吴书景
- 作品数：4 被引量：10H指数：3
- 供职机构：东北林业大学林学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 偏肿革裥菌Lg-mnp1基因克隆及表达研究被引量：4
- 2014年
- [目的]研究偏肿革裥菌Lg-mnp1基因的克隆及表达情况。[方法]根据白腐菌锰过氧化物酶(MnP)基因保守序列设计引物,采用PCR、RACE及染色体步移等方法,克隆偏肿革裥菌Lenzites gibbosa CB1的全长MnP1基因(GenBank登录号JQ327834),进行蛋白序列分析,并通过双酶切的方法获得重组质粒,将该重组质粒电转化至巴斯德毕赤酵母中进行异源表达。[结果]获得偏肿革裥菌Lenzites gibbosa CB1的全长MnP1基因,命名为Lg-mnp1。蛋白序列分析表明Lg-MnP1含有4个二硫键属于短MnP,预测成熟蛋白分子量为35.94kD,pI为4.43。通过双酶切的方法将Lg-mnp1的开放阅读框(ORF)序列连接到pPICZB载体上,获得重组质粒pPICZB/Lg-mnp1,转化子经PCR验证后,在BMMY培养基中甲醇诱导培养,在未添加血红素的培养液中MnP胞外酶活在72 h达到最高为7 U/L,表明Lg-mnp1已被转化至毕赤酵母中并可诱导表达。[结论]该方法对偏肿革裥菌Lg-mnp1基因的克隆及表达情况进行研究,为偏肿革裥菌Lg-mnp1基因的进一步应用提供了依据。
- 闫洪波池玉杰吴书景
- 关键词：锰过氧化物酶基因克隆毕赤酵母基因表达
- Lenzites gibbosa锰过氧化物酶1基因启动子序列的克隆被引量：3
- 2012年
- 根据已克隆到的Lenzites gibbosa锰过氧化物酶1cDNA全长基因Lg-mnp1,在5'端设计了3个巢式特异性引物,利用染色体步移技术克隆得到了其上游1 568 bp的启动子序列。采用Signal Scan进行了启动子序列分析。结果表明,在起始密码子上游-92～-43 bp区域为Lg-mnp1启动子的基础启动子区;在-52 bp处有一个转录起始位点,-83 bp处有1个TATAAA-box,-119、-196 bp有2个反向CCAAT-box(ATTGG)。启动子区也存在多个顺式作用元件,包括转录因子SP-1(GGGCGG)、转录因子AP-2(CCCMNSSS)、热激元件HSE(NTTCNNGAAN)及6个推定的金属响应元件MRE(TGCRCNC)等。
- 吴书景池玉杰闫洪波
- 关键词：锰过氧化物酶启动子染色体步移
- 松针红斑病及其防治被引量：4
- 2009年
- 松针红斑病属世界流行的重要病害之一。该病原菌侵染危害樟子松、红松等多种松树,是一种严重危害针叶的病害。松红斑病可导致松针大量脱落、生长放缓、木材生长量下降,甚至死亡。综述了松针红斑病的分类研究进展、生物学特性、产生的毒素,包括分子生物学在分类及病害鉴定方面的应用,并就其控制措施做了全面的总结。
- 王占斌吴书景程晓娟吴斯亮吴景波
- 关键词：红斑病
- 偏肿革裥菌3个锰过氧化物酶基因的克隆与表达分析
- 木材白腐菌能够降解植物细胞壁中最难分解的木质素,由白腐菌分泌的木质素降解酶类主要包括漆酶(Laccase)、木质素过氧化物酶(Lignin Peroxidase)、锰过氧化物酶(Manganese Peroxidase,...
- 吴书景
- 关键词：锰过氧化物酶染色体步移荧光定量PCR
- 文献传递
