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血清PCT、CRP及中性粒细胞百分比辅助诊断血流感染的临床价值被引量：10: 2022年; 目的通过受试者工作特征(ROC)曲线评价血清降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、中性粒细胞百分比(NEUT%)、淋巴细胞百分比(LYMPH%)、血沉(ESR)七种炎症指标对病原菌引起的血流感染(BSI)的诊断价值。方法以2013年3月-2019年7月连云港市第二人民医院进行血细胞培养分析检查的1 580例住院患者作为研究对象,根据血培养结果进行分组,其中革兰阳性菌组186例、革兰阴性菌组520例、阴性对照组868例,分析三组患者炎症指标对BSI的诊断价值;对上述三组患者炎症指标之间的水平差异进行比较。结果三组PCT、NEUT%、LYMPH%、CRP、WBC、PLT水平差异具有统计学意义(P<0.05);PCT、NEUT%、LYMPH%、PLT、CRP、WBC对革兰阴性菌BSI诊断价值差异有统计学意义(P<0.05);NEUT%、LYMPH%、PCT、WBC对革兰阳性菌BSI诊断价值差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同炎症指标对BSI的辅助诊断价值不同,相同炎症指标对不同BSI类型的辅助诊断价值各异,可以为临床上对不同病原菌BSI进行辅助诊断时选择合适的炎症因子进行实验室检查提供依据。; 刘霞陈慧敏朱文俊杨林刘小林徐燕梁伟; 关键词：血流感染革兰阴性菌革兰阳性菌 ROC曲线

小鼠microRNA-31反转录病毒载体重组质粒的构建及鉴定: 2016年; 目的:以p MSCV-puro载体(MGP)为骨架,构建带有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的小鼠micro RNA-31(mi R-31)反转录病毒载体MGP-31。方法:PCR扩增带有NotⅠ以及XhoⅠ酶切位点的mi R31的前体(premi R-31)序列,然后克隆至MGP载体上,测序鉴定。将构建的MGP-31质粒转染HEK-293T细胞,通过荧光显微镜观察GFP的表达情况,实时定量PCR检测mi R-31转录水平以评估MGP-31质粒的转染效率。结果:基因序列分析显示pre-mi R-31基因序列正确,并成功插入MGP载体,转染HEK-293T细胞可表达GFP,实时定量PCR结果表明转染MGP-31质粒的HEK-293T细胞可高表达mi R-31。结论:MGP-31反转录病毒载体构建成功。; 张璐玢谢梦晓陈云鹏徐晓昱张彩云冯晖晖刘霞周小明夏圣邵启祥; 关键词：反转录病毒载体重组质粒

副溶血性弧菌基因敲除方法的建立及应用被引量：16: 2011年; 目的摸索出一套副溶血性弧菌基因敲除的可靠方案,副溶血性弧菌致病相关基因的敲除对深入研究其致病机制有重要意义。方法通过融合PCR技术将目的基因上下游同源臂融合并克隆到自杀载体pDS132上,将重组质粒转化大肠杆菌S17λpir中,再接合转移到副溶血性弧菌菌株内,经pDS132质粒上sacB基因的反向筛选得到突变株。结果成功构建了副溶血性弧菌RIMD2210633菌株ΔopaR,ΔtoxR和ΔaphA三个基因突变株。结论通过自杀载体同源重组成功获得精确敲除的无痕突变株更有利于基因功能的研究,使后续副溶血性弧菌突变株与野生株的对比研究成为可能。; 刘霞高鹤杨琳张义全谭亚芳郭兆彪黄新祥杨瑞馥周冬生; 关键词：同源重组

mLumin转染人肝癌HepG2细胞系的建立被引量：1: 2011年; 目的:建立mLumin+的HepG2细胞系,为进一步建立肿瘤模型和小动物荧光成像观察奠定基础。方法:采用磷酸钙法,将pcDNA3.0-mLumin质粒转染至人肝癌细胞系HepG2,经G418筛选扩增后通过PCR检测mLumin基因在转染的肝癌细胞HepG2中的表达情况,同时应用荧光显微镜及流式细胞仪检测mLumin+的HepG2细胞比例,最终将其接种于裸鼠的皮下,观察致瘤情况。结果:RT-PCR鉴定证实肝癌细胞HepG2中有mLumin基因的mRNA表达。在倒置荧光显微镜下,采用绿光(540 nm)激发时,可以见到大量的发射红色荧光的细胞,流式细胞术检测有50%的阳性率。小动物活体成像仪显示裸鼠皮下接种能够成瘤,组织冰冻切片也证实HepG2细胞中有大量mLumin蛋白表达。结论:成功建立了mLumin+的HepG2细胞,为进一步进行肿瘤的基础和应用研究奠定了基础。; 刘霞闫美娜王荟万洋洋许凤姣邵青成静范兴文石慧娜邵启祥; 关键词：HEPG2 活体成像

