屠强
- 作品数:6 被引量:7H指数:2
- 供职机构:复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 发文基金:国家杰出青年科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 人纺锤体素cDNA的克隆、定位和组织表达谱分析被引量:3
- 2000年
- 纺锤体是细胞有丝分裂及配子成熟分裂过程中特有的亚细胞结构,它的结构和功能的正常与否直接影响生物个体的发育、分化、生长和繁殖.最近的研究表明,小鼠Mos/MAPK途径对纺锤体的作用与纺锤体素(spindlin)蛋白的磷酸化过程密切相关.采用同源筛选方法从人睾丸cDNA分子库中克隆到一个与小鼠纺锤体素基因( Spin)编码序列高度同源,长 1929bp的 cDNA片段.计算机软件分析发现,该 cDNA的 271-984 nt是一个完整的开放阅读框(ORF),由其编码的 237个氨基酸与小鼠Spin蛋白的氨基酸序列呈96%的高度同源,并与小鼠的配子发生特异转录的相关蛋白 Ssty也有 5 6%的同源度.经查新证实它是一个全新的基因编码序列后,以 SPIN(huma spindlin)命名在 GenBank登录( AF087864). Northern杂交结果显示:该基因在人体卵巢、睾丸、心、脑。肾、胰腺、胎盘、脾脏中以 4.8 kb的转录本表达,但在睾丸组织中还特有一个长约 2.0 kb的转录本表达.然而在胸腺、小肠未见明显的杂交条带.应用RH制图方法,揭示SPIN基因定位于9号染色体9q22.1~22.3区带.
- 王小柯余龙张宏来陈政屠强陈靓秋丁建波高洁赵寿元
- 关键词:CDNA克隆组织表达谱细胞分裂
- 人伴侣蛋白CCT的β亚基全长cDNA克隆、表达及染色体定位的研究被引量:1
- 2000年
- 伴侣蛋白能促进其他底物蛋白形成正确折叠结构,而本身并不成为底物蛋白的组分.在真核细胞质中的伴侣蛋白CCT主要是参与协助细胞骨架蛋白的构成,为细胞生长所必需.通常哺乳动物的CCT是由7-9种不同亚基所组成的蛋白复合体.从人的睾丸组织cDNA文库中分离出一条新的全长 cDNA,在其 1935bp序列中含有一个长 1605bp的可读框,它编码了 535个氨基酸.基于从该cDNA推导的蛋白质与啤酒酵母。裂殖酵母、线虫、小鼠等的CCTβ亚基存在较高的同源度,尤其是与小鼠的CCTβ同源度高达97%,由这个新基因所编码的推导蛋白可能就是人的CCTβ亚基. Northern杂交结果显示,人CCTβ基因的转录本长约 2.0 kb,它在多种组织中均有表达,但在睾丸组织中呈超量表达,约为其他组织表达量的3-24倍.利用辐射杂种细胞克隆板定位技术,CCTβ基因被定位于人染色体12q14区带.此外,通过同源检索,发现这个cDNA序列的5’侧与人的一个BAC基因组序列(U91327)的3’侧呈间隙的区段性同源,经对比分析,还对CCTβ基因5’端的基因组结构进行了详细描述.
- 蒋菊香林伟余龙张宏来屠强赵寿元陈政蒋滢
- 关键词:CDNA克隆染色体定位Β亚基
- 人类细胞因子信号传导抑制因子基因humSOCS-2的分离与克隆
- 1999年
- 采用国际GenBankEST数据库同源筛选的策略 ,筛选到 1个与小鼠细胞因子信号传导抑制因子基因mmSOCS 2高度同源的EST( gb/AA1 1 5 2 39) ,在人胎盘cDNA分子库中PCR获得与之序列一致的cDNA片段 ,以该片段为探针在人胎盘cDNA分子库中步移获得一长1 0 1 1bp的cDNA片段 ,包含一个长 5 94bp的开放阅读框 ,编码了 1 98个氨基酸残基 ,经NCBI数据库检索是一个全新的基因 .同源比较发现其与mmSOCS 2的氨基酸同源性高达 93% ,其SH2 结构域及SOCS盒与相关基因的类似结构也具有较高的同源性 ,从而将其命名为hum SOCS 2基因 ,国际GenBank登记号为gb/AF0 2 0 5 90 .表达谱分析表明该基因在前列腺组织中表达量最高 ,但另 1
- 张民余龙屠强胡培蓉张琪毕安定姜春玲赵寿元
- 关键词:细胞因子信号传导克隆
- 人类β-1,4-半乳糖苷转移酶基因家族中1个新成员的克隆与表达谱分析
- 1999年
- 应用从EST出发克隆基因家族新成员的策略 ,在人类睾丸组织cDNA文库中分离出 1个新的全长cDNA片段 ,它编码的蛋白产物与 (UDP 半乳糖苷 :N 乙酰基葡萄糖胺 )半乳糖苷转移酶 (GalT)有较高的同源度 .分析表明 ,在其 2 173bp的序列中含有 1个长 10 3 2bp的开放读框 ,编码 3 44个氨基酸 .基于该基因与半乳糖苷转移酶基因家族各成员的同源关系 ,尤其是与G .gallusβ 1,4 半乳糖苷转移酶Ⅰ型(CKⅠ )的关系密切 ,这个基因的蛋白产物被命名为人类 β 1,4 半乳糖苷转移酶同源蛋白Ⅰ型 .Northern杂交发现它在被检测的人体 16种组织中均有表达 ,但丰度各异 .通过与含人单条染色体的人 /啮齿类的杂种细胞DNA进行Southern杂交 ,证明该基因位于 3号染色体上 .
- 范玉新余龙张琪江萤戴方彦陈驰原屠强毕安定许月芳赵寿元
- 关键词:半乳糖苷转移酶克隆
- 人类β-1,4-半乳糖苷转移酶Ⅲ基因的分离与克隆
- 1999年
- 以人、牛、鼠、鸡、蜗牛的β-1,4-半乳糖苷转移酶催化区的编码核苷酸序列为探针,在NCBI GenBank EST数据库中进行同源搜寻,获得若干有高度同源的EST.在拼接序列的两端设计引物,以从人胎盘cDNA文库中PCR扩增获得的片段为探针,在人胎盘cDNA分子库中步移获得一个长1,907bp的cDNA片段,包含一个长1,179bp的开放阅读框(ORF,open reading frame),编码393个氨基酸残基。该基因与已知的人类β1,4-GalTI的氨基酸同源性为43.8%,在蛋白质催化区的同源性更高达60.9%。表达谱分析发现该基因在人体16种组织中均有不同程度的表达,转录本大小约为2.4kb.通过该cDNA人/啮齿类杂种细胞株DNA Southern杂交将该基因定位在1号染色体。
- 张民王小柯胡培蓉屠强毕安定余龙赵寿元
- 关键词:半乳糖苷基因分离基因克隆
- 蛋白质从头设计被引量:3
- 1998年
- 1.概述重组DNA、多肽合成等技术的发展导致了一门年轻分支学科——蛋白质工程的出现。由此人们认识和改造自然的能力得到了进一步的提高。蛋白质工程是人们通过基因工程的技术手段,来改造蛋白质分子,使其性质与功能更加符合人们的需要。这就需要人们在改造分子之前...
- 屠强
- 关键词:蛋白质