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孙村民: 作品数：12 被引量：14H指数：3; 供职机构：中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划天津市科技支撑计划重点项目天津市科技支撑计划更多>>; 相关领域：化学工程轻工技术与工程农业科学更多>>

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琥珀酸脱氢酶或琥珀酰辅酶A合成酶缺失促进大肠杆菌积累5-氨基乙酰丙酸被引量：4: 2013年; 5-氨基乙酰丙酸(ALA)是生物体内四吡咯类化合物的合成前体,在农业及医药领域应用广泛,是极具开发价值的高附加值生物基化学品。目前利用外源C4途径的重组大肠杆菌发酵生产ALA的研究主要利用LB培养基并添加葡萄糖和琥珀酸、甘氨酸等合成前体,成本较高。琥珀酸在C4途径中以琥珀酰辅酶A的形式直接参与ALA的合成。文中在以葡萄糖为主要碳源的无机盐培养基中研究了琥珀酰辅酶A下游代谢途径琥珀酸脱氢酶编码基因sdhAB和琥珀酰辅酶A合成酶编码基因sucCD缺失对ALA积累的影响。与仅表达异源ALA合成酶的对照菌株相比,sdhAB和sucCD缺失菌株ALA的产量分别提高了25.59%和12.40%,且ALA的积累不依赖于琥珀酸的添加和LB培养基的使用,从而大幅降低了生产成本,显示出良好的工业应用前景。; 蒲伟陈久洲孙村民陈宁孙际宾郑平马延和; 关键词：5-氨基乙酰丙酸琥珀酸脱氢酶大肠杆菌基因敲除

新的赖氨酸脱羧酶突变体及其应用: 本发明公开了新的赖氨酸脱羧酶，其氨基酸序列由SEQ ID NO:1所示序列突变而来，在选自下组的一个或多个氨基酸残基位点发生突变：9位、44位、88位、111位、176位和230位。本发明的赖氨酸脱羧酶催化赖氨酸产生1,...; 孙际宾赵晶刘娇孙村民郑平马延和; 文献传递

5-氨基乙酰丙酸高产菌株及其制备方法和应用: 本发明公开了一种构建5‑氨基乙酰丙酸生产菌株的方法，即在所述5‑氨基乙酰丙酸生产菌株表达ALA合成酶(ALAS)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PPC)的基础上使得所述5‑氨基乙酰丙酸生产菌株的乙醛酸循环途径弱化。本发明还公开...; 郑平陈久洲孙际宾周文娟孙村民郭轩马延和; 文献传递

谷氨酸发酵过程中N-乙酰-谷氨酰胺的积累被引量：1: 2011年; 在利用HPLC分析谷氨酸发酵过程样品时,发现在色谱峰17.5 min处有一未知物质,其UV信号比较强,且与谷氨酸积累相关,通过高压液相和串联质谱,该物质鉴定为N-乙酰-谷氨酰胺。对比分析不同发酵过程,N-乙酰-谷氨酰胺积累与谷氨酸偶联,且与谷氨酸产量呈相关。溶氧对N-乙酰-谷氨酰胺合成没有显著影响,玉米浆是影响其合成的重要因素,随着玉米浆添加量的增加,N-乙酰-谷氨酰胺/谷氨酸比值逐渐降低,当玉米浆添加量大于10 mL/L时,继续添加玉米浆该比值不受影响。; 赵普亚黄磊孙村民曾祥峰贾士儒孙际宾; 关键词：谷氨酸发酵玉米浆

基于高通量生物反应器和分段式pH反馈补料技术发酵生产L-赖氨酸被引量：3: 2016年; 利用高通量生物反应器,以在线监测的p H为直接反馈补料信号,以葡萄糖、氨水和硫酸铵混合溶液为流加液进行补料发酵生产L-赖氨酸。当流加液中葡萄糖含量均为360 g/L时,对流加液中硫酸铵添加量、氨水添加量和发酵培养基接种量进行了单因素优化,确定一段式流加培养最佳条件为氨水添加量180 m L/L、硫酸铵添加量40 g/L、接种量为5 m L/45 m L培养基。分段式补料培养研究结果表明,在赖氨酸发酵的不同阶段采用不同配比的流加液进行分段式培养可以进一步提高赖氨酸的产酸浓度,同时降低残糖和残铵氮含量。三段式p H反馈补料发酵可以将赖氨酸产酸浓度提高到(56.85±0.98)g/L,与二段式和一段式相比分别提高8.65%和23.64%。; 梁恒宇林海龙孙际宾卢宗梅陈博孙村民; 关键词：L-赖氨酸

