文圣梅
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 脑红蛋白重组腺病毒表达载体的构建与鉴定
- 2006年
- 目的:为进一步研究脑红蛋白(NGB)的生理功能并为基因治疗缺血性脑损伤提供有效的表达载体,应用细菌内同源重组方法分别构建含NGB及绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组腺病毒表达载体,并对其进行鉴定。方法:用电转方法将腺病毒基因组质粒pAdEasy-1导入B J5183细菌,制备B J5183-pAdEasy-1细菌,再以后者作为电感受态细菌,与线性化质粒pShuttle-CMV-NGB进行同源重组,获得重组腺病毒质粒pAdEasy-NGB,转染293细胞,制备含脑红蛋白基因的重组腺病毒。结果:通过PCR、序列测定和W estern印迹杂交鉴定,确认该重组腺病毒表达载体可正确表达脑红蛋白。结论:成功地构建了表达NGB基因的重组腺病毒载体,为深入开展脑红蛋白的功能研究以及用于缺血性脑损伤疾病的基因治疗奠定了基础。
- 刘铖高艳秦树桐文圣梅王立生张成岗
- 关键词：神经系统疾病脑红蛋白腺病毒科腺病毒载体基因表达基因疗法
- 胞红蛋白(CGB)与金属硫蛋白(MT2)相互作用的研究被引量：1
- 2007年
- 目的:胞红蛋白(CGB)是新近发现的在脊椎动物多种组织中广泛表达的携氧珠蛋白,在肝纤维化过程及缺氧/缺血条件下表达增高,可提高细胞抗氧化损伤能力,但其在细胞保护中的作用机制仍不清楚。由于蛋白质功能的发挥在很大程度上是通过蛋白质-蛋白质相互作用实现的,本研究拟通过研究与功能已知蛋白之间的相互作用,阐明CGB发挥保护作用的分子机制。方法:采用酵母双杂交技术筛选人胎脑cDNA文库,获得与CGB相互作用的阳性克隆并测序、BLAST比对鉴定获得的cDNA序列;随后采用酵母回转实验、免疫荧光共定位及免疫共沉淀实验对蛋白之间的相互作用进行验证。结果:筛选获得的阳性克隆cDNA序列与人金属硫蛋白Ⅱ(MT2)存在100%序列相似性,并且MT2与CGB在酵母和COS7细胞中均存在相互作用。结论:由于MT2为生物体内广泛存在的抗氧化和清除自由基的应激相关蛋白,CGB可能与MT2一起协同调节细胞氧化还原反应能力,进而从抗氧化损伤的角度发挥细胞保护作用。
- 文圣梅李谋高艳吴祖泽张成岗
- 关键词：胞红蛋白酵母菌双杂交系统技术
- 脑红蛋白与胞红蛋白抗氧化损伤的分子机制研究
- 本课题以新发现的分别与脑红蛋白、胞红蛋白的相互作用蛋白为切入点，深入探讨新发现携氧珠蛋白的缺氧保护功能机制。课题分两部分进行：
第一部分中集中于酵母双杂交筛选到的与脑红蛋白相互作用蛋白—谷氨酰脯氨酰tRNA合成...
- 文圣梅
- 关键词：脑红蛋白胞红蛋白抗氧化损伤神经保护
- 文献传递
- 谷氨酰-脯氨酰-tRNA合成酶(EPRS)结构与功能的新认识被引量：2
- 2006年
- 氨基酰-tRNA合成酶(ARS)催化特异的氨基酸结合到对应tRNA上,确保mRNA高精度地翻译为蛋白质。最近陆续报道ARS同时也在细胞基本生命活动如RNA运输、转录、翻译、免疫反应以及血管生成中充当重要的调节分子和活性成分。目前报道谷氨酰-脯氨酰-tRNA合成酶(EPRS)在具有催化谷氨酸和脯氨酸分别结合到不同tRNA上的功能之外,还可通过基因选择性沉默机制阻遏血浆铜蓝蛋白的表达,从而终止炎症反应等。本文就该酶结构与功能的研究新进展进行综述,并对其进行分子进化分析。
- 文圣梅吴祖泽张成岗
- 关键词：氨基酰-TRNA合成酶
