马秀兴
- 作品数:2 被引量:10H指数:2
- 供职机构:青岛大学医学院更多>>
- 发文基金:山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 小干扰RNA抑制胚胎腭突间充质细胞7-脱氢胆固醇还原酶基因的表达被引量:2
- 2012年
- 目的观察小鼠胚胎腭突间充质(EPM)细胞中7-脱氢胆固醇还原酶基因(Dhcr7)的表达,筛选出针对EPM细胞Dhcr7的最有效小干扰RNA(siRNA)序列。观察RNA干扰(RNAi)沉默Dhcr7的表达后,对EPM细胞增殖的影响。方法化学合成3条针对Dhcr7mRNA的siRNA,阳性脂质体介导转染EPM细胞。荧光显微镜观察转染效率,Westernblot法检测Dhcr7蛋白表达变化,噻唑蓝(MTT)检测沉默后增殖率的变化。结果siRNA转染效率为72.6%。3条siRNA对EPM细胞Dhcr7基因表达都有抑制作用,siRNA-3抑制作用最明显,达60.2%,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。Dhcr7沉默后EPM细胞增殖抑制率为56.4%,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P〈0.01)。结论筛选出针对EPM细胞Dhcr7最有效的siRNA序列。siRNA可抑制EPM细胞Dhcr7基因表达,Dhcr7表达降低可抑制EPM细胞增殖。
- 庄翠竹马秀兴肖文林张春阳王双义
- 关键词:RNA干扰
- 原代培养人增生性瘢痕成纤维细胞的生物学行为被引量:8
- 2013年
- 背景:增生性瘢痕组织的形成是创面愈合过程中不可避免的,但是增生性瘢痕组织的形成产生很多不良的影响。目的:建立可靠的人增生性瘢痕成纤维细胞的原代培养方法。方法:采用组织贴壁法和消化法分别进行人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞的原代培养,使用含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基,37℃,体积分数5%CO2,饱和湿度下培养,分别描述其生长曲线、形态及波形蛋白的表达。结果与结论:组织贴壁法人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞培养成功,20-40d可传第1代,以后每7-10d可传1代,细胞为长梭形,波形蛋白表达阳性;消化法培养人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞成功,15-20d细胞可融合成片,细胞为长梭形,波形蛋白表达阳性。进一步证实两种方法进行人增生性瘢痕成纤维细胞的原代培养均培养成功。
- 杜启翠肖文林孙桂兰马秀兴姚如永
- 关键词:人增生性瘢痕成纤维细胞原代培养贴壁法消化法生物学行为