巫剑
- 作品数：10 被引量：24H指数：4
- 供职机构：新疆维吾尔自治区畜牧科学院兽医研究所更多>>
- 发文基金：公益性行业科研专项家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目更多>>
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- 犬肠系膜淋巴结免疫组化反应的探索
- 通过免疫组化方法,探索犬肠系膜淋巴结对EgM产生的免疫应答。对直接感染原头蚴的肠系膜淋巴结和EgM免疫后感染原头蚴的肠系膜淋巴结运用直接法和抗原蛋白(EgM)～抗体～抗体酶标物法(三步法)进行检测,并与空白组对照。结果用...
- 石保新巫剑米晓云古努尔·吐尔逊张壮志张文宝岳城
- 关键词：淋巴结免疫组织化学三步法
- 文献传递
- 细粒棘球绦虫感染犬及EgM9蛋白免疫犬引起的免疫应答研究
- 目前，国内外对宿主抗细粒棘球绦虫免疫的研究主要集中在宿主体内的免疫保护、免疫逃避与免疫损伤机制。有很多关于细粒棘球绦虫病的中间宿主的免疫抗原Eg95的研究报道，但对终末宿主犬的免疫保护抗原还在研究当中。本研究通过免疫组织...
- 巫剑
- 关键词：细粒棘球绦虫免疫组织化学抗体反应
- 犬细粒棘球绦虫粪抗原夹心ELISA检测方法的建立被引量：12
- 2012年
- 为建立特异性和敏感性高的检验犬细粒棘球绦虫感染的方法。用细粒棘球绦虫(简称,Eg)成虫抗原分别免疫兔和绵羊,收集高免血清,纯化的高免抗体。依据抗体夹心ELISA工作原理,以兔抗体包被,检测感染Eg、不同犬带科绦虫的实验犬和空白犬粪样,绵羊抗体扑捉抗原,HRP标记兔抗绵羊IgG(1∶8 000)催化显色,用酶标仪测定OD 405nm吸光度,用以确定其特异性和敏感性。试验结果表明,敏感性为82.69%(43/52),特异性为85.88%(140/163);粪抗原在感染细粒棘球绦虫16d后可检出,最低抗原浓度为9.7ng/mL即犬感染5条成虫时可检测出阳性。该检测方法具有较好的特异性和灵敏性,为进一步研制检测细粒棘球绦虫虫体抗原ELISA检测试剂盒奠定了基础。
- 张旭古努尔.吐尔逊米晓云石保新张睿巫剑赵莉阿布力克木张玲丁晓玲阿布力兹李国庆卡那提拜克.开比热张壮志
- 关键词：细粒棘球绦虫特异性敏感性
- 用抗虫体表膜抗原抗体测定犬细粒棘球绦虫粪抗原被引量：6
- 2011年
- 利用Echinococcus granulosus(Eg)成虫表膜抗原抗体夹心ELISA方法检测犬细粒棘球绦虫感染的粪抗原。首先提取E g成虫表膜抗原,制备抗E g成虫表膜抗原的血清,然后用间接ELISA和Western blotting方法检测其抗原抗体反应及免疫原性,用间接免疫组化方法对E g成虫表膜蛋白进行组织定位。利用双抗体夹心ELISA方法检测感染E g的犬粪抗原。ELISA结果表明E g成虫表膜抗原具有良好的抗原性并能产生高效价抗体,抗体不与多头绦虫和泡状带绦虫抗原反应;Western blotting结果表明E g成虫表膜抗原与原头蚴、不成熟E g有共同蛋白成分。免疫组化结果证实虫体表膜蛋白分布在虫体表皮。该抗原抗体系统能检测到感染后13d的犬细粒棘球绦虫。结果表明该E g成虫表膜抗原抗体系统可用于诊断犬细粒棘球绦虫感染。
- 古努尔·吐尔逊米晓云张壮志石保新吐尔洪·依米提张旭巫剑赵莉阿曼古丽·马木提金映红张文宝
- 关键词：双抗体夹心ELISA
- 细粒棘球绦虫高免动物血清的特异性和敏感性分析被引量：4
- 2011年
- 目的获得用于诊断细粒棘球绦虫成虫感染时特异性和敏感性高的抗血清。方法用细粒棘球绦虫成虫抗原免疫兔2只,制备高免血清,血清用饱和硫酸铵沉淀、透析、获得比较纯化的抗体,测量浓度和效价后,3μg/ml兔抗体包被,检测感染了不同犬带科绦虫的实验犬和空白犬粪样,单克隆抗体补捉抗原(1∶6000),再用HRP标记的兔抗小鼠IgM(1∶2000),OD 405nm读值,用以判定兔高免血清的特异性和敏感性。结果高免血清抗体效价均为16万,其敏感性为85%(34/40),特异性为87.5%(42/48)。结论此高免血清可以用于建立高敏感性和高特异性的诊断细粒棘球绦虫成虫感染的ELISA方法的建立和优化。
- 闫昊张旭古努尔.吐尔逊米晓云石保新薛晶巫剑赵莉李丹张睿张壮志
- 关键词：细粒棘球绦虫高免血清
- 细粒棘球绦虫抗原B的研究进展被引量：1
- 2013年
- 细粒棘球绦虫抗原B(AgB)是血清学诊断棘球蚴病最重要的抗原,也是目前研究最多的抗原之一。深入研究抗原B对棘球蚴病的血清学诊断、流行病学研究、综合防控和疫苗的研究开发具有重要的意义。文章针对近年来关于抗原B的分子生物学特征、免疫学特性及在人和动物等中间宿主的血清学诊断方面的研究进展进行综述。
- 袁维峰巫剑贾红侯绍华郭晓宇马世春朱鸿飞
- 关键词：细粒棘球绦虫诊断抗原抗原B特异性敏感性
- 细粒棘球绦虫感染犬及EgM9蛋白免疫犬引起的免疫应答研究
- 目的:本研究通过免疫组织化学方法与分子生物学方法,探索宿主感染细粒棘球绦虫和EgM9蛋白免疫后,机体外周免疫系统、肠道的粘膜免疫系统产生免疫应答的情况,以期为临床研制相关疫苗提供实验依据。方法:本研究首先经pET-41b...
