刘永娟 作品数:16 被引量:23 H指数:3 供职机构: 连云港市第一人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 教育部“新世纪优秀人才支持计划” 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
肠道病毒71型2A蛋白的研究进展 2014年 肠道病毒71(enterovirus 71,EV71)是手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)主要致病原之一。手足口病临床上常表现为发热,手掌、脚掌及口腔黏膜皮疹或疱疹。然而,EV71感染导致的手足口病易伴随神经系统并发症,甚至死亡。EV71非结构蛋白2A作为蛋白酶和转录激活因子,在EV71生命周期中发挥重要作用。本文对2A的结构与功能研究进展进行综述,揭示2A的双重功能如何促进病毒复制和调控靶细胞,为进一步研究靶向2A的抗病毒疫苗和药物提供理论基础。 刘永娟 张凤凤 涂会林 何小华 刘万红关键词:肠道病毒71 蛋白酶 转录激活因子 2010年武汉市手足口病流行病学研究 目的 分析2010年湖北省武汉市手足口病(Hand foot and mouth disease,HFMD)流行病学特征,为HFMD的有效预防和治疗提供重要的科学依据.方法 对2010年武汉市HFMD患儿临床病例进行回顾... 刘永娟 傅翀 何小华 刘万红关键词:手足口病 流行病学 肠道病毒71型 一种潜在的新肿瘤分子标志物RASSF4的研究进展 2014年 RAS相关结构域家族(RASSFs)由10个成员组成,这些家族成员已被确认为抑癌基因,可以通过多种途径调控细胞增殖、促进细胞凋亡和衰老,维持微管的稳定性、调节细胞的黏附和运动性。研究发现RASSF4在正常组织中广泛表达,而在人类肿瘤细胞中由于启动子甲基化表达下调,RASSF4还可诱导细胞凋亡,其关于信号转导途径的研究也有了一定发展。本文就其研究进展进行综述。 张凤凤 刘永娟 朱果果 程青青 王志浩 刘万红 何小华关键词:甲基化 细胞凋亡 泡沫病毒载体转导非分裂细胞和神经细胞的研究进展 <正>泡沫病毒(foamy virus,FV)是一类拥有广泛宿主且无致病性的逆转录病毒。由于它安全性高和具有携带大片段外源基因的能力,因此被人们发展成为载体系统用于基因治疗。但是,对于FV载体是否能转导非分裂细胞这一问题... 张莹莹 刘永娟 刘万红 何小华文献传递 武汉重症手足口病EV-A71分离株全基因组特征分析 被引量:1 2022年 目的分析武汉重症肠道病毒A71型(Enterovirus A71,EV-A71)病毒株全基因组特征。方法自湖北武汉2例手足口病Ⅱ期患儿咽拭子中分离EV-A71,利用overlap-PCR扩增EV-A71全基因组的6个首尾重叠的基因片段,利用生物信息学软件DNAStar5.0、MEGA-Ⅹ和SimPlot3.5.1分析基因组特征。结果获得2株EV-A71分离株wh064和wh170的全基因组序列,二者核苷酸和氨基酸序列同源性分别为99.95%和99.86%。2株EV-A71病毒株属于C4a2亚型。系统进化分析和遗传距离计算发现,在P1区域,2株病毒株与C基因型EV-A71位于同一进化分支,遗传距离最小;在P2区域,2株病毒株与B基因型EV-A71和CVA16位于同一分支,与B基因型EV-A71之间遗传距离最小(C4亚型除外);在P3区域,2株病毒株与B3亚型EV-A71和CVA16位于同一分支,与B3亚型EV-A71和CVA16之间遗传距离较小。基因重组分析发现,2株分离株P1区域与C基因型EV-A71相似度最高,P2区域与B基因型EV-A71、CVA4、CVA5、CVA14和CVA16原型株的相似度高于C基因型EV-A71,P3区域与B3亚型EV-A71、CVA4、CVA14和CVA16原型株相似度高于其他病毒株,重组断点位于2A-2B连接处和3C处。此外,2株病毒株基因组中突变位点5’UTR-61T、VP1-27S(L)、VP1-98K和3D-396S亦存在于武汉其他重症和死亡病例EV-A71分离株。结论武汉2株EV-A71是重组病毒株,可能由C基因型和B3亚型EV-A71病毒株重组而来,亦或由C基因型EV-A71和CVA4、CVA14、CVA16重组而来。某些位点突变可能影响EV-A71毒力。 周井义 史颖颖 刘永娟关键词:全基因组 系统进化 基因重组 EV71病毒分子流行病学分析及其作用机制的初步研究 肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)是儿童手足口病的主要致病原之一.自2007年以来,中国大陆反复发生EV71感染致手足口病的大规模爆发和流行.我们建立了分析中国大陆EV71衣壳蛋白VP1中潜在毒力位... 刘万红 刘永娟 张良禄 张凤凤 史颖颖 袁佩佩 涂会林 何小华熊果酸对脂多糖诱导的人髓系白血病单核细胞来源巨噬细胞炎性因子的调节作用 被引量:6 2021年 目的探讨熊果酸(UA)对脂多糖(LPS)诱导的人髓系白血病单核细胞(THP-1)来源巨噬细胞(Mφ)白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达调节和可能机制。方法对照组用佛波酯(PMA)处理THP-1细胞使其分化成巨噬细胞,模型组用脂多糖刺激THP-1源巨噬细胞建立炎症细胞模型,低、中、高浓度实验组在模型组的基础上分别加入5,10和20μmol·mL^(-1)熊果酸处理12 h,然后加入脂多糖处理6 h。