李文然
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 供职机构：沈阳农业大学园艺学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省高校创新团队支持计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 苹果高效遗传转化体系建立及转miR156和rSPL9基因的研究
- 随着栽培苹果基因组测序的完成,苹果基因的功能鉴定成为苹果分子生物学研究的重要内容,但是这依赖于高效的遗传转化体系。虽然根癌农杆菌介导的遗传转化在一些苹果基因型上获得成功,但是总体上转化效率偏低。本研究建立以子叶为外植体的...
- 李文然
- 关键词：八棱海棠子叶离体再生农杆菌
- 文献传递
- 八棱海棠无性系的建立被引量：8
- 2013年
- 高效的离体再生是遗传转化成功的基础。以苹果属八棱海棠(Malus micromalus Rehd.)实生种子为试材,建立八棱海棠试管苗无性系,并筛选具有高离体再生能力的无性系,从而为八棱海棠高效遗传转化体系建立奠定基础。从八棱海棠实生种子中剥取成熟胚并接种到SC+0.5mg·L^(-1)BA+0.5mg·L^(-1)GA_3培养基上萌发成苗。选取100个生长健壮单株在MS+0.3mg·L^(-1)BA+0.2 mg·L^(-1)IAA+0.1mg·L^(-1)·GA_3培养基上进行继代培养以建立试管苗无性系。在继代培养的同时,对获得的元性系进行选择,保留增殖系数较高、叶形正常、叶面平展有光泽的无性系。经过连续6次的继代培养,最终筛选出15个八棱海棠无性系。在MS+2.0 mg·L^(-1)TDZ+0.5mg·L^(-1)NAA培养基上比较15个无性系叶片离体再生不定芽能力,综合考虑再生率、平均再生芽数量和再生芽状态3项指标,首先筛选出4个再生能力较强的八棱海棠无性系,然后在MS+6.0mg·L^(-1)BA+0.8 mg·L^(-1)IAA培养基上进一步比较4个无性系的叶片再生不定芽能力。结果表明:八棱海棠无性系BT-9具有极强的叶片离体再生不定芽能力,在附加BA的培养基上,再生率为100%,平均再生芽数为18.4。说明从八棱海棠实生后代中筛选高再生能力无性系的方法是可行的。
- 李文然张志宏代红艳
- 关键词：苹果属八棱海棠实生后代叶片
- 农杆菌介导转化平邑甜茶子叶外植体的研究被引量：3
- 2011年
- 以近轴端子叶为外植体,研究了菌液浓度、菌液浸泡时间、共培养时间及推迟筛选对根癌农杆菌介导的苹果属植物平邑甜茶转化效率的影响,建立了平邑甜茶高效的转化体系。结果表明:较优转化体系是将成熟胚接种在胚萌发培养基上培养,7～10d后剪取近轴端子叶,子叶外植体在OD600=0.5的EHA105菌液中浸泡10min后在再生培养基上共培养5d,然后在附加20mg.L-1Kan和400mg.L-1Cef的再生培养基上选择培养,在此转化体系上平邑甜茶抗性芽再生率达9.0%。对27个Kan抗性株系的叶片进行GUS组织化学染色分析,23个株系呈现出GUS染色阳性反应。本研究为平邑甜茶的基因工程育种奠定了重要基础。
- 代红艳李文然刘霁菡刘月学张志宏
- 关键词：平邑甜茶子叶农杆菌
