朱文华
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:第四军医大学药学系肿瘤生物学国家重点实验室更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 重组B7-H4IgV融合蛋白的表达、纯化及免疫原性鉴定
- 目的以 B7-H4为靶点,研制肿瘤免疫治疗蛋白疫苗.方法分别将人 B7-H4胞外片断 IgV 区基因和鼠 B7-H4胞外片断 IgV 区基因插入 pQE-30原核表达载体,转化大肠杆菌,经 IPTG 诱导表达。 Ni-N...
- 朱文华张英起
- 关键词:免疫治疗
- 文献传递
- 重组人B7-H4IgV融合蛋白的表达、纯化及活性被引量:1
- 2008年
- 目的表达、纯化重组人B7-H4IgV融合蛋白,并检测其活性。方法将人B7-H4胞外片段IgV区基因插入pQE-30原核表达载体,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达。表达产物经Ni2+-NTA柱亲和层析纯化,并进行Westernblot鉴定。用纯化的rhB7-H4IgV蛋白免疫昆明小鼠,经ELISA、流式细胞术测定小鼠抗血清的活性;免疫SP2/0荷瘤小鼠,观察对肿瘤细胞生长的抑制作用。结果表达的rhB7-H4IgV蛋白约占菌体总蛋白的25%,纯化后蛋白纯度为93%,浓度约为0.5mg/ml,与抗His单抗可产生特异性反应条带。免疫昆明小鼠产生的抗血清效价可达1∶10000,可与SP2/0肿瘤细胞结合。rhB7-H4IgV蛋白对SP2/0移植瘤生长具有一定的抑制作用。结论已成功表达并纯化了重组人B7-H4IgV融合蛋白,纯化蛋白可诱发小鼠体内免疫应答,产生的抗体能与表达B7-H4的肿瘤细胞SP2/0结合,rhB7-H4IgV蛋白在一定程度上能抑制SP2/0移植瘤的生长。
- 朱文华姜昌丽张存游彦杰王伟华刘艳张珍冉永刚叶星明李维娜韩苇张英起
- 关键词:原核表达活性肿瘤免疫治疗