以噻唑蓝比色法检测细胞活性,以流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(ROS)产生,以实时定量聚合酶链反应检测IL^(-1)β、IL-6和TNF-αmRNA水平,以蛋白质印迹法检测含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3),胱天蛋白酶-1(caspase-1),IL^(-1)β蛋白的表达。结果对照组和低、中、高浓度实验组的细胞凋亡率分别为(2.20±0.52)%,(2.40±0.26)%,(5.23±0.52)%和(11.27±1.03)%。对照组、模型组和低、中、高浓度实验组的IL^(-1)β基因相对表达量分别为1.02±0.14,16.46±2.99,14.22±0.50,7.41±0.79和2.20±0.57;IL-6基因相对表达量分别为1.08±0.28,17.61±5.55,4.42±0.41,2.14±0.23和1.56±0.37;TNF-α基因相对表达量分别为1.01±0.10,7.62±0.33,6.40±0.84,3.79±0.88和4.03±0.35;细胞ROS产生情况分别为(100.00±1.16)%,(131.70±4.41)%,(124.70±2.60)%,(107.30±1.45)%和(107.30±3.71)%;NLRP3蛋白表达的相对水平分别为1.18±0.01,1.31±0.02,1.20±0.02,0.94±0.01和0.97±0.01;caspase-1蛋白表达的相对水平分别为1.20±0.01,1.31±0.03,1.17±0.02,0.97±0.01和0.81±0.01;IL^(-1)β蛋白表达的相对水平分别为0.89±0.01,1.10±0.01,1.22±0.02,0.95±0.02和0.89±0.01;上述指标,模型组与对照组比较,中、高浓度实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论熊果酸可能通过抑制ROS产生和NLRP3炎症小体的激活下调THP-1源巨噬细胞中炎性因子IL^(-1)β、IL-6和TNF-α的表达以发挥免疫调节的作用。 史颖颖 冯金梅 黄丽霞 刘永娟 施璐关键词:熊果酸 炎性细胞因子 2010-2011年恩施和武汉柯萨奇病毒A16型VP1基因特征分析 被引量:4 2017年 目的了解恩施和武汉地区手足口病(HFMD)的分子流行病学特征和病原体柯萨奇病毒A16型(CA16)VP1的基因特征。方法收集2010年4月至2011年8月来自于恩施和武汉地区的189例HFMD患儿咽拭子标本,接种病毒易感Vero细胞,对产生明显细胞病变效应的标本进行初筛和PCR鉴定;对阳性毒株VP1基因序列进行扩增,构建pMD18-T-VP1重组克隆,然后测定其VP1全长序列,通过MEGA5软件构建系统进化树进行系统进化分析,通过DNAstar软件对VP1保守表位的氨基酸序列保守性进行分析。结果手足口病患者以≤5岁婴幼儿为主,男性多于女性。从189例手足口病患儿咽拭子标本中分离到7株CA16,VP1序列进化分析显示均属于B1亚型。对VP1基因上的6个抗原表位进行分析,其中的3个区域呈现高度保守性,这些保守区可被用于疫苗研究。结论 CA16是2010-2011年恩施和武汉地区手足口病的重要病原体之一,属于B1基因型。 史颖颖 刘永娟 邱文洪 何小华 刘万红关键词:柯萨奇病毒A16型 手足口病 系统进化分析 新型冠状病毒与干扰素相互作用研究进展 被引量:1 2021年 新型冠状病毒(2019-nCoV)是新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的病原体,部分严重患者可能会出现呼吸衰竭甚至死亡,给全球公共卫生带来了巨大挑战。2019-nCoV编码的蛋白质不仅参与病毒增殖,而且在拮抗宿主固有免疫尤其是干扰素(interferon,IFN)应答中发挥重要作用。本文对调控宿主干扰素应答反应的2019-nCoV蛋白进行总结,对2019-nCoV和干扰素之间复杂的相互作用进行概述,以期为疾病防控提供理论依据。 施璐 刘永娟 黄丽霞 史颖颖关键词:新型冠状病毒 干扰素 病毒蛋白 免疫抑制 2010年湖北恩施地区和武汉地区肠道病毒71型VP1基因特征分析 被引量:1 2017年 目的了解湖北恩施地区和武汉地区手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)病原体肠道病毒71型(EV-A71)VP1的基因特征。方法收集2010年来自于恩施地区和武汉地区的78例HFMD患儿的咽拭子标本。通过标本接种病毒易感Vero细胞,对产生明显细胞病变效应的阳性标本进行初筛。利用PCR法对初筛阳性标本进行进一步鉴定,对阳性毒株VP1基因序列进行扩增,将其构建到pMD18-T载体上,最后对VP1全长序列进行测序。通过构建系统进化树分析2010年湖北恩施地区和武汉地区EV-A71病毒株的基因型,并分析探讨其与2010年中国大陆其他地区EV-A71病毒株之间的进化关系。结果从78例手足口病标本中分离得到9株EV-A71,进一步对其VP1序列进行系统进化分析发现所有EV-A71分离株均属于C4亚型。2010年恩施地区和武汉地区EV-A71病毒株与2010年中国大陆其他地区EV-A71病毒株在同一进化分支。本研究中分离自伴随震颤患者的EV-A71病毒株(wh64-CHN-10)的VP1-240位点氨基酸残基为丙氨酸,而其余分离自轻症手足口病患者的8株EV-A71病毒株的VP1-240位点为苏氨酸。结论 EV-A71是2010-2011年恩施和武汉地区手足口病的重要病原体之一,属于C4基因型,VP1-240位点的氨基酸可能影响EV-A71的毒力。 谢作崧 刘永娟 史颖颖 初敏 艾燕 李姝 刘万红关键词:肠道病毒71型 手足口病 VP1基因 基因型 系统进化分析