丁毅
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向小鼠肝癌干/祖细胞免疫治疗的实验研究
- 研究背景：现有研究表明，肿瘤干细胞是肿瘤发生、发展的重要根源之一。虽然手术、放疗和化疗等方法能够有效清除实体肿块或减低肿瘤负荷，取得了一定临床疗效。但肿瘤干细胞的自我更新、高增殖和耐化疗药等自我保护的特性，使得常规手段难...
- 丁毅
- 关键词：肿瘤干细胞流式细胞术动物实验免疫治疗
- 小鼠肝癌H22细胞中不同干性亚群的分选与鉴定
- 2012年
- 目的利用干细胞中乙醛脱氢酶(ALDH)高表达的特性分选并鉴定肿瘤细胞中存在的ALDHhigh、ALDHlow及ALDHneg细胞亚群。方法以流式细胞术检测小鼠肝癌H22、人胃癌BGC-823、结肠癌LS-174T、肝癌SMMC-7721细胞及胰腺癌SW-1990和Panc-1细胞系中ALDH+细胞的表达;在确定ALDH阳性表达的细胞中,以ALDH表达的高低差异,将细胞分选并定义为ALDHhigh、ALDHlow、ALDHneg细胞亚群;对分选出的3种细胞亚群进行CD133/CD44表型及细胞周期分析。结果 (1)在小鼠肝癌H22细胞、人结肠癌LS-174T细胞、胰腺癌SW-1990细胞和Panc-1细胞中存在着ALDH阳性表达,而在人胃癌BGC-823细胞和肝癌SMMC-7721细胞中未见ALDH表达;(2)在小鼠肝癌H22细胞中能明确分选出存在荧光差异的3群细胞即ALDHhigh、ALDHlow和ALDHneg细胞亚群;(3)H22的ALDHhigh、ALDHlow、ALDHneg3个亚群中CD133/CD44表达存在差异,其表达比例依次减少;(4)H22细胞中ALDHhigh亚群主要处于G0/G1期,ALDHlow亚群处于S期,而ALDHneg亚群处于G2/M期。结论在肿瘤细胞中存在着介乎于肿瘤干细胞与终末肿瘤细胞之间的特异性亚群,该亚群为肿瘤治疗提供了新的方向。
- 丁毅梁文涛胡鑫梁凯孙慧伟徐迎新
- 关键词：乙醛脱氢酶肿瘤干细胞流式细胞术细胞表型
- 小鼠肝癌H22细胞不同乙醛脱氢酶表达亚群的致瘤性分析被引量：1
- 2012年
- 【目的】利用干细胞中乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)高表达的特性,分选小鼠肝癌H22细胞中ALDH表达不同的亚群,分析细胞球体形成与致瘤性,为针对肿瘤干/祖细胞的肿瘤靶向治疗奠定基础。【方法】流式细胞术分选小鼠肝癌H22细胞的ALDH阳性、弱阳性和阴性细胞亚群;将分选出的各亚群细胞,在干细胞培养基中培养,观察球体形成;将各亚群细胞分别以不同数量级在小鼠背部皮下注射致瘤,观察成瘤情况,绘制生长曲线。【结果】(1)小鼠H22细胞可分选出ALDHhigh,ALDHlow,ALDHneg3个亚群细胞。(2)ALDHhigh亚群细胞可形成细胞球体,ALDHlow和ALDHneg亚群细胞不能形成球体。(3)ALDHlow亚群在接种2×102个细胞和2×104个细胞时,肿瘤的生长趋势和平均体积均高于其它2个亚群。【结论】H22细胞中ALDHhigh亚群ALDH表达阳性且可以形成球体,符合干细胞特征;ALDHlow亚群呈ALDH弱表达,体外培养不能形成球体,但致瘤性高于ALDHhigh和ALDHneg亚群细胞,是出现分化并进入快速增殖状态的亚群,可能是在肿瘤生长与复发中具有重要意义的肿瘤祖细胞,应成为肿瘤治疗的重要标靶。
- 丁毅梁文涛胡鑫梁凯孙慧伟徐迎新
- 关键词：乙醛脱氢酶肿瘤干细胞动物实验
- 腹腔镜辅助胃癌根治术后肝功能变化及其影响因素被引量：2
- 2012年
