曾建涛 作品数:11 被引量:28 H指数:3 供职机构: 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 更多>> 发文基金: 重庆医科大学创新基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
实时荧光定量PCR检测大鼠组织Angptl3表达的标准曲线构建 2009年 目的:采用实时荧光定量PCR(染料法)建立检测SD大鼠组织血管生成素样蛋白3(Angiopoietin-related protein3,Angptl3)表达量的标准曲线。方法:以SD大鼠肝组织总RNA为模板,通过RT-PCR获得目的DNA片段,用T-A克隆方法将其装载到质粒pUCm-T上,经过转化、质粒提取获得标准品,并以此为模板梯度稀释进行Real-time PCR反应,建立该方法的标准曲线。结果:Angptl3标准曲线相关系数为0.9976,相关性较好;斜率为0.8623,扩增效率适中。结论:成功构建了用Real-time PCR方法检测SD大鼠肝组织Angptl3表达量的标准曲线。 王继红 黄家利 程梅 曾建涛 王欣关键词:荧光定量PCR SD大鼠 葡萄糖对L02细胞LXRα与ANGPTL3基因表达的影响 被引量:6 2008年 目的:研究葡萄糖对L02细胞肝X受体(LXRα)与血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)基因表达的影响,探讨LXRα在糖尿病和脂代谢联系中的作用.方法:用5.6,7.0,11.1,28.0和33.0 mmol/L的葡萄糖培养L02细胞,5.6 mmol/L组作为对照组.用胆固醇酶联法测定各组细胞内胆固醇含量,采用RT-PCR方法检测LXRα和ANGPTL3的mRNA表达量.结果:高浓度葡萄糖可促进L02细胞内胆固醇含量上调LXRα和ANGPTL3 mRNA表达,变化差异均有统计学意义(P<0.05).结论:高浓度葡萄糖增加ANGPTL3表达,可能是通过增加细胞内总胆固醇含量而激活LXRα,而LXRα的激活则引起ANGPTL3基因的高表达. 曾建涛 王继红 黄家利 程梅关键词:血管生成素样蛋白3 肝X受体Α 糖尿病 葡萄糖和胆固醇对人肝细胞ANGPTL3基因和蛋白质表达的影响 被引量:2 2008年 目的观察葡萄糖和胆固醇对人肝细胞株(L02)血管生成素样蛋白3(angiopoietin-like pro-tein3,ANGPTL3)表达的影响,探讨其与糖尿病和高胆固醇血症的关系。方法以L02细胞为研究对象,将其分为葡萄糖组(G)和胆固醇组(CH)。分别在葡萄糖浓度为5.6mmol/L(G1)、7.0mmol/L(G2)、11.1mmol/L(G3)、28.0mmol/L(G4)、33.0mmol/L(G5)的培养液和含胆固醇10μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L的培养液中培养。采用RT-PCR方法检测各组细胞ANGPTL3 mRNA表达量,用Western印迹方法检测其蛋白质表达水平。结果G3~G5组葡萄糖可剂量依赖性地增加ANGPTL3的mRNA表达(P<0.05);在蛋白质表达水平,G2~G5组与G1组比较差异均有统计学意义(P<0.05);G1~G5组各组间两两比较,除G4组与G5组呈现表达量虽升高,但差异无统计学意义(P>0.05)外,其它各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。4种胆固醇浓度均可促进L02细胞ANGPTL3的mRNA和蛋白质表达(P<0.05)。结论在一定浓度范围内葡萄糖可剂量依赖性地促进ANGPTL3 mRNA和蛋白质表达;AN-GPTL3的mRNA和蛋白质表达量还受环境胆固醇浓度影响。ANGPTL3的表达可能与糖尿病、高胆固醇血症密切相关。 程梅 王继红 李倩 黄家利 曾建涛关键词:血管生成素样蛋白3 糖尿病 葡萄糖 胆固醇 葡萄糖对人肝细胞血管生成素样蛋白3表达的影响 被引量:9 2008年 目的:观察高浓度葡萄糖对人肝细胞株(L02)及胰岛素抵抗细胞模型(IR-L02)的血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)表达的影响,探讨ANGPTL3与糖尿病(DM)并发高脂血症的关系,在细胞水平分析DM并发高脂血症的分子机制.方法:以L02为研究对象,并建立胰岛素抵抗模型(IR-L02).L02和IR-L02两组细胞分别在含5.6,7.0,11.1,28.0和33.0mmol/L葡萄糖的培养液中培养,5.6mmol/L组作为对照组.用RT-PCR方法检测ANGPTL3的mRNA表达量,并用WesternBlot方法检测ANGPTL3蛋白质表达水平,分析ANGPTL3与DM并发高脂血症的关系.结果:高浓度葡萄糖可促进L02和IR-L02两组细胞ANGPTL3的mRNA和蛋白质表达,并呈一定的量效关系,变化差异均有统计学意义(P<0.0001);IR-L02细胞对葡萄糖的刺激尤为敏感(P<0.0001).结论:高浓度葡萄糖可上调ANGPTL3的基因和蛋白质表达,其在DM并发高脂血症中可能起重要作用. 