张宁
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:苏州大学医学部免疫学系更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 干性基因在儿童急性B淋巴细胞白血病中的表达及临床意义
- 2014年
- 目的 本研究旨在探讨初诊急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿骨髓中干性基因的表达及其与临床预后指标的关系.方法 应用Real-time PCR检测32例初诊B-ALL患儿(B-ALL组)和5例骨髓象正常儿童(对照组)的骨髓单个核细胞上干性基因(Oct4、JAG1、Nanog、Sox2、Fgf4等)的表达,比较B-ALL组和对照组的差异,在此基础上结合临床资料(如性别、年龄、外周血白细胞、危险度分层等)进行相关性分析.结果 B-ALL组儿童的相关于性基因Nanog、JAG1、CD133-2、CD44和Runx1的表达水平较对照组明显增高,分别为对照组的2.74±1.00、4.31 ±2.41、10.23±3.21、4.66±1.73和7.44±3.01倍(P<0.01),Oct4、Sox2、D LL1、Fgf4和COX-2表达水平较对照组明显降低,分别为对照组的15.00%±0.06、13.00%±0.08、18.12%±0.11、4.73%±0.03和9.59%±0.00(P <0.01);初诊B-ALL组干性基因表达与其性别、年龄、外周血白细胞计数、骨髓幼稚细胞比例、FAB分型、细胞遗传学异常、融合基因表达等均无相关性,其中JAG1基因表达与B-ALL危险度分层有明显相关性(r=0.755,P<0.01),其余基因表达与危险度分层无明显相关.结论 与正常儿童的骨髓相比较,初诊B-ALL患儿骨髓中干性基因存在异常表达(上调或下调),其中JAG1基因表达与B-ALL的临床危险度分层显著相关,提示JAG1基因可能是B-ALL的危险因子,可能对判断患儿预后及指导临床治疗有潜在价值.
- 赵娟许云云虞培娟张宁安竞男庞丽赵文理张学光
- 关键词:危险度分层
- 人B7-H4-Fc融合蛋白的表达及其应用研究被引量:2
- 2013年
- B7-H4分子是近年发现的一个新的协同刺激分子,它通过抑制T细胞的增殖、细胞因子的分泌以及细胞周期的进行,进而下调T细胞的免疫功能。为获取人B7.H4IgG融合蛋白,研究其对T细胞的调节效应,采用PCR法分别从pEGZ—Term/PD—L1-Fc和含人B7.H4基因序列的重组质粒中扩增出人IgGFc恒定区基因及人B7+H4基因的胞外段序列,将两者插入逆转录病毒载体pEGZ—Term中,构建pEGZ.Term/B7.H4一Fc逆转录病毒重组载体,用脂质体法与两个辅助病毒载体共转染293T包装细胞,用含病毒颗粒的培养上清反复感染CHO细胞。用Zeocin筛选能稳定分泌人B7-H4-Fc融合蛋白的基因转染细胞并亚克隆之,经大量培养增殖,裂解细胞后收集裂解上清用ProteinG柱纯化,再经Westernblot鉴定。以体外T细胞活化体系观察其对T细胞活化的抑制作用。结果表明,成功地构建了表达人B7-H4-Fc融合蛋门的重组逆转录病毒载体;获得的CHO/B7-H4-Fc细胞能稳定分泌人B7-H4-Fc融合蛋门,该融合蛋白可以有效地抑制T细胞的活化。
- 邵联波侯爵张宁顾宗江
- 关键词:T细胞活化
- 鼠抗人B7-H4单克隆抗体的制备及功能研究
- 2015年
- 目的:制备鼠抗人B7-H4单克隆抗体(mAb),并对其生物学功能进行初步研究。方法以表达B7-H4分子的转基因细胞L929/B7-H4为免疫原,免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术,融合小鼠骨髓瘤细胞与脾脏细胞,用流式细胞术筛选阳性克隆,获得稳定分泌抗B7-H4 mAb的杂交瘤细胞株,并对mAb的生物学功能进行初步研究。结果成功获得1株稳定分泌抗人B7-H4 mAb的杂交瘤细胞株,命名为8F10。Western blot结果显示:8F10特异性识别B7-H4蛋白;T细胞增殖抑制阻断实验显示8F10可以阻断B7-H4对T细胞增殖的抑制作用。结论成功获得鼠抗人B7-H4 mAb,为进一步研究B7-H4分子的生物学功能提供了有效的工具。
- 张标房鹏张宁顾宗江
- 关键词:B7-H4单克隆抗体杂交瘤B7-H4