张磊
- 作品数:6 被引量:10H指数:2
- 供职机构:成都医学院更多>>
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- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- Ⅰ型单纯疱疹病毒UL12基因在大肠杆菌BL21和Rosetta菌中的差异表达被引量:5
- 2012年
- 目的构建Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)的UL12基因原核重组表达质粒pET32a-UL12,比较重组表达质粒pET32a-UL12在E.coli BL21和E.coli Rosetta表达产量与生物学活性。方法使用PCR的方法扩增出HSV-1的UL12基因,克隆至原核表达质粒pET32a(+),构建出重组质粒pET32a-UL12,分别转化E.coli BL21和E.coli Rosetta菌。经SDS-PAGE鉴定分析目的蛋白的表达差异,并比较在两种菌中目的蛋白的活性。结果重组质粒pET32a-UL12在E.coli BL21和E.coliRosetta的包涵体中均表达出了碱性核酸酶融合蛋白,E.coli Rosetta中表达的碱性核酸酶融合蛋白表达量较大,而E.coliBL21中表达的碱性核酸酶活性更高。结论成功构建了表达出了具有较高活性的HSV-1碱性核酸酶融合蛋白,为进一步研究抗HSV-1药物奠定了基础。
- 陈恬李学东代富英张磊赖升凤余小平曹康
- 关键词:克隆原核表达生物学活性
- 一种用于扩增HSV-1碱性核酸酶基因的试剂盒和表达HSV-1碱性核酸酶的方法
- 本发明提供了一种用于扩增单纯疱疹病毒I型碱性核酸酶基因片段UL12的试剂盒,包括核苷酸序列如SEQ ID NO:1~2所示的引物对和其他相关试剂。本发明还提供一种利用前述试剂盒获得具有生物活性的HSV-1碱性核酸酶的方法...
- 陈恬张磊曹康郭洪秀代富英
- 文献传递
- 一种用于扩增HSV-1碱性核酸酶基因的试剂盒和表达HSV-1碱性核酸酶的方法
- 本发明提供了一种用于扩增单纯疱疹病毒I型碱性核酸酶基因片段UL12的试剂盒,包括核苷酸序列如SEQ ID NO:1~2所示的引物对和其他相关试剂。本发明还提供一种使用前述试剂盒制备的HSV-1碱性核酸酶的方法。本发明以基...
- 陈恬张磊曹康郭洪秀代富英
- 文献传递
- 结核分枝杆菌异柠檬酸裂解酶基因的克隆表达及鉴定
- 2010年
- 最近,Okada M等人报道,全世界每年因结核病死亡人数超过200万,新发病例超过880万。据WHO统计,全球80%的肺结核病例发生在中国、菲律宾等22个西太平洋国家。中国是世界第二大结核最近,OkadaM等人111报道,全世界每年因结核病死亡人数超过200万,新发病例超过880万。
- 陈恬王伦安李晋川曹康余小平陈洪宇李学东张磊郭洪秀
- 关键词:结核分枝杆菌原核表达
- HSV-1 UL-12基因的克隆、表达及产物复性被引量:1
- 2011年
- 目的:克隆及表达单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)UL12基因,对其表达产物HSV-1碱性核酸酶(AN)进行复性,为建立抗HSV-1药物的分子筛选模型奠定了基础,对于寻找抗病毒药物具有重要意义。方法:从HSV-1感染的Vero细胞中提取HSV-1基因组DNA,通过PCR克隆出UL12基因并对其测序;然后将HSV-1 UL12基因先克隆至pMD19-T载体,再亚克隆到pET32a表达载体上,并将重组载体转化到E.coli Rosetta菌中进行表达;最后用梯度盐酸胍对表达出的包涵体进行复性。结果:成功构建了pET32a-UL12重组载体,经序列比对,与GenBank上公布的HSV-1国际标准毒株17株的UL12基因序列的同源性达到了99.2%。在E.coli Rosetta菌中以包涵体的形式表达,经复性得到有活性的HSV-1碱性核酸酶(AN)。AN同时具有核酸外切酶和核酸内切酶的活性,与核酸作用60min时酶活性最高。结论:重组载体pET32a-UL12经表达、复性可获得有活性的HSV-1 AN。
- 陈恬郭洪秀陈玮张磊祝捷余小平殷建华
- 关键词:HSV-1克隆复性
- SNYTAX积分对冠心病治疗指导作用的研究现状被引量:5
- 2017年
- 冠心病的治疗大致分为三类:一是单纯药物治疗;二为经皮冠状动脉介入术;三是冠状动脉旁路移植术。后两种即冠状动脉血运重建,目前是治疗冠心病的有效手段。对于单纯左主干及复杂血管病变的冠心病患者,如何选择合适的血运重建策略一直存在争议,SNYTAX积分的出现则为策略选择提供了一个有理可循、有据可依的方向。现就SNYTAX积分对冠心病治疗指导的研究现状及其改良做一综述。
- 黄吟雪张磊
- 关键词:冠心病血运重建