晁玮霞 作品数:19 被引量:45 H指数:4 供职机构: 河南大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部科学技术研究重点项目 河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
植物凝集素串联法富集纯化血清多个亚糖蛋白质组 被引量:3 2011年 蛋白质糖基化修饰是哺乳动物中最为常见的一种翻译后修饰,蛋白质的寡糖侧链具有重要的生物学意义,如蛋白质分子间及细胞间相互作用、识别、肿瘤侵袭与转移等.本实验应用寡甘露糖型亲合层析柱、唾液酸型层析柱和O-连接糖蛋白亲合层析柱从血清中序列性提取寡甘露糖型、唾液酸型的N-连接糖蛋白及O-连接的糖蛋白,一维和二维电泳图谱显示血清各亚糖蛋白组图谱差异,并对富集的唾液酸型糖蛋白质组的二维电泳图谱中12个显著的差异蛋白质点进行质谱检测,鉴定出的14个蛋白均为N-连接糖蛋白.植物凝集素序列性提取血清各亚糖蛋白质组,显著减小了血清蛋白质组的复杂性和血清蛋白浓度波动范围,提高了质谱鉴定血清中对疾病诊断和疗效监测具有重要意义的生物标志物的灵敏性. 齐义军 王攀 牛保华 侯艳芳 晁玮霞 WARD Douglas JOHSON Philip J 马远方关键词:血清蛋白质组学 植物凝集素 形态学实验教学体系的改革及实践 被引量:14 2011年 随着医学教育的发展和教育改革的不断深化,"建特色课程,育创新人才"是课程建设的主要目标。发挥学生的主观能动性,培养和提高实践能力和创新意识,从而提高教学质量就成为实验教学及加强素质教育的关键。为此,开设一门形态学实验课程,设计涵盖多学科的形态学基础性实验、综合性实验和创新性实验,使学生学到综合性、系统性的人体形态学知识。形态学实验课程的开设为培养学生分析问题、解决问题的能力,建立医学科学思维方式,开发创造能力搭建了一个平台。 齐义军 牛保华 李涛 席艳 吴素霞 晁玮霞关键词:形态学实验 实验教学 应用蛋白质组技术筛选人食管癌细胞系9706顺铂耐药相关蛋白 2012年 目的应用蛋白质组技术筛选人食管癌(esophageal cancer,EC)顺铂耐药相关蛋白。方法采用顺铂(cis-diamminedichloroplatinum,CDDP)浓度递增法、间歇作用方式建立EC9706顺铂耐药细胞系(EC9706/CDDP),应用细胞培养稳定同位素标记(cell culture and stable isotope labeling,SILAC)、质谱(mass spectrometry,MS)筛选和鉴定食管癌耐药相关的蛋白。结果共鉴定出耐药相关的74种差异表达蛋白,其中53种在EC9706/CDDP中表达显著升高和21种表达明显降低。结论筛选的EC9706/CDDP耐药相关蛋白对进一步阐明肿瘤多药耐药分子机制具有重要理论意义和应用价值,并为逆转多药耐药表型的药物设计提供了新的分子靶点。 晁玮霞 刘琳 卜旺雨 张娟 侯艳芳 高小飞 牛保华 马远方 齐义军关键词:食管癌 顺铂 多药耐药 串联质谱 支持向量机预测食管鳞癌患者术后生存期 被引量:1 2015年 目的应用支持向量机(support vector machine,SVM)建立食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)术后生存期预测模型并评估该模型判断ESCC生存期的效能。方法随访168例接受根治性手术治疗的ESCC患者,分析ESCC临床病理特征和14-3-3σ、热休克蛋白gp96、巨噬细胞移动抑制因子(migration inhibitory factor,MIF)等3个蛋白的表达规律与ESCC生存期的相关性;应用Matlab软件进行SVM运算,对训练组128例ESCC患者建立最优预后分类模型ESCC-SVM,并用测试组40例患者验证分类效率,ROC曲线分析ESCC-SVM及其他预后相关因子对高低死亡风险ESCC的识别能力。