;用免疫小鼠脾细胞和血情做被动免疫保护实验,结果显示脾细胞对部分乳鼠肾综合征出血热病毒的致死感染有保护作用,保护率可达38%,而血清不具有免疫保护作用;同时也未观察到核蛋白免疫血清具有促感染乳鼠早死作用。表明核蛋白能诱导细胞免疫保护但不诱导抗体介导的免疫保护,同时也不引起抗体介导的早死,这就为肾综合征出血热病毒核蛋白作为该病毒基因工程疫苗的成分提供了一定的理论基础。
- 黄长形李光玉杨为松杭长寿白雪帆孙永涛张文彬李新红
- 关键词:肾综合征出血热病毒免疫原性
- 中国人群HIV-1B亚型Nef蛋白特异性细胞毒性T细胞反应的研究被引量:1
- 2006年
- 目的探讨中国人群HIV-1B亚型Nef蛋白特异性细胞毒性T细胞(CTL)反应特征及其与病毒载量以及CD4细胞数量间的关系。方法选取33例HIV-1B亚型感染者。用合成的HIV-1B亚型Nef全基因序列肽库作为抗原,ELISPOT方法检测HIV-1B亚型Nef蛋白特异性CTL反应,同时测定病毒载量及CD4细胞数量。结果70%的感染者对Nef产生特异性CTL反应,单一肽段能够被识别的频率不超过40%,应答强度为(1102±2136)SFC(斑点形成细胞数)/106 PBMC。HIV-1B亚型Nef特异性CTL应答的强度和频率之间没有显著的相关性。HIV-1 Neff特异性CTL反应强度与病毒载量间存在显著负相关,与CD4细胞数量间存在显著正相关。结论初步确定了Nef蛋白CTL应答的优势区域。这些区域主要集中在一些高度保守的氨基酸序列。提示HIV-1B亚型Nef特异性CTL应答在疾病进展中对机体具有保护性作用。
- 庄严翟嵩王少扬李新红康文臻于旭Marcus AltfeldBruce Walker孙永涛
- 关键词:人免疫缺陷病毒NEF细胞毒性T淋巴细胞
- 汉滩病毒G1蛋白胞质区ITAM样基序与Syk相互作用的研究
- 目的:研究汉滩病毒(HTNV)G1蛋白胞质区ITAM样基序与Syk的相互作用。方法:首先通过体外激酶共沉淀-免疫印迹分析和突变体分析,获取G1 ITAM样基序在体外可以与Syk相互作用的证据, 然后构建用于研究Syk和G...
- 牟丹蕾王平忠李光玉潘蕾张岩徐哲李新红张野黄长形白雪帆
- 文献传递
- IL-21在不同乙型肝炎病毒感染者外周血CD4^+T细胞中表达的初步研究被引量:12
- 2011年
- 目的:探讨乙肝病毒感染不同临床表现患者外周血CD4+T细胞中IL-21表达的差异及其在发病机制中的作用。方法:分离乙肝病毒感染不同临床表现患者及健康人外周血单个核细胞(PBMC),使用PMA+ionomycin进行刺激,同时每份标本未加PMA+ionomycin刺激做阴性对照,流式细胞术(FCM)检测IL-21的表达情况及其与Th17细胞亚群的关系。结果:PMA+ionomycin刺激能够诱导IL-21的产生,产生IL-21的主要为CD4+T细胞,IL-17A+IL-21+CD4+T细胞几乎检测不到,IL-21+CD4+T细胞比例在急性乙型肝炎组、乙肝病毒携带组中较正常对照组和慢重肝组有所升高,Th17细胞亚群比例在各组中没有统计学差异;除急性乙型肝炎组外,其余各组中IL-21+CD4+T细胞比例与Th17细胞亚群比例均有较好的相关性。结论:IL-21在HBV感染不同临床表现患者外周血CD4+T的表达有一定差异,并且其与Th17细胞亚群有相关性,提示IL-21在HBV感染的发病机制可能发挥一定作用。
- 丁艳荣张野连建奇李新红王临旭黄长形
- 关键词:IL-21HBV感染患者TH17细胞
- 用Gateway技术克隆并表达汉滩病毒G1蛋白ITAM样基序
- 2007年
- 目的:克隆并表达汉滩病毒(HTNV)囊膜糖蛋白(G1)胞质区尾段ITAM样基序及其突变体.方法:采用RT-PCR方法,扩增HTNVG1蛋白ITAM样基序及其中2个保守酪氨酸残基突变基序编码基因,应用Gateway技术将目的基因克隆至pDESTTM15表达载体,在BL21-AI中经L-阿拉伯糖诱导表达,免疫印迹确证融合蛋白的表达.结果:成功地构建了2个含汉滩病毒G1胞质区尾段ITAM样基序编码序列表达载体pDEST-ITAM-L,pDEST-ITAM和1个含保守酪氨酸残基突变的G1ITAM样基序编码序列表达载体pDEST-ITAM-YY-FF(Y615F,Y628F),并在大肠埃希杆菌中得到高效表达,免疫印迹证实目的蛋白与GST融合表达.结论:获得了3种与谷胱甘肽-S-转移酶(GST)融合的G1ITAM样基序及其突变基序的重组蛋白,为进一步探讨HTNVG1蛋白ITAM样基序在HFRS免疫信号传递中的作用奠定了基础.