李倩 王继红 程梅 王欣 曾建涛关键词:血管生成素样蛋白3 糖尿病 高脂血症 葡萄糖 胰岛素抗药性 Angptl3基因在大鼠高脂模型中组织表达及其与血脂的关系 被引量:3 2008年 目的探讨Angptl3基因在大鼠高脂模型中各组织表达及其与血脂的关系。方法将60只清洁型SD大鼠随机分为4组:正常对照组、高脂血症组、糖尿病并发高脂血症组、IgA肾病并发高脂血症组。采用定量PCR(SYBR G reenⅠ)方法,检测以上4组大鼠脑、肺、心、胃、肝、肾、脂肪等7种组织中Angptl3 mRNA的表达。结果Angptl3在4组大鼠的肝、肾组织中均有表达,其余5种组织中均未检测出有表达。其中肝表达量占总量的90%左右;并且随着表达总量的增加,肝表达量增加幅度较大。结论Angptl3在成年雄性SD大鼠肝、肾组织中特异表达,且此特异性不随血脂水平的改变而改变。 王欣 王继红 黄家利 李倩 曾建涛 商文静关键词:高脂血症 定量PCR 动物模型 高脂、胰岛素抵抗合并高脂高糖对大鼠肝脏Angptl3和LPL基因mR-NA转录的影响 被引量:1 2009年 目的探讨高脂、胰岛素抵抗合并高脂高糖对大鼠肝脏血管生成素样蛋白3(Angptl3)和脂蛋白脂肪酶(LPL)基因mRNA转录的影响。方法建立高脂(HL)、胰岛素抵抗合并高脂高糖(IR-HLG)大鼠模型,采用自动分析仪检测模型大鼠空腹血糖(BG)、总三酰甘油(TG)和胆固醇(TC)含量,采用Realtime PCR定量检测各组大鼠肝组织Angptl3和LPL基因的mRNA转录水平。结果模型组大鼠血清TG、TC含量及肝脏Angptl3和LPL基因mRNA转录水平均较对照组明显升高;IR-HLG组大鼠的BG水平和Angptl3水平较对照组和HL组均明显升高,LPL水平较HL组明显下降。结论随血脂的增高,Angptl3和LPL的表达均增强;在高糖、胰岛素抵抗状态下,Angptl3的表达增高,而LPL的表达则部分受到抑制。 黄家利 王继红 程梅 王欣 曾建涛关键词:血管生成素样蛋白3 脂蛋白脂肪酶 高脂 人肝细胞系L02胰岛素抵抗细胞模型的建立及鉴定 被引量:11 2007年 [目的]采用高浓度胰岛素体外诱导培养法建立人肝细胞IR模型,为研究IR的发生发展机制及筛选改善IR的药物提供一种简便可靠的IR细胞模型。[方法]以人肝细胞系L02为研究对象,在含5×10-7 mol/L人胰岛素的培养液培养16 h,未用高浓度胰岛素培养者为对照组。之后两组分别加入0、1、10、50、100、200 ng/ml人胰岛素。采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD)法检测培养液中残存葡萄糖含量。[结果]在各浓度的胰岛素刺激下,高胰岛素诱导组培养液中残存葡萄糖含量均显著高于对照细胞(P﹤0.01)。[结论]用含5×10-7 mol/L胰岛素的培养液培养16 h的L02细胞产生胰岛素抵抗,作为IR肝细胞模型可广泛用于胰岛素抵抗的研究。 李倩 王继红 王欣 曾建涛关键词:L02 胰岛素抵抗 细胞模型 葡萄糖对L02细胞ANGPTL3表达影响机制的研究 目的:观察不同葡萄糖浓度对人肝细胞(L02)内胆固醇合成及HMGCR、LXR α和ANGPTL3基因表达的影响;并在各组加入辛伐他汀干预,进一步说明上述影响作用,研究它们对ANGPTL3基因表达影响的机制,及ANGPTL... 曾建涛关键词:葡萄糖 L02肝细胞 代谢综合征 辛伐他汀 胆固醇 文献传递 血管生成素样蛋白3在大鼠体内组织表达的探讨 被引量:2 2007年 [目的]观察Angptl3在SD大鼠高脂模型中的组织分布与表达水平的差异,探讨其与脂类代谢的关系。[方法]采用高脂饲料诱导高脂动物模型,采用Realtime PCR方法检测脑、肺、心、胃、肝、肾、脂肪等7种组织中Angptl3、LPL的表达水平,分析Angptl3基因表达水平与脂类代谢的关系。[结果]仅在肝、肾组织中检测到Angptl3,其余各组织未见其表达;Angptl3表达水平与血脂水平存在密切关系,随血脂水平升高,其表达增强;LPL在体内各组织均有表达,且表达水平随血脂水平的升高而增强。[结论]在SD大鼠体内Angptl3主要在肝、肾组织中表达,脑、肺、心、胃、脂肪组织表达降低;Angptl3在大鼠体内的组织表达特异性并不随血脂水平的改变而改变,但Angptl3、LPL表达水平均随血脂升高而增强,推测Angptl3可能参与了LPL的表达调控。 王欣 王继红 李倩 曾建涛关键词:高脂血症 动物模型 罗格列酮对胰岛素抵抗人肝细胞Angpil3和LXRα基因表达的影响 2009年 研究罗格列酮对胰岛素抵抗人肝L02细胞Angptl3基因及与脂代谢相关的LXRα基因的影响。采用高胰岛素诱导法建立胰岛素抵抗模型(IR-L02),分别加入含有和不含罗格列酮的不同葡萄糖浓度培养液培养,用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD法)检测培养液残存葡萄糖量,并用RT-PCR方法检测基因Angptl3、LXRα mRNA表达水平的变化。结果表明相同葡萄糖浓度下罗格列酮作用组(IR-R组)的培养液残存葡萄糖量比无罗格列酮作用组(IR组)减少;IR-R组的Angptl3、LXRα mRNA表达水平较IR组显著升高(P<0.05)。 黄家利 王继红 程梅 曾建涛关键词:LXRΑ