张宁
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：东北农业大学生命科学学院农业生物功能基因重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省高校科技创新团队建设计划项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- Vip3A杀虫蛋白随机重组文库的构建与分析
- 2013年
- 营养期杀虫蛋白(Vegetative Insecticidal Proteins,VIPs)作为苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)一类新型杀虫蛋白,丰富了Bt的杀虫谱,是一种用于植物保护的重要杀虫蛋白。为了提高VIPs蛋白的杀虫活性,扩展其杀虫谱,利用Gateway技术对vip3Aa39和vip3Aa11基因进行同源重组突变,并克隆到入门载体pDONR221中,构建了重组文库。结果显示,得到了42个基因型不同的重组质粒,其中有22个蛋白序列不同的突变体。
- 张宁刘荣梅束长龙张杰李海涛高继国
- 关键词：苏云金芽胞杆菌营养期杀虫蛋白GATEWAY技术
- 野生大豆叶片蛋白质组双向电泳技术体系的优化研究被引量：5
- 2015年
- 为给野生大豆蛋白质组学分析提供技术支撑,以耐盐碱野生大豆叶片为材料,对Tris-饱和酚法、Tris-HCl法和TCA-丙酮法3种蛋白质提取方法进行了比较,并对蛋白上样量、等电聚焦参数及凝胶浓度进行了优化。结果表明:使用Tris-饱和酚法提取蛋白质,上样量为2 000μg,等电聚焦90 000 V·h,凝胶浓度为10%时,可获得背景清晰、蛋白点数较多、重复性较好的蛋白双向电泳图谱。
- 张宁孙晓丽端木慧子于洋纪巍朱延明
- 关键词：野生大豆叶片蛋白质提取双向电泳蛋白组学
- 重组人瘦素大肠杆菌的高密度发酵与瘦素的纯化被引量：1
- 2011年
- [目的]探索获得大量高纯度重组人瘦素的方法。[方法]通过5 L发酵罐对重组人瘦素大肠杆菌pET32a-OB[BL21(DE3)]进行了高密度发酵,并通过DEAE sepharose Fast Flow阴离子层析分离将IPTG诱导表达的人瘦素进行纯化,并通过ESI-Q-TOF-MS/MS分析验证目的蛋白。[结果]得到的培养物为3 L左右,OD600为20.25,纯化后的人瘦素纯度为98%左右。[结论]发酵罐发酵得到的菌体密度要远大于正常用三角瓶培养的菌体密度,阴离子交换层析法制备重组人瘦素符合大量生产高纯度重组人瘦素的要求。
- 双宝李明李慧张宁王晴高继国刘忠华
- 关键词：瘦素高密度发酵蛋白质纯化