结果 ESCC-SVM由性别、T分期、组织学分级、淋巴结转移、TNM分期、14-3-3σ和gp96等7个最优属性组成,该模型区分训练组和测试组ESCC五年整体生存率的最大AUC分别为0.96、0.86、准确率分别为97.7%、90.0%,明显优于目前临床应用的TNM分期(准确率分别为62.5%、67.5%)及其他各临床病理属性。Cox多因素比例风险回归模型分析发现年龄、T分期、gp96和ESCC-SVM是影响ESCC术后生存期的独立因素。ESCC-SVM与性别、T分期、组织学分级、淋巴结转移、TNM分期和14-3-3σ均显著相关。结论本研究建立的ESCC-SVM为预后评估、临床治疗方案选择及个体化治疗提供了理论依据。 张天 晁玮霞 赵云岗 王明 王广超 贺红梅 刘瑞敏 魏书堂 韩大正 朱晗 马瑾 谷娟 马远方 齐义军关键词:食管鳞状细胞癌 支持向量机 热休克蛋白GP96 巨噬细胞移动抑制因子 TGF-β通过TAGLN2诱导食管鳞癌EC9706细胞迁移和浸润 被引量:1 2016年 上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)使上皮细胞极性和细胞间紧密连接消失,并赋予肿瘤细胞侵袭和转移的能力。本研究应用携带TAGLN2特异性沉默序列或无关序列的慢病毒载体感染食管鳞癌细胞系EC9706,建立EC9706 sh TAGLN2及阴性对照EC9706 sh Control亚细胞系。以5~80 ng/m L不同浓度或40 ng/m L TGF-β刺激EC9706 sh TAGLN2和EC9706sh Control细胞,发现与EC9706 sh Control细胞比较,EC9706 sh TAGLN2细胞中TAGLN2的表达无明显增加,同时TGF-β诱导的间质标志物如N-cadherin、Vimentin等蛋白质表达无明显升高;上皮标志物如E-cadherin表达无明显降低;TAGLN2的沉默不仅阻断了TGF-β诱导EC9706 sh TAGLN2细胞体外迁移和侵袭能力的增加,并抑制TGF-β信号通路下游分子p-Smad2/3的激活。本研究结果提示,TGF-β可能通过TAGLN2促进食管鳞癌的恶性演进,TAGLN2是潜在的食管鳞癌治疗的分子靶点之一。 谷娟 赵云岗 晁玮霞 韩大正 杨文义 刘瑞敏 贾彩云 郭二涛 崔纪丽 马远方 齐义军关键词:食管鳞状细胞癌 TGF-Β 上皮间质转化 SELDI-TOF/MS分析原发性肝癌TACE治疗前后血清蛋白质差异表达谱 被引量:3 2014年 目的分析原发性肝癌患者经导管肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗后血清蛋白质4a.es~图谱的变化。方法应用SELDI—TOF/MS技术和IMAC30蛋白质芯片采集50例肝癌患者TACE治疗前后肝癌患者的血清蛋白质质谱,Biomarkerwizard软件分析差异表达蛋白质峰,应用支持向量机(supportvectormachine,SVM)建立TACE治疗前后分类模型,KOC评价各差异蛋白质峰和SVM分类模型的分类效率。结果在0~20000m/z质荷比范围内,共采集到199个蛋白质峰,BiomarkerWizard软件鉴定出13个差异表达蛋白质峰(P〈0.05),包括TACE治疗24h后7个高表达蛋白质峰和6个低表达蛋白质峰。2883、11535和11687等3个蛋白质峰区分TACE治疗前后HCC的敏感性和特异性分别为80%、76%、62%和80%、60%、62%,AUC为0.8;SVM分类模型区分TACE治疗前后HCC的敏感性和特异性均为100%。结论应用SELDI—TOF/MS技术可分析TACE治疗后血清差异表达蛋白质谱,SVM分类模型能有效区分TACE治疗前后HCC。 齐义军 马瑾 张天 王明 晁玮霞 朱晗 刘瑞敏 马远方 Philip Johnson关键词:原发性肝癌 SELDI-TOF 蛋白质芯片 经导管肝动脉化疗栓塞 14-3-3σ蛋白与宫颈癌的关系 被引量:1 2011年 目的:探讨14-3-3σ蛋白与宫颈癌临床病理特征之间的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测14-3-3σ蛋白在正常宫颈粘膜组织、宫颈黏膜上皮内瘤变及宫颈癌中的表达。