miRNA-34a基因敲除DBA1/J小鼠的建立: 2019年; 目的:利用CRISPR/Cas9技术,构建全基因组微小RNA-34a(microRNA-34a,miR-34a)基因敲除DBA1/J小鼠,并进行繁殖、鉴定。方法:根据CRISPR/Cas9原理,构建出miR-34a-/+DBA1/J鼠为F0代小鼠;将其与DBA1/J野生型小鼠进行杂交,通过PCR鉴定筛选出基因型为miR-34a-/+的F1小鼠;筛选miR-34a-/-的F2代小鼠,分析其生长特性、繁殖能力;通过流式细胞术检测小鼠体内免疫器官和外周血中T、B淋巴细胞比例。结果:获得2只F0代小鼠,4只F1代小鼠,5只F2代小鼠;与DBA1/J小鼠比较,miR-34a-/-DBA1/J小鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群比例没有显著变化(P> 0. 05),但B淋巴细胞比例明显增加(P <0. 05);未发现miR-34a-/-DBA1/J小鼠的体重、繁殖能力有明显的改变(P> 0. 05)。结论:通过CRISPR/Cas9技术成功敲除miR-34a基因并繁殖获得目的小鼠。; 邱莎丽刘雪汪竹涛王蓉晁天柱王晶哲潘子辉梁银明王荟刘霞邵启祥; 关键词：MIR-34A 基因敲除繁殖

青年教师承担MBBS专业留学生医学免疫学教学体会与思考被引量：4: 2016年; 针对我校MBBS南亚班留学生的特殊性和医学免疫学课程抽象、难懂的特点,青年教师根据自身的语言、亲合力和同龄人沟通的优势,在教与学之间加强互动,不断改进教学方法,从而提高留学生医学免疫学的教学效果。; 刘霞夏圣邵启祥; 关键词：医学免疫学教学方法

丽春红S共振光散射光谱法测定尿蛋白被引量：4: 2007年; 目的建立一种快速灵敏的尿蛋白质测定方法.方法以Ph 4.2 B-R缓冲液为介质,在λex=λem=306 nm测定丽春红S（poncesu S,PS）与蛋白质结合产物的共振光散射（RLS）强度,用清蛋白标准液绘制工作曲线.结果结合物RLS强度与蛋白质浓度成线性关系,直线回归方程：△I=2.24c-0.41,相关系数r=0.999,线性范围为0～1 500 mg/L,最低检测限1.48mg/L.平均回收率为102.8%,批内、批间变异系数分别为2.09%、5.40%.标本测定结果与丽春红S法相比无显著差异.结论丽春红S共振光散射法测定尿蛋白,方法简单、快速、灵敏度高.; 杨新玲王恩波刘霞吴惠毅; 关键词：共振光散射蛋白质

PTD-Foxp3免疫功能的研究: 自然调节性T细胞/(natural regulatory T cells, nTregs/)调节生理及病理情况下机体的免疫应答,对于维持机体自身免疫耐受及免疫自稳具有重要作用。Foxp3在nTregs中高表达,是nTre...; 刘霞; 关键词：蛋白转导结构域 FOXP3 免疫抑制 T细胞分化; 文献传递

长链非编码RNAs在自身免疫病中的研究进展被引量：1: 2017年; 长链非编码RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一类片段超过200个核苷酸且不具备编码蛋白质能力的RNA转录本。lncRNAs作为一种表观遗传学修饰,通过影响染色质重塑、基因转录、蛋白质转运和运输等发挥其生物学活性。大量基础及临床研究表明,在动物或人体内许多表达水平异常的lncRNAs可能参与自身免疫病的发生、发展。结合近年来的相关报道,该文主要针对不同类型自身免疫病中异常改变的lncRNAs做一综述,并着重讨论lncRNAs的作用机制及其在自身免疫病发生、发展中的调控作用。; 谢梦晓刘霞邵启祥; 关键词：自身免疫病表观遗传学

mTIGIT-mLumin跨膜融合蛋白慢病毒载体和真核表达载体的构建及体外的稳定表达: 2018年; 目的:构建以mLumin荧光蛋白为指示系统的小鼠T细胞免疫球蛋白和结构域蛋白(mouse T cell Ig and ITIM domin,mTIGIT)胞外区真核表达载体,并表达mTIGIT-mLumin融合蛋白。方法:分别设计mTIGIT和mLumin的特异性引物,通过PCR技术扩增两个目的基因序列,经酶切、连接,克隆至plenti-puro和pcDNA3.1载体。将构建的plenti-puro-mTIGIT-mLumin慢病毒载体进行病毒包装并感染HEK-293T细胞,而pcDNA3.1-mTIGIT-mLumin真核表达质粒转染非洲绿猴肾成纤维Cos7细胞,利用两种表达载体的药物抗性进行筛选感染或转染的细胞,检测融合蛋白的表达情况。结果:通过PCR顺利扩增获得mTIGIT和mLumin,经酶切、连接插入至载体,基因测序结果证实克隆的mTIGIT和mLumin片段序列正确,并成功正确插入到plenti-puro载体和pcDNA3.1载体中;荧光显微镜和共聚焦显微镜观察显示,转染的HEK-293T细胞和Cos7细胞经过筛选能够稳定表达mTIGIH-mLumin融合蛋白。结论:成功构建plenti-puro-mTIGIT-mLumin慢病毒载体和pcDNA3.1-mTIGIT-mLumin真核表达载体,且能够在目的细胞中稳定表达mTIGIT-mLumin融合蛋白。; 王晶哲王小铃王娟杨鑫鑫闫美娜李欣悦王荟刘霞邵启祥; 关键词：重组质粒融合蛋白

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刘霞

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