- 牟丹蕾姜泓王英鹏李光玉潘蕾李新红王临旭张岩黄长形白雪帆
- 关键词:汉坦病毒
- 拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的疗效及肝组织学改变
- 2005年
- 目的:观察拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的临床疗效。方法:随机选择慢性乙型肝炎患者5 0例,给予口服拉米服定10 0 mg/ d,连用1a,动态观察服药0、6、12个月肝功能、HBV- DNA定量、血清肝纤维化指标透明质酸(HA)、层粘蛋白(L N)、型前胶原(P P)和 型胶原( C)的变化,对其中10例治疗前后行肝组织穿刺活检,观察肝脏组织学的改变。结果:与对照组相比,拉米夫定治疗组治疗后AL T、AST水平下降,HBV- DNA定量和4项血清肝纤维化指标均明显降低(P<0 .0 1)。肝细胞坏死、汇管区炎细胞浸润及纤维化明显减轻。结论:拉米夫定治疗慢性乙型肝炎,可以明显降低血清HBV- DNA及转氨酶水平,延缓肝组织纤维化的进展,减轻肝组织的炎症坏死。
- 张岩白雪帆李艳红张伟谢玉梅李羽李新红张颖牟丹蕾
- 关键词:拉米夫定治疗HBV-DNA定量血清HBV-DNA肝组织纤维化肝脏组织学转氨酶水平
- HIV-1调节蛋白和附属蛋白特异性的CTL应答研究
- 全球AIDS流行趋势日益严重,而抗病毒治疗由于费用高、副作用大等原因存在着一定局限性,使得人类不得不寻找新的解决途径。本研究以我国流行的HIV-B和HIV-C亚型为基础,通过ELISPOT方法检测HIV-1B, C亚型调...
- 翟嵩孙永涛康文臻李新红王少扬刘娟庄严李光玉
- 关键词:ELISPOT检测CTL应答免疫特征
- 文献传递
- 一种国产基因芯片用于乙型肝炎病毒P基因突变的检测
- 2005年
- 目的:验证国产基因芯片检测HBV P基因突变的准确性和敏感性。方法:选择14例服用拉米夫定48周时HBV DNA定量检测仍阳性的慢性乙型肝炎病人的血清标本,用HBV基因突变检测基因芯片检测患者血清中HBV DNA聚合酶基因,观察发生YMDD变异的情况。同时用聚合酶链反应(PCR)技术扩增上述血清标本中编码HBV DNA聚合酶的P基因片段并直接测序,以对比检查 P基因发生 YMDD变异的情况。结果:14 例患者血清标本用基因芯片均检出 HBV DNA,9例为野生株,5 例发生 YMDD变异,其中 3 例为 M552I(YIDD)变异, 2 例为 M552V(YVDD)变异,同时均伴有L528M变异。与用PCR扩增产物直接测序的结果完全相同。结论:国产HBV基因突变检测芯片具有特异性强、灵敏性高、快速、简便等优点,可以替代繁琐的DNA序列测定和分析,可作为临床监测HBV DNA变异的常规方法。
- 张岩白雪帆李新红李羽黄长形王平忠陈伟红张颖牟丹蕾李光玉
- 关键词:乙型肝炎病毒基因芯片拉米夫定YMDD变异