刘忠民
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 供职机构：云南出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 特异性三重PCR快速检测副溶血性弧菌被引量：7
- 2014年
- 【目的】建立同时检测副溶血性弧菌gyrase、tdh、trh基因的三重PCR快速检测方法。【方法】将已报道的这3种基因的引物加入一个PCR反应管中,对引物浓度和退火温度进行优化,找到最佳引物比例和扩增条件。通过特异性验证、灵敏度验证以及方法间对比进行方法确认,其PCR产物使用全自动毛细管电泳分析系统进行分析。【结果】仅在91、269、485 bp处分别出现预期DNA扩增条带;纯培养条件下,扩增gyrase、tdh、trh的菌浓度检测限分别为6.6×101、6.6×102和6.6×101 CFU/mL;本底干扰物存在时,扩增gyrase、tdh、trh的菌浓度检测限分别为6.6×103、6.6×104和6.6×103 CFU/mL;模板DNA浓度检测限为1.36μg/L。检测进境海产品时,检测结果和FDA 2004标准结果一致,且更易辨认和判断。【结论】此检测方法的成功建立,为副溶血性弧菌及携带tdh和/或trh基因的致病性副溶血性弧菌的检测提供了一种准确、高效、便捷的分子技术手段。
- 陈丽萍刘忠民陈芸张继伦彭云霞
- 关键词：副溶血性弧菌三重PCR
- 云南出口新鲜松茸产地属性DNA指纹图谱构建被引量：4
- 2014年
- 收集19个出口松茸主产地的97个样本,使用逆转录因子的DNA分子标签对样本基因组进行PCR扩增;为尽可能区分原产地,对某些产地的样本增加先使用限制性内切酶处理基因组DNA,再次使用逆转录分子标签的步骤。采用全自动DNA分析系统获得一系列DNA指纹图谱。通过比较分析找到同一地理居群共有的DNA指纹图谱特征以及酶切前后的图谱差异。这些指纹图谱特征与松茸原产地间存在显著相关性。
- 陈丽萍杨玲春陈芸陈旭岳亮亮刘忠民傅士华郭永红
- 关键词：限制性内切酶
