刘付红 作品数:4 被引量:6 H指数:2 供职机构: 山东大学医学院病原生物学研究所 更多>> 发文基金: 山东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
三种蠕形螨酸性磷酸酶、碱性磷酸酶染色方法的研究和正交试验法建立山羊蠕形螨ISSR-PCR的最佳反应体系 目的:探索毛囊蠕形螨、皮脂蠕形螨和山羊蠕形螨体内两种酶的染色方法:酸性磷酸酶染色采用Gomori铅-二甲基亚砜法(dimethyl sulfoxide,DMSO);碱性磷酸酶染色采用偶氮偶联法(Kaplow法),确定这两... 刘付红关键词:蠕形螨 酸性磷酸酶 碱性磷酸酶 正交试验法 ISSR-PCR 文献传递 蠕形螨ISSR-PCR的反应体系优化及引物筛选 被引量:3 2012年 目的以蠕形螨的DNA为模板,对蠕形螨简单重复序列锚定PCR(ISSR-PCR)反应体系优化并对ISSR引物进行筛选,为ISSR分析奠定基础。方法用自然沉降法收集山羊蠕形螨,用基因组DNA提取试剂盒提取山羊蠕形螨DNA,并以此为模板,以(CA)8RG(R为1分子的嘧啶)为引物,利用正交实验法,从Mg2+浓度、引物用量、dNTPs、DNA模板用量和TaqDNA聚合酶以及退火温度对蠕形螨ISSR-PCR反应体系进行优化,并以优化的反应体系筛选ISSR-PCR的引物。结果 ISSR-PCR 25μL最佳反应体系包括:0.4 mmol/L Mg2+、30 pmol引物、30~60 ng模板DNA、2u Taq酶,最佳退火温度为49℃、循环35次。筛选出10条条带清晰、多态性好、重复性高的引物。结论筛选出蠕形螨ISSR-PCR最佳反应体系和理想的引物,为蠕形螨的分子生物学研究奠定了基础。 刘艳荣 刘付红 肖克源 郭淑玲 冯玉新 袁方曙关键词:微卫星重复 反应体系优化 DNA引物 两种人体蠕形螨足和外生殖器超微结构的观察 被引量:2 2010年 目的用环境扫描电镜(ESEM)观察毛囊蠕形螨和皮脂蠕形螨足及外生殖器的超微结构,并讨论其分类意义。方法用刮片式及镊式取螨器从成人额部皮肤取出活螨,用显微操作技术清洗分离后1 h内用ESEM进行扫描、拍照。结果清楚地观察到两种人体蠕形螨足和外生殖器的超微结构。发现两种蠕形螨足爪的形态和数目、外生殖器的位置和外形均不同:毛囊蠕形螨的足较粗壮,有股距,每足跗节具双叉爪、三叉爪各1个,叉爪较钝,双叉爪后有一指向后方的爪距;雌螨阴门位于腹面第4对足水平正中,纵向裂缝状阴门与其前方的一弧形皱褶呈锚状;雄螨外生殖器位于背部4个背足体毛中央,阳茎呈毛笔头状可从生殖口伸出。皮脂蠕形螨足较细,无股距,足跗节的叉爪尖锐且数量和外形变异较大,无爪距;雌螨阴门位于腹面第4对足水平正中之后,纵向裂缝状阴门与其前后两条弧形皱褶呈"工"字形;观察50条皮脂蠕形螨未见雄性外生殖器。结论用环境扫描电镜观察人体蠕形螨,标本不需特殊处理,得到的图像清晰、饱满。足和外生殖器超微结构的不同对于两种蠕形螨有分类学意义。 刘付红 郭淑玲 刘莹 赵岩 冯玉新 袁方曙关键词:生殖器 超微结构 两种人体蠕形螨口器环境扫描电镜观察 被引量:2 2008年 目的用环境扫描电子显微镜(environmental scanning electron microscope,ESEM)观察两种人体蠕形螨的口器,判断其性质、食性和致病性。方法用显微操作技术清洗处理活螨,并用ESEM观察。结果与结论用ESEM观察到毛囊蠕形螨具有一种特殊的刺吸式口器,内有口针,皮脂蠕形螨也有类似的口器,但无口针。 冯玉新 郭淑玲 刘莹 赵岩 刘付红 袁方曙关键词:蠕形螨 超微结构