谷氨酸棒状杆菌合成5-氨基乙酰丙酸的途径构建与发酵优化被引量：7: 2017年; 5-氨基乙酰丙酸(5-amino levulinic acid,ALA)是生物体内天然存在的一种非蛋白质氨基酸,在农业和医药等领域应用广泛。为了在谷氨酸棒状杆菌中建立ALA碳四合成途径并优化其发酵体系,首先在谷氨酸棒状杆菌中过表达沼泽红假单胞菌来源的ALA合成酶(ALAS),建立高效的ALA碳四合成途径,然后从不同发酵培养基的比较、诱导剂和底物甘氨酸的浓度以及初始接种量等不同方面对ALA摇瓶发酵工艺进行了优化。结果显示,过表达Hem A的13032/p ZWA1菌株ALA产量达到1.41 g/L,是对照菌株的67.14倍。ALA的最优摇瓶发酵条件为以酵母粉为氮源的M9培养基,采用5%的接种量0.1 mmol/L IPTG进行Hem A的诱导表达,体系中甘氨酸的浓度要控制在4 g/L,摇瓶中ALA产量可达到3.28 g/L,比优化前提高了132.62%。采用发酵优化的条件,在5 L发酵罐的放大发酵中ALA产量可达10.08 g/L,这是现有报道中谷氨酸棒状杆菌一步发酵合成ALA的最高产量。; 饶德明张良程陈久洲孙德虎孙村民郑小梅郑平刁爱坡; 关键词：5-氨基乙酰丙酸谷氨酸棒状杆菌沼泽红假单胞菌发酵优化

通过弱化5-氨基乙酰丙酸脱水酶活性获得5-氨基乙酰丙酸高产菌株及其应用: 本发明公开了一种构建5-氨基乙酰丙酸(ALA)生产菌株的方法，即弱化所述ALA生产菌株中5-氨基乙酰丙酸脱水酶的活性。本发明还公开了利用所述方法构建的ALA生产菌株和利用所述菌株制备ALA的方法。利用本发明的菌株无需添加...; 郑平陈久洲潘丹丹郭小飞蒲伟孙村民孙际宾马延和; 文献传递

新的赖氨酸脱羧酶突变体及其应用: 本发明公开了新的赖氨酸脱羧酶，其氨基酸序列由SEQ ID NO:1所示序列突变而来，在选自下组的一个或多个氨基酸残基位点发生突变：9位、44位、88位、111位、176位和230位。本发明的赖氨酸脱羧酶催化赖氨酸产生1,...; 孙际宾赵晶刘娇孙村民郑平马延和

新的赖氨酸脱羧酶突变体及其应用: 本发明公开了新的赖氨酸脱羧酶，其氨基酸序列由SEQ ID NO:1所示序列突变而来，在选自下组的一个或多个氨基酸残基位点发生突变：9位、44位、88位、111位、176位和230位。本发明的赖氨酸脱羧酶催化赖氨酸产生1,...; 孙际宾赵晶刘娇孙村民郑平马延和

5-氨基乙酰丙酸高产菌株及其制备方法和应用: 本发明公开了一种构建5‑氨基乙酰丙酸生产菌株的方法，即在所述5‑氨基乙酰丙酸生产菌株表达ALA合成酶(ALAS)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PPC)的基础上使得所述5‑氨基乙酰丙酸生产菌株的乙醛酸循环途径弱化。本发明还公开...; 郑平陈久洲孙际宾周文娟孙村民郭轩马延和; 文献传递