- 目的评估腹腔镜辅助胃癌根治术后患者肝功能变化并分析其有关影响因素。方法收集2008年6月至2010年6月期间在解放军总医院行胃癌根治术及结肠癌根治术病例的临床资料,分为开腹胃癌根治术组(OG组,n=43)、腹腔镜辅助胃癌根治术组(LAG组,n=35)以及腹腔镜辅助结肠癌根治术组(LAC组,n=23),比较各组患者术前及术后第1、3、5和7天血清AST、ALT、TB和ALP水平变化并分析其相关的影响因素。结果 LAG组和OG组患者术后5 d内血清AST和ALT水平均较术前明显增高(P<0.05),LAC组患者术后未观察到肝功能的变化(P>0.05);除术后第1天LAG组血清AST和ALT水平显著高于OG组(P=0.035和P=0.041)和术后第3天LAG组血清ALT水平显著低于OG组(P=0.048)外,2组在其余时间点血清AST和ALT水平的差异无统计学意义(P>0.05);LAG组患者术后5 d内血清AST和ALT水平均较LAC组为高(P<0.05)。LAG组和OG组患者术前及术后血清TB和ALP水平无明显变化(P>0.05)。胃癌患者术后血清ALT水平升高与体重指数(P=0.038)、手术时间(P=0.011)、术中肝损伤(P=0.035)以及入肝血流的异常阻断(P=0.048)有关,而与手术方式无关(OG比LAG,P>0.05)。结论胃癌根治术后患者均有一过性肝功能损害,而造成腹腔镜辅助胃癌根治术后患者肝功能异常的原因可能与术中对肝脏的牵拉和损伤以及对入肝血流的异常阻断有关,而非CO2气腹的影响。对于无严重肝功能损害或其他重要脏器疾患的患者来说,腹腔镜辅助胃癌根治术是安全、可行的。
- 张维涛杜晓辉宁宁晏阳丁毅闫文姬
- 关键词：胃癌腹腔镜手术胃切除术肝脏功能
- 工程化肝组织肝表面片状植入新方法被引量：3
- 2012年
- 目的探索较大尺度工程化肝组织原位肝表面贴覆片状植入、尽快建立血供的可行性。方法将采用胰酶冷消化法分离的新生大鼠肝细胞（1×10^10个／L）、肺组织块贴壁法分离的大鼠微血管内皮细胞（1×10^10个／L），与片状胶原支架、血管内皮生长因子（VEGF，10g／L）复合构建肝细胞／内皮细胞／血管生长因子／胶原支架复合的片状工程化肝组织。将其在15只大鼠肝表面贴覆植入，4周后取样进行大体观察及组织切片苏木素-伊红（HE）染色。结果分离的肝细胞及内皮细胞活率均为90％以上。片状工程化肝组织经肝表面贴覆法植入后，大体观察可见能与原位肝脏紧密贴合生长，形成体积大于1cm3的类肝样组织。体内植入后4周，植入物与肝脏贴合紧密，融合生长。组织学观察显示移植物中肝细胞均匀分布，未见细胞变性及死亡，有血管生成。结论肝表面贴覆植入法简便安全，可构建较大尺寸的工程化肝组织，有望达到原位修复受损肝脏的目的。
- 刘巨超周海洋孙慧伟丁毅徐迎新
- 关键词：肝组织工程血管内皮细胞
- 脾蒂血管束法构建工程化肝组织被引量：1
- 2012年
- 目的通过在脾蒂血管束内注射工程化肝组织凝胶，探讨一种体内植入较大尺度组织工程化肝脏的新方法。方法2×10^7新生大鼠肝细胞与1ml生物蛋白胶混合构建工程化肝组织凝胶。切除sD大鼠的脾脏，并远端结扎、近端套圈后形成血管束。将凝胶注入血管束内，形成体积≥1cm。的球形组织；同法构建肝组织凝胶植入大腿皮下作为对照。术后2周行大体观察，组织切片苏木素．伊红（HE）染色。结果皮下组残留组织块较小，直径（1．63±0．55）mm，其内血管组织少。实验组形成了较大的组织块，直径（7．33±2．40）mm，内有大量血管形成。结论在脾蒂血管束内构建工程化肝组织可以形成血管化的较大尺度类肝组织。
- 周海洋刘巨超孙慧伟丁毅赵云山徐迎新
- 关键词：血管化
- 筛选适宜于构建工程化肝组织的凝胶材料支架被引量：1
- 2012年
- 目的使用不同可注射性凝胶支架体外进行新生大鼠肝细胞立体培养,为后期体内植入筛选相容性较好的支架材料。方法使用胰酶冷消化法分离新生大鼠肝细胞。将肝细胞分别与纤维蛋白胶、壳聚糖凝胶、鼠尾胶原、透明质酸钠支架材料复合,形成工程化肝组织凝胶,接种于培养板中,并通过定期光镜来观察大鼠肝细胞,四唑盐(MTT)比色法评价细胞活性。溴甲酚绿法测上清白蛋白含量,脲酶比色法测定上清尿素含量。结果四组均可形成三维生长的工程化类肝样组织。培养第4天,生物蛋白胶及壳聚糖组的培养上清液中尿素含量达到高峰,分别为培养第1天的1.31倍和1.28倍,随后含量缓慢下降。培养第7天,新生大鼠肝细胞在纤维蛋白凝胶及壳聚糖凝胶中密集生长,同时MTT显示细胞活性及白蛋白分泌达到高峰,OD值分别为培养初期的1.11倍和1.17倍,上清白蛋白含量分别是初期的1.13倍和1.15倍。而在透明质酸钠及鼠尾胶原凝胶中则细胞生长缓慢,白蛋白及尿素含量持续下降。结论 4种可注射性支架中,壳聚糖和生物蛋白胶对于新生大鼠肝细胞生物相容性较好,透明质酸和鼠尾胶原较差,前两者更适合用于工程化肝组织的构建。
- 周海洋刘巨超孙慧伟赵云山丁毅徐迎新
- 关键词：纤维蛋白凝胶