结果:14-3-3σ蛋白在正常宫颈黏膜组织、宫颈黏膜上皮内瘤变与宫颈癌中的阳性表达率分别为100%(10/10), 70%(42/60)和43.10%(25/58),在宫颈癌变过程中,14-3-3σ蛋白的表达率逐渐下降。14-3-3σ在高分化癌中的表达高于在中、低分化癌中的表达;14-3-3σ蛋白的表达与肿瘤的病理类型、患者的年龄因素无相关性。结论:14-3-3σ蛋白表达可能与宫颈癌发生、发展及组织分化程度相关,可能成为宫颈癌早期诊断的分子指标,同时也可能成为宫颈癌生物预防和疗效评价的新靶点。 侯艳芳 晁玮霞 齐义军 王攀 卜旺雨 牛保华关键词:上皮内瘤变 宫颈癌 免疫组织化学 二维电泳和质谱技术鉴定肝细胞癌相关N-连接糖蛋白 被引量:2 2015年 目的鉴定与肝细胞癌(HCC)发生发展相关的差异表达N-连接糖蛋白。方法采用刀豆凝集素A(Con A)、晶状体凝集素(LCH)、雪花凝集素(GNA)等3种植物凝集素组成的亲和层析柱,分别从肝永生化细胞系L02和HCC细胞系Huh7、PLC5、SNU449中纯化N-连接糖蛋白、二维电泳分析差异表达的蛋白质斑点,质谱、生物信息学等技术鉴定差异表达蛋白,Western blotting验证了转录调控肿瘤蛋白(TCTP)、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)和膜联蛋白A2(annexin A2)在肝永生化及HCC细胞和HCC及癌旁组织中的表达规律,体外侵袭实验检测TCTP沉默后对SNU449的侵袭力影响。结果质谱、生物信息学等技术共鉴定出42个差异表达的蛋白质分子/异质体(HCC细胞中高、低表达的蛋白/异质体分别为14个、28个),代表32个蛋白质分子,其中的22个蛋白含有至少1个N糖基化位点(Net NGlyc 1.0预测)。这些差异表达的蛋白主要参与氧化还原内稳态维系、碳水化合物/能量代谢、糖酵解、抗凋亡等生物学过程。Western blotting检测表明,TCTP、Ep CAM和annexin A2在6个肝癌细胞系PLC5、Hep G2、SNU449、Huh7、HCC7721和SNU473及肝癌组织中表达显著升高,siRNA介导的TCTP沉默明显抑制了HCC细胞系SNU449的体外侵袭能力。结论 TCTP、Ep CAM和annexin可能参与了HCC发生发展过程,TCTP可能成为HCC靶向治疗的分子靶点之一。 王明丽 韩大正 晁玮霞 刘瑞敏 赵云岗 张天 齐义军关键词:肝细胞癌 植物凝集素 质谱 二维电泳 一种人食管癌EC9706细胞多药耐药细胞株的建立方法及其应用 本发明提出了一种人食管癌EC9706细胞多药耐药细胞株的建立方法及其应用,以人食管癌EC9706细胞系为亲本细胞,采用紫杉醇模拟体内化疗过程,逐步提高药物浓度、间歇性反复冲击筛选出耐紫杉醇细胞株,测定该细胞株对紫杉醇、阿... 刘瑞敏 齐义军 王明丽 晁玮霞 孙丹妮二维电泳和质谱技术鉴定肝癌血清差异表达的N-连接糖蛋白 被引量:5 2013年 缺乏有效的早期诊断方法是导致肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)预后极差的主要原因之一.蛋白质异常糖基化与恶性肿瘤细胞侵袭、转移等生物学过程关系密切,人体内至少有50%的蛋白质发生了糖基化修饰.本实验采用IgY12去除血清高丰度蛋白、多植物凝集素亲和层析技术分别从20例肝癌和年龄、性别匹配的20例非癌慢性肝病患者血清中纯化N-连接糖蛋白、二维电泳分析差异表达的蛋白质斑点,质谱检测、生物信息学等技术鉴定了18个差异表达的糖蛋白和/或其异质体(12种高表达和6种低表达).ExPASy数据库比对结果表明,本实验鉴定的糖蛋白质分子含有至少1个已报道的N-糖基化位点.这些差异表达的糖蛋白属于急性期反应蛋白,分别具有蛋白酶抑制、生物转运、凝血和纤溶等功能,表明肝癌的发生发展过程中机体产生的急性期反应物可能是潜在的肝癌血清标志物. 王明 黄志红 雷鹏 王明丽 晁玮霞 马瑾 卜旺雨 张娟 牛保华 马远方 齐义军关键词:二维电泳 质谱 血清生物标志物