- 巫剑张壮志石保新张文宝王进成古努尔岳城张旭
- 文献传递
- 免疫组化法检测EgM蛋白免疫犬的肠系膜淋巴结抗体靶位点的探索被引量：1
- 2009年
- 目的检测EgM蛋白免疫后的犬肠系膜淋巴结和感染细粒棘球绦虫后的犬肠系膜淋巴结上的IgG和特异性IgG抗体。方法用免疫组织化学方法检测仅EgM免疫犬肠系膜淋巴结、EgM蛋白免疫后感染原头蚴的犬肠系膜淋巴结、感染细粒棘球绦虫(原头蚴)的犬肠系膜淋巴结上的IgG。用细粒棘球绦虫虫体分泌表达的重组蛋白EgM制备的高免特异性抗体可引起免疫犬的特异性抗体反应。结果在EgM免疫犬和感染原头蚴的犬的肠系膜淋巴结检测出IgG。结论用EgM蛋白免疫犬后可以在其肠系膜淋巴结产生特异性抗体。
- 巫剑米晓云张壮志石保新古努尔.吐尔逊张文宝岳城
- 关键词：细粒棘球绦虫抗体反应
- EgM9蛋白免疫犬肠系膜淋巴结中抗体的免疫荧光组织化学定位被引量：5
- 2010年
- 以EgM蛋白免疫犬、EgM蛋白免疫后感染原头蚴犬及感染原头蚴犬3个组的肠系膜淋巴结为材料,用FITC标记羊抗犬IgG和羊抗兔IgG,分别采用一步法和三步法免疫荧光技术检测EgM蛋白免疫犬肠系膜淋巴结上的IgG和特异性IgG。结果显示,EgM蛋白免疫犬、EgM蛋白免疫后感染原头蚴犬的肠系膜淋巴结组织有清楚可见的荧光点,而感染原头蚴犬的肠系膜淋巴结荧光较弱。两种方法均证明,EgM蛋白免疫犬后在其肠系膜淋巴结中可以产生特异性抗体。
- 石保新巫剑张壮志张文宝米晓云古努尔.吐尔逊岳城吐尔洪.依米提张旭赵莉郝呈普
- 关键词：细粒棘球绦虫原头蚴抗体反应免疫荧光组织化学
- 细粒棘球绦虫成虫表膜抗原特异性基因的筛选及克隆被引量：3
- 2009年
- 为筛选细粒棘球绦虫（Echinococcus granulosus,Eg）表膜抗原基因或具有诊断性的特异性基因,提取Eg成虫表膜抗原,经ELISA、Western blot对该抗原的免疫学特性进行初步研究。以Eg成虫表膜抗原高免鼠血清为探针,筛选Eg成虫cDNA文库,将阳性噬菌斑的PCR产物和pGEM-T载体连接,转染到DH5α,对得到的重组子进行测序,并进行同源性分析。ELISA检测显示,表膜抗原免疫鼠诱导产生了特异性抗体,Western blot鉴定该抗体能识别Eg成虫表膜抗原、原头蚴、Eg发育不成熟、Eg发育成熟抗原。筛选出6个阳性克隆,DNA片段大小在1~2kb之间。对阳性克隆进行同源性分析,结果与EgP-29mRNA同源性为99%,与Eg14-3-3蛋白mRNA同源性80%-99%。筛选Eg成虫cDNA文库所获得的基因,证明了Eg虫体表膜抗原的存在,有望成为犬细粒棘球绦虫的诊断抗原以及犬抗细粒棘球绦虫的候选基因。
- 古努尔.吐尔逊米晓云张壮志雷震石保新巫剑赵莉易忠吐尔洪.依米提张文宝
- 关键词：细粒棘球绦虫免疫筛选
