年四季
- 作品数：30 被引量：73H指数：5
- 供职机构：泸州医学院基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省青年科技基金四川省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学生物学更多>>
- 抗金黄色葡萄球菌全人源单链抗体的筛选与鉴定
- 研究背景:金黄色葡萄球菌常引起败血症、肺炎和全身性感染等,特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(meticillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)是临床上最常见的耐药菌之一,其治疗...
- 年四季吴桐徐文峰叶迎春袁青
- 关键词：金黄色葡萄球菌噬菌体展示
- 小麦矮腥黑穗菌常规PCR与实时荧光定量PCR检验检疫技术研究
- 小麦矮腥黑穗病(Wheat dwarf bunt disease, DB)是麦类黑穗病中危害最大、极难防治的国内外检疫性病害之一,是由小麦矮腥黑穗病菌(Tilletia controversa Kühn, TCK)引起的...
- 年四季
- 关键词：小麦矮腥黑穗病孢子形态实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 留学生医学微生物学实验教学初探被引量：3
- 2013年
- 结合几年来留学生医学微生物学的教学实践和体会,初步探索适合留学生的医学微生物学实验教学的方法,为进一步提高高等医学院校的留学生教学水平提供参考。
- 张金平年四季胡晓艳荣华
- 关键词：医学微生物学留学生实验教学
- 一种核糖体展示单链抗体文库的构建与鉴定
- 2009年
- 用柑桔溃疡病致病菌Xanthomonas axonopodis pv.citri(Xac)全菌免疫小鼠,提取小鼠脾细胞mRNA,RT-PCR扩增小鼠抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),采用linker(Gly4Ser)3连接VH和VL,构建用于核糖体展示方法筛选阳性单链抗体(scFvs)的文库。通过将scFv文库DNA转化大肠杆菌JM109,随机挑取克隆子测序以分析单链抗体文库的多样性。结果显示,用柑桔溃疡病菌免疫后的小鼠抗血清效价为2500倍左右,扩增的VH大小为350bp左右,VL的大小为650bp左右,linker连接后的单链抗体文库DNA大小为1200bp左右。测序结果显示,单链抗体文库多样性好。以Xac为靶,筛选到了抗Xac的特异性抗体,说明该抗体库可用于柑桔溃疡病菌单链抗体的筛选。
- 年四季袁青殷幼平王中康
- 关键词：单链抗体柑桔溃疡病菌核糖体展示
- 抗柑桔溃疡病菌可溶性单链抗体的表达及鉴定被引量：3
- 2009年
- 前期采用核糖体展示技术筛选了抗柑桔溃疡病菌(Xanthomonas axonopodis pv. citri,Xac)高亲和力单链抗体(Single chain variable fragment,scFv)GX13、GX44和GX95,为高效表达具有生物活性的单链抗体,本研究将前期筛选的高亲和力单链抗体基因转入大肠杆菌HB2151中进行可溶性表达,点印迹和Western印迹检测可溶性单链抗体的表达水平,亲和层析纯化表达的单链抗体,酶联免疫吸附法(ELISA)检测纯化单链抗体的抗原结合活性.结果显示,3株抗柑桔溃疡病菌可溶性单链抗体在大肠杆菌HB2151中均获得成功表达,表达产物分子量(Mr)约为32.0×103,主要集中于细菌周质腔中.ELISA检测纯化的单链抗体都具备抗原结合活性,可进一步应用于柑桔溃疡病菌的免疫诊断和病害防治.
- 袁青年四季殷幼平李泮志王中康
- 关键词：柑桔溃疡病菌单链抗体可溶性表达
- 天然人源抗体文库构建及多种人源抗体的筛选
- <正>目的:构建天然人源抗体文库并筛选多种人源抗体。方法:提取健康人外周血单个核细胞(PBMC)mRNA,构建全长c DNA文库。从全长c DNA文库中扩增人抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL,包括Vκ和Vλ),L...
- 年四季黄黎郭夕源邬于川袁青
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌α-溶血素的基因克隆与蛋白表达纯化
- 金黄色葡萄球菌α-溶血素(α-Hla)是一种外毒素,具有良好的抗原性,是金黄色葡萄球菌致人类疾病的主要因子,在金黄色葡萄球菌感染特别是医源性感染中,起到主要作用。金黄色葡萄球菌感染容易产生耐药性,后期抗感染治疗难度大。目...
- 吴桐年四季徐文峰叶迎春袁青
- 文献传递
- IL-4、IL-13蛋白表达及抗IL-4、IL-13人源单链抗体的筛选被引量：3
- 2013年
- 目的:表达IL-4和IL-13蛋白,从人源单链抗体文库中分别筛选抗IL-4和抗IL-13单链抗体。方法:采用RT-PCR从健康志愿者外周血单核细胞(PBMC)mRNA中扩增IL-4和IL-13 cDNA;构建硫氧还蛋白融合表达载体,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达并对表达产物进行纯化鉴定。以生物素化的IL-4和IL-13为抗原从前期构建的人源抗体文库中采用噬菌体展示技术分别筛选抗IL-4和抗IL-13人源单链抗体(scFv)。结果:扩增的IL-4 cDNA大小为280 bp,表达的融合蛋白大小为27 kD左右。扩增的IL-13 cDNA大小为252 bp,表达的融合蛋白大小为25 kD左右。分别以生物素化的IL-4和IL-13蛋白为抗原,采用噬菌体展示技术对人源抗体文库进行3轮富集后,分别有大约37%的scFvs与IL-4有结合特性,有约27%的scFvs与IL-13有结合特性。筛选了4株分别与IL-4和IL-13结合能力强的单链抗体进行了Western blot鉴定和测序。结论:成功筛选到抗IL-4和抗IL-13人源性单链抗体。
- 袁青黄黎郭夕源叶迎春年四季
- 关键词：IL-4IL-13人源单链抗体
- 抗TSLP全人源单链抗体筛选与初步鉴定被引量：2
- 2014年
- 目的:表达TSLP蛋白,从全人源单链抗体文库中筛选得到抗TSLP单链抗体。方法:扩增TSLP cDNA,将目的基因与表达载体pET101/D-TOPO连接,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达并对表达产物进行纯化鉴定。以生物素化的TSLP蛋白为抗原从前期构建的全人源抗体文库中采用噬菌体展示技术筛选抗TSLP全人源单链抗体(scFv)。结果:扩增的TSLP cDNA片段大小为423 bp左右。表达的TSLP蛋白大小为26 kD左右,Dot blot及Western blot鉴定显示表达的蛋白正确,为TSLP目的蛋白。以生物素化的TSLP蛋白为抗原,采用噬菌体展示技术对全人源抗体文库进行3轮富集,通过ELISA检测有35%的scFv与TSLP有结合特性。将筛选的与TSLP结合能力强的单链抗体进行了Western blot鉴定和测序。结论:成功筛选到抗TSLP全人源单链抗体。
- 朱建光袁青黄黎徐文峰年四季
- 关键词：TSLP人源单链抗体
- 医学微生物学双语教学的实践与分析被引量：5
- 2010年
- 实施双语教学是适应我国高等教育国际化趋势的发展需要,是素质教育进一步深化的必然要求,也是培养具有国际合作意识、国际交流与竞争能力、坚实学科知识的复合型人才的重要途径。结合学校实际,通过对医学微生物学双语教学的实践与调查,对医学微生物学双语教学模式、教学评价、教学效果等进行了探讨,为更好地开展双语教学奠定了基础。
- 张金平王光西年四季
- 关键词：医学微生物学教学方法双语教学
